目的:利用體外批量發(fā)酵模型模擬人體腸道,研究急性淋巴細(xì)胞白血病患兒(ALL)化療期間腸道菌群對(duì)多種低聚寡糖的酵解情況。通過(guò)氣相色譜儀檢測(cè)糞便以及寡糖發(fā)酵后短鏈脂肪酸含量,探討急性淋巴細(xì)胞白血病不同化療時(shí)期腸道菌群紊亂與菌群代謝的相互關(guān)系,為早期急性淋巴細(xì)胞白血病患兒化療時(shí)口服益生菌或者益生元提供臨床依據(jù)。資料與方法:30例初診未治急性B淋巴細(xì)胞白血病患兒,平均年齡5.12±2.82歲,男女之比為2:1,收集時(shí)期為CCCG-2015-ALL方案VDLP誘導(dǎo)療程,根據(jù)糞便采集點(diǎn)分為化療前組、化療中組(骨髓抑制期:中性粒細(xì)胞0.5x109/L)、化療后組(骨髓恢復(fù)期:中性粒細(xì)胞0.5x109/L,血小板80x109/L)。另外根據(jù)化療中有無(wú)益生菌干預(yù)將該30例初診未治ALL患兒分為益生菌干預(yù)組16例(其中,口服酪酸梭菌三聯(lián)活菌散劑8例,口服復(fù)合乳酸菌膠囊6例,口服雙歧桿菌三聯(lián)活菌散劑2例,口服益生菌時(shí)間均為VDLP整個(gè)療程,口服劑量為1/2成人劑量),益生菌未干預(yù)組14例。正常對(duì)照組為于我院兒�？企w檢正常兒童12例,平均年齡1.79±0.96歲,男女之比為1:1。收集并處理其糞便標(biāo)本后,接種于分別含有FOS(低聚果糖)、MOS(低聚甘露糖)、INU(菊粉)、XYI(木糖醇)以及YCFA(不含任何碳水化合物)低聚糖培養(yǎng)基中發(fā)酵24小時(shí)后檢測(cè)氣體產(chǎn)生量,同時(shí)采集上清液測(cè)定短鏈脂肪酸(SCFAs)含量,應(yīng)用SPASS 22.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:一、未發(fā)酵糞便中,各組短鏈脂肪酸(SCFAs)含量比較1.ALL患兒三組未發(fā)酵糞便短鏈脂肪酸(SCFAs)含量與正常對(duì)照組比較化療前組(n=30)總酸、乙酸、丙酸、丁酸含量均比正常對(duì)照組高,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。化療中組(n=14)中,丙酸含量明顯高于正常對(duì)照組(P0.05),化療后組(n=14),總酸、乙酸、丙酸含量明顯高于正常對(duì)照組(P0.05)。2.益生菌未干預(yù)組(n=14)未發(fā)酵糞便短鏈脂肪酸三組自身比較益生菌未干預(yù)組(n=14)未發(fā)酵糞便總量、乙酸、丙酸、丁酸含量在化療前組、化療中組、化療后組中呈現(xiàn)先下降后上升趨勢(shì),經(jīng)兩兩比較后,丁酸在化療前組及化療后組均明顯高于化療中組(P0.05),余短鏈脂肪酸兩兩比較后未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.益生菌干預(yù)組(n=16)未發(fā)酵糞便短鏈脂肪酸(SCFSs)含量三組自身比較益生菌干預(yù)組(n=16)未發(fā)酵糞便總酸、乙酸、丙酸含量在化療前組、化療中組以及化療后組三組中呈現(xiàn)不斷上升趨勢(shì),而丁酸在三組中呈現(xiàn)先下降、后上升趨勢(shì),各短鏈脂肪酸含量在三組兩兩比較無(wú)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4.益生菌干預(yù)組(n=16)和益生菌未干預(yù)組(n=14)未發(fā)酵糞便短鏈脂肪酸(SCFAs)變化量比較益生菌干預(yù)組(n=16)在化療前至骨髓抑制期總酸、乙酸及丁酸增加量(即化療中組-化療前組)較益生菌未干預(yù)組(n=14)明顯增多(P0.05);骨髓抑制期至骨髓恢復(fù)期以及整個(gè)化療期間短鏈脂肪酸(SCFAs)含量在兩組中比較未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)差異(P0.05)。