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RhEPO對HIBD新生大鼠腦白質損傷及神經(jīng)再生的神經(jīng)保護作用研究

發(fā)布時間:2020-09-29 15:17
   目的通過檢測應用重組人促紅細胞生成素(recombinant human erythropoietin, RhEPO)對新生鼠缺血缺氧性腦損傷后腦白質髓鞘損傷的程度以及神經(jīng)再生的影響,探討RhEPO的神經(jīng)保護作用。 方法選取90例7日齡新生鼠為研究對象,隨機分為以下三組:假手術組(n=30例);對照組(生理鹽水組)(n=30例);實驗組(RhEPO組)(n=30例)。對照組與實驗組分別通過結扎新生鼠左側頸總動脈以及置于8%的氧氣中2.5小時建立新生鼠缺血缺氧性腦損傷(hypoxia-ischemic brain damage, HIBD)模型,假手術組僅游離左側頸總動脈,不結扎,不低氧處理。實驗組于建立模型后多時間點腹腔注射RhEPO(1000u/kg),其余兩組予相同劑量生理鹽水于相同時間點腹腔注射。于HIBD模型建立后7天,14天分兩個時間點分批處死研究對象。通過免疫組化技術檢測髓鞘堿性蛋白與神經(jīng)絲比值(MBP/NF-200)以及遷移神經(jīng)祖細胞(DCX)計數(shù),評價RhEPO對于減輕新生鼠缺血缺氧性腦白質髓鞘損傷以及促進神經(jīng)再生的神經(jīng)保護作用。 結果1. MBP/NF-200:7天時對照組及實驗組MBP/NF均低于假手術組(P0.01)。14天時實驗組MBP/NF高于對照組(P0.05)。7天時對照組與實驗組MBP/NF-200低于14天時的對照組與實驗組(P0.01)。2.DCX陽性細胞:7天與14天時對照組及實驗組DCX陽性細胞計數(shù)均高于假手術組(P0.01)。實驗組DCX陽性細胞計數(shù)均高于對照組(P0.01)。7天時假手術組與對照組DCX陽性細胞計數(shù)明顯高于14天時假手術組與對照組(P0.01);7天時實驗組DCX陽性細胞計數(shù)明顯低于14天時實驗組DCX陽性細胞計數(shù)(P0.01),上述差異均有統(tǒng)計學意義。實驗組HE染色顯示腦組織的病理損傷程度明顯低于對照組。 結論1.應用外源性重組人促紅細胞生成素可以提高HIBD發(fā)生后MBP/NF-200的比值,減輕腦白質髓鞘的損傷。2.應用外源性重組人促紅細胞生成素可以進一步增加新生鼠缺血缺氧性腦損傷后遷移神經(jīng)祖細胞的數(shù)目,促進神經(jīng)再生。
【學位單位】:青島大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2011
【中圖分類】:R722.19
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 實驗藥品和試劑
        1.1.3 主要實驗儀器及設備
    1.2. 方法
        1.2.1 實驗動物的分組與處理
        1.2.2 標本采集
        1.2.3 制備腦組織切片
        1.2.4 免疫組織化學染色
        1.2.5 HE切片制作
第二章 數(shù)據(jù)采集及處理
    2.1 數(shù)據(jù)采集
    2.2 統(tǒng)計學處理
第三章 結果
    3.1 新生鼠缺血缺氧性腦損傷(HIBD)模型建立
    3.2 腦組織外觀
    3.3 新生大鼠腦組織HE染色病理改變
    3.4 新生大鼠海馬區(qū)DCX陽性細胞計數(shù)
    3.5 新生大鼠腦白質區(qū)MBP/NF-200的免疫染色平均強度相對比值
第四章 討論
第五章 結論
附圖表
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝

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