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新生大鼠脊髓背角膠狀質神經元形態(tài)學與電生理學特性研究

發(fā)布時間:2017-04-02 11:06

  本文關鍵詞:新生大鼠脊髓背角膠狀質神經元形態(tài)學與電生理學特性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:新生兒接受致痛性操作發(fā)生率高,會造成一系列近期和遠期不良影響,而如今對于新生兒疼痛的評估及處理方面尚不完善,且其發(fā)病機制尚不明確。脊髓背角膠狀質(substantia gelatinosa,SG)區(qū)是疼痛信息向中樞傳遞的第一個中繼站,因此SG神經元在慢性疼痛的傳遞過程中非常重要,而對該神經元的形態(tài)學及電生理學認識仍無定論。為此,利用全細胞膜片鉗和免疫組化技術,觀察新生大鼠SG神經元的大體形態(tài),并研究其電生理學特性,以期為新生兒疼痛的機制研究提供幫助。方法:選取7-10天新生SD大鼠,雌雄各半,予低溫麻醉及心臟灌流后,以腰骶膨大為中心分離出腰1-骶3段脊髓,依次剝離硬脊膜、軟脊膜及所附著的神經根。用振動切片機切取300微米(μm)厚的脊髓縱切片,利用全細胞膜片鉗技術,將電極內液中含有neurobiotin 488的電極緩慢靠近SG神經元,破膜后形成全細胞封接,此時給予神經元一系列刺激,分別記錄其被動膜特性(包括靜息膜電位、膜電容、膜電阻)和主動膜特性(動作電位,包括放電模式、閾值、幅度、半寬度);同時neurobiotin 488緩慢滲入神經元,保持鉗制狀態(tài)至少10分鐘(min),隨后將脊髓組織固定、脫水,并于共聚焦顯微鏡下觀察其大體形態(tài)。新生大鼠SG神經元(n=129)根據其大體形態(tài),可分別納入以下五個組別:島神經元(islet neurons)、中央神經元(central neurons)、放射狀神經元(radial neurons)、垂直神經元(vertical neurons)和不能分類神經元(unclassified neurons);另外,根據其放電模式,可分別納入以下七個組別:強直放電(tonic-firing)、延遲放電(delayed-firing)、初始放電(initial-burst)、單個放電(single-spiking)、階段放電(phasic-bursting)、首次間隔放電(gap-firing)、無放電(reluctant-firing)。結果:1.新生大鼠SG神經元大體形態(tài)可分為islet neurons、central neurons、radial neurons、vertical neurons和unclassified neurons;2.新生大鼠不同形態(tài)SG神經元的胞體直徑和突觸頭尾背腹側長度各異;3.新生大鼠不同形態(tài)SG神經元的被動膜特性各異,包括靜息膜電位(RMP)、膜電容(Cm)、膜電阻(Rm);4.新生大鼠不同形態(tài)SG神經元動作電位的閾值(threshold)、幅度(height)、半寬度(half-width)各異;5.新生大鼠SG神經元的放電模式可分為tonic-firing、delayed-firing、initial-burst、single-spiking、phasic-bursting、gap-firing和reluctant-firing;6.新生大鼠不同放電模式SG神經元主被動膜特性各異;7.新生大鼠不同形態(tài)SG神經元中各放電模式所占比例不同;8.新生大鼠不同放電模式SG神經元中各大體形態(tài)所占比例不同。結論:新生大鼠SG神經元的形態(tài)學分類及其主被動膜特性各有其特征性。我們的研究表明SG神經元形態(tài)學與電生理學之間存在一定聯(lián)系,且同一形態(tài)SG神經元具有相似的電生理學特性。SG神經元的研究有可能為新生兒疼痛的機制研究提供理論依據。
【關鍵詞】:脊髓背角膠狀質神經元 形態(tài)學 電生理學 膜特性 膜片鉗
【學位授予單位】:南昌大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R722.1
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • ABSTRACT5-10
  • 中英文縮略詞表10-11
  • 第1章 引言11-15
  • 1.1 新生兒疼痛11
  • 1.2 脊髓背角膠狀質神經元11-15
  • 1.2.1 SG神經元的形態(tài)學特性12
  • 1.2.2 SG神經元的電生理學特性12-13
  • 1.2.3 SG神經元形態(tài)學與電生理學的關系13-15
  • 第2章 材料與方法15-25
  • 2.1 實驗材料15-17
  • 2.1.1 實驗動物15
  • 2.1.2 實驗儀器15-16
  • 2.1.3 主要試劑16-17
  • 2.2 實驗溶液配制17-19
  • 2.2.1 蔗糖解剖液17-18
  • 2.2.2 人工腦脊液18
  • 2.2.3 電極內液18-19
  • 2.2.4 其他常用試劑及液體19
  • 2.3 脊髓縱切片制備19-20
  • 2.4 電極制備20
  • 2.5 電生理記錄20-24
  • 2.5.1 記錄前準備20
  • 2.5.2 新生大鼠脊髓背角SG神經元全細胞膜片鉗記錄20-22
  • 2.5.3 新生大鼠脊髓背角SG神經元被動膜特性記錄22
  • 2.5.4 新生大鼠脊髓背角SG神經元動作電位記錄22-23
  • 2.5.5 新生大鼠脊髓背角SG神經元形態(tài)學記錄23-24
  • 2.6 統(tǒng)計學分析24-25
  • 第3章 結果25-41
  • 3.1 新生大鼠脊髓背角SG神經元的形態(tài)學特性25-30
  • 3.2 新生大鼠脊髓背角不同形態(tài)SG神經元的電生理學特性30-33
  • 3.2.1 不同形態(tài)SG神經元的被動膜特性30
  • 3.2.2 不同形態(tài)SG神經元的主動膜特性30-33
  • 3.3 新生大鼠脊髓背角SG神經元的放電模式33-35
  • 3.4 新生大鼠脊髓背角SG神經元的電生理學特性35-38
  • 3.4.1 不同放電模式SG神經元的被動膜特性35
  • 3.4.2 不同放電模式SG神經元的主動膜特性35-38
  • 3.5 新生大鼠脊髓背角SG神經元形態(tài)學與電生理學的關系38-41
  • 3.5.1 不同形態(tài)SG神經元中各放電模式所占比例不同38-39
  • 3.5.2 不同放電模式SG神經元中各大體形態(tài)所占比例不同39-41
  • 第4章 討論41-46
  • 4.1 新生大鼠脊髓背角SG神經元的形態(tài)學特性41-42
  • 4.2 新生大鼠脊髓背角SG神經元的放電模式42
  • 4.3 新生大鼠脊髓背角不同形態(tài)SG神經元的主被動膜特性42-43
  • 4.4 新生大鼠脊髓背角不同放電模式SG神經元的主被動膜特性43
  • 4.5 新生大鼠脊髓背角SG神經元形態(tài)學與電生理學的關系43-44
  • 4.6 研究局限之處及尚待解決的問題44-45
  • 4.7 小結45-46
  • 第5章 結論與展望46-47
  • 5.1 結論46
  • 5.2 進一步研究方向46-47
  • 致謝47-48
  • 參考文獻48-52
  • 攻讀學位期間的研究成果52-53
  • 綜述 脊髓背角膠狀質神經元形態(tài)與電生理學特性的研究進展53-65
  • 參考文獻63-65

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1 劉娜娜;新生大鼠脊髓背角膠狀質神經元形態(tài)學與電生理學特性研究[D];南昌大學;2016年


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本文編號:282366

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