【摘要】： 新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是圍產(chǎn)期腦損傷最常見原因,不僅威脅新生兒的生命,而且有嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。但對新生兒缺血缺氧性腦病的治療,目前為止國內(nèi)外尚無統(tǒng)一、有效的治療方案。因此,尋找治療新生兒缺血缺氧性腦病更為有效的方法已成為圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中的重要課題,越來越受到醫(yī)學(xué)界廣大醫(yī)務(wù)工作者及學(xué)者的重視。新生大鼠腦缺血缺氧模型被廣泛用于研究新生期腦缺血缺氧損傷的發(fā)病機理、早期診斷指標篩選和干預(yù)方法的評枯。丙酮酸乙酯是一種安全、穩(wěn)定且極易被細胞攝取的物質(zhì)。2001年,Sims等研究發(fā)現(xiàn)林格氏丙酮酸乙酯溶液治療腸系膜缺血再灌,能大大減輕腸粘膜結(jié)構(gòu)和功能的損傷;Yang等人于2002年首次提出了丙酮酸乙酯的抗炎作用,此后對丙酮酸乙酯保護作用抗炎機制研究倍受關(guān)注。本實驗在7日齡Sprague-Dawley大鼠制備的新生大鼠腦缺血缺氧損傷動物模型基礎(chǔ)上,研究丙酮酸乙酯對新生期腦缺血缺氧損傷的作用,并探討其作用機制。 實驗結(jié)果如下: (一)丙酮酸乙酯對新生大鼠腦缺血缺氧損傷具有明顯保護作用 1.丙酮酸乙酯對新生大鼠腦缺血缺氧保護作用具有劑量依賴性 2.丙酮酸乙酯對新生大鼠腦缺血缺氧保護作用具有時間依賴性,在缺血缺氧后30min腹腔注射依然有明顯保護作用 3.丙酮酸乙酯對損傷各個腦區(qū)均有明顯保護作用 (二)丙酮酸乙酯對新生大鼠腦缺血缺氧損傷的長時程保護作用1.丙酮酸乙酯在新生大鼠腦缺血缺氧損傷后8周依然有明顯保護作用 2.丙酮酸乙酯轉(zhuǎn)歸了新生大鼠生長發(fā)育(缺血缺氧后第2周～第8周)的行為變化 (三)丙酮酸乙酯在新生大鼠腦缺血缺氧損傷保護中的抗凋亡作用 1.抑制促凋亡因子caspase-3和AIF的激活 1)丙酮酸乙酯抑制了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后促凋亡因子caspase-3的激活 2)丙酮酸乙酯抑制了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后促凋亡因子AIF的核內(nèi)水平 2.升高抗凋亡因子Bcl-xl水平及抗凋亡信號通路PI3K/Akt中途徑p-Akt的水平 1)丙酮酸乙酯升高了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后抗凋亡蛋白Bcl-xl的水平 2)丙酮酸乙酯對新生大鼠腦缺血缺氧損傷保護作用機制中抗凋亡途徑PI3K/Akt信號通路的作用 a)新生大鼠腦缺血缺氧損傷后大腦皮層p-Akt表達水平降低 b)丙酮酸乙酯升高了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后大腦皮層降低的p-Akt水平 c)側(cè)腦室注射LY294002(PI3K/Akt信號通路抑制劑)后,不能抑制丙酮酸乙酯對新生大鼠腦缺血缺氧損傷的保護 (四)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后致炎相關(guān)因子水平的升高 1.丙酮酸乙酯降低了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后升高的細胞因子表達水平 1)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后升高的炎癥因子COX-2,iNOS,TNF-a,IL-1a,IL-1b,IL-6的mRNA水平 2)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后升高的炎癥因子COX-2蛋白水平 3)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠腦缺血缺氧損傷后核內(nèi)升高的轉(zhuǎn)錄因子NF-κB/p65的水平 2.丙酮酸乙酯抑制了新生大鼠側(cè)腦室注射LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中炎癥因子COX-2,iNOS的表達水平 總之,我們的研究證明了丙酮酸乙酯在新生大鼠腦缺血缺氧損傷中具有顯著的保護作用。這種保護作用,至少部分,是由于抗炎作用,使NF-κB入核減少,降低其轉(zhuǎn)錄調(diào)控的炎癥因子,如:COX-2,iNOS,TNF-α,IL-1α,IL-1β,IL-6;同時,丙酮酸乙酯具有抗凋亡作用,抑制促凋亡因子caspase-3、AIF的激活,升高抗凋亡因子Bcl-xl的表達水平,引起抗凋亡通路PI3K/Akt中p-Akt水平增高。我們的研究為臨床治療新生兒缺血缺氧性腦病提供了可能的手段和理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R722.1
【圖文】：

