目的: 通過(guò)免疫組化方法標(biāo)記先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung’s Disease,HD )和巨結(jié)腸同源病(Allied Hirschsprung’s Disease,AHD)腸壁內(nèi)Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of cajal,ICCs),觀察ICCs的分布狀態(tài),以探討HD和AHD的發(fā)病機(jī)制 方法: 選經(jīng)鋇劑灌腸,直腸肛管測(cè)壓,乙酰膽堿酯酶檢測(cè),以及病理組織學(xué)檢查確證為HD和AHD的患者各20例,取吻合口遠(yuǎn)端直腸和近端結(jié)腸的全層腸壁作為實(shí)驗(yàn)組。另取16例正常結(jié)腸標(biāo)本作為對(duì)照組。分別用鼠抗人c-kit單克隆抗體(CD117),常規(guī)SP法免疫組化染色,DAB顯色,以PBS代替一抗染色作陰性對(duì)照,行甲苯胺藍(lán)染色鑒別肥大細(xì)胞。光鏡下觀察ICCs的分布,用ImagePro-Plus圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)ICCs的面積,對(duì)HD和AHD的遠(yuǎn)端和近端結(jié)腸腸壁內(nèi)ICCs進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果: 對(duì)照組:ICCs主要分布在肌間神經(jīng)叢周圍和環(huán)縱肌層內(nèi),神經(jīng)叢周圍ICCs包繞分布,彼此之間緊密連接,肌層間可見(jiàn)連續(xù)分布的ICCs,與周圍界限明顯;肌層內(nèi)ICCs位于肌間隔內(nèi),平行于肌細(xì)胞走形。 HD組遠(yuǎn)端腸管(即無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞區(qū)):神經(jīng)叢周圍和各肌層內(nèi)ICCs明顯減少甚至缺如,ICCs間無(wú)連接;近端腸管(有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞區(qū)):ICCs豐富,大量分布于環(huán)肌層內(nèi)形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),肌間神經(jīng)叢同樣有大量ICCs分布;比較近遠(yuǎn)端腸壁內(nèi)ICCs的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。 近端與對(duì)照組比較差異沒(méi)有顯著性(P0.1),遠(yuǎn)端與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。 AHD組:遠(yuǎn)端腸管:神經(jīng)叢大小不一,ICCs分布差異大;主要分布于肌間神經(jīng)叢周圍和環(huán)肌層內(nèi)。有的神經(jīng)叢周圍可見(jiàn)ICCs圍繞,但有的周圍則缺如,大多數(shù)神經(jīng)叢區(qū)ICCs減少,環(huán)肌層內(nèi)ICCs明顯減少;近端腸管:ICCs豐富,但個(gè)別標(biāo)本近遠(yuǎn)端腸壁內(nèi)ICCs均有減少;比較AHD組近遠(yuǎn)端腸壁內(nèi)ICCs分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。近端與對(duì)照組比較差異沒(méi)有顯著性(P0.1),遠(yuǎn)端與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。 總體比較HD組、AHD組遠(yuǎn)端腸管及對(duì)照組中ICCs分布,其差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(〈P0.001)。HD組與AHD遠(yuǎn)端腸管ICCs分布的差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。對(duì)照組和近端腸管總體比較三組間無(wú)明顯差異。 結(jié)論: 本研究證實(shí)HD、AHD病變腸管中除了神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的異常外,病變腸管中還缺少ICCs。ICCs的減少和分布異常必然導(dǎo)致結(jié)腸慢波節(jié)律和興奮傳導(dǎo)的異常,從而引起或加重HD和AHD的病情。ICCs在HD與AHD之間的分布不同可能與這兩者之間的臨床癥狀差異存在相關(guān)性;AHD組內(nèi)ICCs的分布差異支持AHD患者臨床癥狀的多樣性。腸管中殘存的ICCs可能與臨床癥狀的輕重程度以及預(yù)后有一定關(guān)系。
【學(xué)位單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R726.5
【部分圖文】：

正常結(jié)腸：ICCs分布密集，在神經(jīng)叢周圍環(huán)繞，環(huán)肌層中成珠簾狀分布；(×200)

正常結(jié)腸：ICCs在環(huán)、縱肌層間連續(xù)分布；(×400)

巨結(jié)腸遠(yuǎn)端腸管（無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞區(qū)）：未見(jiàn)ICCs分布；（×200）

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2827094