【摘要】：目的觀察他克莫司對嘌呤霉素誘導(dǎo)的足細(xì)胞損傷的影響,探討他克莫司通過調(diào)節(jié)足細(xì)胞自噬,發(fā)揮保護足細(xì)胞作用的研究。方法體外培養(yǎng)小鼠腎小球足細(xì)胞,嘌呤霉素作用足細(xì)胞建立足細(xì)胞損傷模型,實驗分為空白組、溶媒組、模型組和FK506組。處理12h、24h和48h后,顯微鏡下觀察足細(xì)胞形態(tài)并拍照,CCK-8(cell counting kit-8)法檢測足細(xì)胞活力,western blot檢測LC3蛋白以及Nephrin蛋白表達量。結(jié)果1.細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目改變:在12h、24h、48h時間點,溶媒組與空白組比較,細(xì)胞面積及數(shù)目基本一致。模型組與空白組比較,各時間點細(xì)胞面積及數(shù)目均減少。FK506組各時間點細(xì)胞面積及數(shù)目均高于模型組。2.細(xì)胞活力改變:處理48小時后,溶媒組與空白組比較,足細(xì)胞活力無明顯差異(P0.05)。模型組與空白組比較,足細(xì)胞活力明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。FK506組足細(xì)胞活力明顯高于模型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.蛋白表達改變:處理48小時后,western blot檢測各組足細(xì)胞相關(guān)蛋白,溶媒組LC3以及Nephrin蛋白表達量與空白組基本一致,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。模型組Nephrin蛋白表達較空白組減少,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。FK506組對比模型組,Nephrin蛋白表達增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論FK506可以增加足細(xì)胞Nephrin蛋白表達,減輕PAN(嘌呤霉素)所致的足細(xì)胞損傷,其機制可能與上調(diào)足細(xì)胞自噬有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R726.9
【圖文】：

第 4 章 實驗結(jié)果第 4 章 實驗結(jié)果4.1 足細(xì)胞形態(tài)的變化種板后 12h 時各組細(xì)胞形態(tài)的變化：空白組及溶媒組足細(xì)胞的胞體大，胞質(zhì)豐富，足突量多，且結(jié)構(gòu)明顯，細(xì)胞間連接緊密。模型組足細(xì)胞胞體面積縮小，且足突結(jié)構(gòu)可見回縮，細(xì)胞間連接較空白組細(xì)胞連接疏松。FK506 組足細(xì)胞數(shù)目多于模型組，細(xì)胞足突較模型組豐富，細(xì)胞間連接緊密。（如圖 4.1.1）

細(xì)胞足突較模型組豐富，細(xì)胞間連接緊密。（如圖 4.1.1）圖 4.1.1 12 小時各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)(倒置顯微鏡，x 200)24h 時各組細(xì)胞形態(tài)的變化：空白組及溶媒組足細(xì)胞的細(xì)胞密度明顯增加，胞體大，胞質(zhì)豐富，足突量多，且結(jié)構(gòu)明顯，細(xì)胞間連接緊密。模型組足細(xì)胞的細(xì)胞密度低于其他組，胞體面積縮小，且足突結(jié)構(gòu)可見回縮，細(xì)胞間連接較空白組細(xì)胞連接疏松。FK506 組的細(xì)胞密度大于模型組，小于空白組，細(xì)胞足突較模型組豐富，細(xì)胞間連接緊密。（如圖 4.1.2）空白組 溶媒組 模型組 KF506 組

圖 4.2 各組足細(xì)胞活力足細(xì)胞活力對比，溶媒組與空白組比較無統(tǒng)計學(xué)差異，PP < 0.05；FK506 組與空白組比較，&P < 0.05；FK506 組與足細(xì)胞蛋白表達情況胞中 Nephrin 蛋白的表達 blot 檢測 FK506 與 PAN 共同作用足細(xì)胞 48 小時表達，結(jié)果顯示，溶媒組與空白組比較，足細(xì)胞 N

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本文編號：2806760