生大鼠腦缺血缺氧損傷形態(tài)學(xué)特征及缺氧不同傷程度新生大鼠腦缺血缺氧損傷形態(tài)學(xué)特征究采用新生大鼠腦缺血缺氧模型引起一種不完全性可逆的前腦:神經(jīng)元損傷僅出現(xiàn)于C以結(jié)扎同側(cè)半球，而對側(cè)半球未受累及結(jié)扎側(cè)大腦中動脈(middleCerebralartery，MCA)的供血區(qū)，在:大腦皮層、紋狀體、海馬。損傷主要表現(xiàn)為神經(jīng)元變性、元丟失伴膠質(zhì)細胞增生，可見囊狀或空腔梗塞灶。鏡下觀察:胞腫脹、胞體縮小變形、胞質(zhì)尼氏小體消失和細胞核固縮等特(假手術(shù)組)未見神經(jīng)元損傷，鏡下顯示兩側(cè)腦組織結(jié)構(gòu)對稱、常形態(tài)特征。Contralateral

間點是動物缺氧前3Omin。腹腔注射不同濃度的丙酮酸乙醋，注射完畢后放于母鼠身邊恢復(fù)直到缺氧時間，缺氧2.5h。動物于缺血缺氧后7天灌注處死，冰凍切片，CV染色，分析同側(cè)比對側(cè)減少體積百分比，實驗結(jié)果如圖3所示:圖3丙酮酸乙醋改善新生人鼠腦缺血缺氧損傷H一I，缺血缺氧;H一卜EP，缺血缺氧后lomin腹腔注射SOm叭g丙酮酸乙酷。上排顯示皮層和紋狀體，一卜排顯示皮層和海馬。缺血缺氧后7天灌注處死，CV染色。新生大鼠腦缺血缺氧損傷后7天灌注處死，分析腦損傷程度。左側(cè)，腦冠狀切片可見明顯組織缺損;右側(cè)，丙酮酸乙醋(som眺g)缺氧一前30min預(yù)給藥，未見明顯梗塞灶

鼠身邊恢復(fù)直到缺氧時間，缺氧2.5h。動物于缺血缺氧后7天灌注處死，冰凍切片，CV染色，分析同側(cè)比對側(cè)減少體積百分比，實驗結(jié)果如圖3所示:圖3丙酮酸乙醋改善新生人鼠腦缺血缺氧損傷H一I，缺血缺氧;H一卜EP，缺血缺氧后lomin腹腔注射SOm叭g丙酮酸乙酷。上排顯示皮層和紋狀體，一卜排顯示皮層和海馬。缺血缺氧后7天灌注處死，CV染色。新生大鼠腦缺血缺氧損傷后7天灌注處死，分析腦損傷程度。左側(cè)，腦冠狀切片可見明顯組織缺損;右側(cè)，丙酮酸乙醋(som眺g)缺氧一前30min預(yù)給藥，未見明顯梗塞灶

【引證文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 劉嬌;李杰;于艷;趙雪梅;;代謝有機酸對AA肉雞生長和抗氧化性能的影響[J];飼料工業(yè);2014年11期

2 顧鏡月;王鳳娟;;丙酮酸乙酯對新生大鼠缺血缺氧性腦損傷中MMP-9表達的影響[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2011年06期

本文編號：2802674