二、糞便發(fā)酵后,各組短鏈脂肪酸(SCFAs)含量及產(chǎn)氣比較1.ALL患兒三組糞便發(fā)酵后短鏈脂肪酸(SCFAs)含量以及氣壓值與正常對(duì)照組比較1.1短鏈脂肪酸(SCFAs):化療前組和正常對(duì)照組相比,FOS培養(yǎng)基中,化療前組總酸乙酸、丙酸含量明顯低于正常對(duì)照組(P0.05),INU培養(yǎng)基中,化療前組總酸和乙酸含量明顯低于正常對(duì)照組(P0.05);化療中組和正常對(duì)照組相比,YCFA培養(yǎng)基中,化療中組乙酸和丁酸含量明顯高于正常對(duì)照組(P0.05),XYI培養(yǎng)基中,化療中組總酸含量明顯低于正常對(duì)照組(P0.05),丁酸含量明顯高于正常對(duì)照組(P0.05);化療后組和正常對(duì)照組比較,YCFA培養(yǎng)基中,化療后組乙酸含量明顯高于正常對(duì)照組(P0.05)。1.2產(chǎn)氣:化療前組所有培養(yǎng)基氣壓值均較正常對(duì)照組低,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,FOS、MOS、INU培養(yǎng)基中氣壓值明顯低于正常對(duì)照組(P0.05);化療中組幾乎所有培養(yǎng)基(除FOS外)產(chǎn)生的氣體量均較正常對(duì)照組低,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,僅有MOS培養(yǎng)基氣壓值明顯低于正常兒童組(P0.05);化療后組與正常對(duì)照組所有培養(yǎng)基中氣壓值和正常對(duì)照組相比,均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)(P0.05)。2.益生菌未干預(yù)組(n=14)糞便發(fā)酵后短鏈脂肪酸(SCFAs)含量和產(chǎn)氣三組自身比較2.1短鏈脂肪酸(SCFAs):INU培養(yǎng)基丁酸含量在化療中組明顯大于化療前組(P0.05),XYI培養(yǎng)基丙酸含量化療中組明顯小于化療前組(P0.05),余培養(yǎng)基中短鏈脂肪酸(SCFAs)兩兩相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.2產(chǎn)氣:FOS、MOS、INU培養(yǎng)基化療前組、化療中組、化療后組氣壓值呈上升趨勢(shì),而YCFA以及XYI培養(yǎng)基氣壓值在三組中呈現(xiàn)上升后下降趨勢(shì)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,FOS、INU培養(yǎng)基化療中組氣壓值明顯大于化療前組(P0.05),化療后組氣壓值明顯大于化療前組(P0.05);MOS培養(yǎng)基化療后組氣壓值明顯大于化療前組和化療中組(P0.05);余培養(yǎng)基氣壓值兩兩比較,均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.益生菌干預(yù)組(n=16)糞便發(fā)酵后短鏈脂肪酸(SCFAs)含量和產(chǎn)氣三組自身比較3.1短鏈脂肪酸(SCFAs):益生菌干預(yù)組YCFA、FOS、MOS、XYI培養(yǎng)基總酸、乙酸、丙酸、丁酸含量化療前組、化療中組、化療后組均呈上升趨勢(shì)�；熤薪M與化療前組相比:YCFA培養(yǎng)基總酸、MOS培養(yǎng)基丙酸、INU培養(yǎng)基總酸、INU培養(yǎng)基乙酸、INU培養(yǎng)基丁酸化療中組含量均明顯高于化療前組(P0.05);化療后組和化療前組相比:YCFA培養(yǎng)基總酸、YCFA培養(yǎng)基乙酸、YCFA培養(yǎng)基丙酸、MOS培養(yǎng)基乙酸、MOS培養(yǎng)基丙酸、MOS培養(yǎng)基丁酸、XYI培養(yǎng)基總酸、XYI培養(yǎng)基乙酸化療后組含量均明顯高于化療前組(P0.05);化療后組和化療中組相比:各培養(yǎng)基中各種短鏈脂肪酸含量均未見(jiàn)明顯差異(P0.05)。