自身免疫性多內(nèi)分泌腺病綜合征Ⅰ型AIRE基因分析

發(fā)布時(shí)間：2020-08-25 12:03

【摘要】： 背景自身免疫性多內(nèi)分泌腺病綜合征Ⅰ型(autoimmune polyendocrinopathy syndrome type I, APS-I) (OMIM 240300)是指由自身免疫功能紊亂引起的多內(nèi)分泌腺功能受損為主要表現(xiàn)的綜合征,為罕見的常染色體隱性遺傳病,由自身免疫調(diào)節(jié)因子(autoimmune regulator, AIRE)基因突變引起,目前國外已報(bào)道AIRE基因突變75個,突變位點(diǎn)遍布整個基因編碼區(qū)。然而,尚未見中國APS-I患者基因突變研究和報(bào)道。目的明確一個中國APS-Ⅰ家系A(chǔ)IRE基因的突變;初步分析APS-Ⅰ基因型和表型間的關(guān)系。方法從先證者及其家系成員和50名無血緣關(guān)系健康對照者的外周血白細(xì)胞中提取基因組DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和DNA直接測序技術(shù)對先證者進(jìn)行AIRE基因突變位點(diǎn)檢測,同時(shí)應(yīng)用限制性內(nèi)切酶酶切分析的方法證實(shí)發(fā)現(xiàn)的突變。參閱國內(nèi)外已有研究和報(bào)道,初步分析APS-Ⅰ基因型和表型間的關(guān)系。結(jié)果 1.先證者AIRE檢測出復(fù)合雜合突變(R257X/A19T); 2.先證者第6外顯子檢測出769位雜合突變CT,導(dǎo)致所編碼的第257位精氨酸變?yōu)榻K止密碼子(ArgTer, R257X),母親檢測出這一雜合突變; 3.先證者第1外顯子檢測出55位雜合突變GA,導(dǎo)致所編碼的第19位丙氨酸被蘇氨酸代替(AlaThr,A19T),父親檢測出這一雜合突變; 4. HpyCH4Ⅲ酶切反應(yīng)未發(fā)現(xiàn)健康對照者存在A19T突變; 5.本研究共發(fā)現(xiàn)AIRE的SNP 8個:A33A、S278R、D526D、Intron4+42 -/a、Intron9+6 ga、Intron9+78 -/c、Intron11-28 gc和Intron10-58 ga;其中7個已被NCBI的SNP數(shù)據(jù)庫收錄,而Intron10-58 ga未見報(bào)道。 6.本研究統(tǒng)計(jì)72例患者的臨床表型和突變特征,其中第6外顯子R257X純合突變7例,具有3種典型表型的6例(86%),第8外顯子967～979del13bp純合突變24例,其中具有3種典型表型的19例(80%)。結(jié)論 1.首次發(fā)現(xiàn)中國APS-Ⅰ患者存在AIRE致病突變; 2.確定了1個AIRE致病突變R257X,為經(jīng)典的芬蘭型突變,為亞洲首次報(bào)道; 3.確定了1個AIRE致病突變A19T,為新突變(novel),尚未見國際國內(nèi)報(bào)道; 4. 2種常見突變分別以純合形式存在時(shí)約≥80%的APS-I患者可能發(fā)生3種典型表型; 5.等位基因變異不是疾病表型變異的唯一決定因素,很可能個體遺傳背景和環(huán)境因素在目標(biāo)器官的組織損傷中起重要作用。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R725.8;R580
【圖文】：

突變檢測,外顯子,基因,先證者

先證者之父 AIRE第 1 外顯子也存在這一突變，而其母 AIRE 第 1 外顯子的測序結(jié)果與野生型相同（圖3A）。先證者 AIRE 第 6 外顯子 769 位存在一雜合突變 C>T，遺傳密碼子由 CGA 變?yōu)門GA，導(dǎo)致所編碼的 257 位精氨酸變?yōu)榻K止密碼子(Arg>Ter, R257X)，先證者之母 AIRE第 6 外顯子也存在這一突變，而其父 AIRE 第 6 外顯子的測序結(jié)果與野生型相同（圖3B）。本研究發(fā)現(xiàn) 8 個 AIRE 的 SNPs，其中 3 個位于外顯子，5 個位于內(nèi)含子，7 個已被 NCBI 的 SNP 數(shù)據(jù)庫收錄

基因,突變檢測,外顯子