3.2產(chǎn)氣:化療中組與化療前組相比:FOS、MOS以及INU培養(yǎng)基氣壓值化療中組明顯高于化療前組(P0.05);化療后組和化療前組相比:僅MOS培養(yǎng)基氣壓值化療后組明顯大于化療前組(P0.05);化療后組和化療中組相比:各培養(yǎng)基產(chǎn)氣量均未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4.益生菌干預(yù)組(n=16)和益生菌未干預(yù)組(n=14)糞便發(fā)酵后短鏈脂肪酸(SCFAs)以及產(chǎn)氣變化量比較4.1短鏈脂肪酸(SCFAs):益生菌干預(yù)組YCFA培養(yǎng)基丙酸、XYI培養(yǎng)基總酸和丙酸化療前至骨髓抑制期增加量(即化療中組-化療前組)明顯高于益生菌未干預(yù)組(P0.05)。益生菌干預(yù)組YCFA培養(yǎng)基和XYI培養(yǎng)基整個(gè)療程(即化療后組-化療前組)總酸、丙酸增加量明顯高于益生菌未干預(yù)組(P0.05)。骨髓抑制期至骨髓恢復(fù)期短鏈脂肪酸變化量?jī)山M未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4.2產(chǎn)氣:化療前至骨髓抑制期、骨髓抑制期至骨髓恢復(fù)期以及整個(gè)療程氣壓值變化量益生菌干預(yù)組和益生菌未干預(yù)組兩組未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。三、MOS培養(yǎng)基丁酸在各個(gè)組中量均較其他培養(yǎng)基高(化療中組XYI除外),化療前組MOS培養(yǎng)基丁酸量明顯高于FOS培養(yǎng)基和INU培養(yǎng)基(P0.05),化療中組MOS培養(yǎng)基丁酸量明顯高于YCFA培養(yǎng)基(P0.05)。結(jié)論:1.ALL患兒化療前糞便短鏈脂肪酸(SCFAs)含量較正常兒童高,經(jīng)發(fā)酵后幾乎所有培養(yǎng)基化療前糞便短鏈脂肪酸(SCFAs)含量較正常兒童低,提示急性淋巴細(xì)胞白血病可造成腸道菌群紊亂或者腸道粘膜受損。2.ALL患兒糞便中短鏈脂肪酸(SCFAs)含量隨著化療進(jìn)行呈先下降后上升趨勢(shì),經(jīng)發(fā)酵后幾乎所有培養(yǎng)基短鏈脂肪酸(SCFAs)含量隨著化療進(jìn)行呈上升趨勢(shì),提示化療可對(duì)腸道菌群造成影響。3.益生菌干預(yù)組未發(fā)酵糞便隨著化療的進(jìn)行,短鏈脂肪酸(SCFAs)增加量較益生菌未干預(yù)組多,且經(jīng)發(fā)酵后,所有培養(yǎng)基益生菌干預(yù)組短鏈脂肪酸(SCFAs)增加量較益生菌未干預(yù)組多,提示口服益生菌可在腸道內(nèi)存活,并且可能會(huì)促進(jìn)某種有益菌群生長(zhǎng)。4.正常對(duì)照組、化療前組、化療中組、化療后組中,丁酸在MOS(低聚甘露糖)中產(chǎn)生的丁酸均高于其他低聚糖培養(yǎng)基,提示以MOS(低聚甘露糖)作為發(fā)酵底物,可以產(chǎn)生更多的對(duì)人體有益的丁酸。5.測(cè)定糞便及低聚糖體外發(fā)酵模型中的SCFAs及氣體含量可能有助于提供早期為急性淋巴細(xì)胞白血病患兒口服益生菌或者益生元的臨床依據(jù)。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R733.71

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2821988