【摘要】： 目的 梗阻性腎病(obstructive nephropathy,ON)是泌尿外科常見疾病,以腎小管間質(zhì)纖維化為主要病理特點(diǎn)。兒童梗阻性腎病最終可導(dǎo)致終末期腎臟疾病(end-stage renal disease ESRD),梗阻性腎病占所有ESRD的0.3%,占所有兒童腎移植的16.1%。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)具有自我增殖和多向分化潛能的特點(diǎn),可向中胚層、內(nèi)胚層和神經(jīng)外胚層來(lái)源的組織細(xì)胞分化,包括成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和腎臟細(xì)胞等,有研究表明骨髓MSCs在急性腎臟損傷小鼠模型中可以促進(jìn)腎臟結(jié)構(gòu)修復(fù)、改善腎功能。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)是促進(jìn)成體干細(xì)胞向腎臟細(xì)胞分化的候選因子,還具有阻止腎小管細(xì)胞發(fā)生凋亡的能力。 本實(shí)驗(yàn)通過體外分離、培養(yǎng)、純化和擴(kuò)增大鼠骨髓MSCs,用帶有肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因的腺病毒(Ad-HGF)進(jìn)行轉(zhuǎn)染,并建立單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)大鼠動(dòng)物模型,將轉(zhuǎn)染Ad-HGF的MSCs移植入U(xiǎn)UO大鼠體內(nèi),觀察其是否能夠遷移、分布、定居到腎臟,為梗阻性腎病的基因治療及細(xì)胞替代治療提供一定的理論基礎(chǔ)。 材料與方法 體外分離、培養(yǎng)雄性SD大鼠MSCs,流式細(xì)胞儀進(jìn)行CD34、CD90表型鑒定;以不同強(qiáng)度攜帶綠色熒光蛋白的重組腺病毒(Ad-GFP)轉(zhuǎn)染MSCs,用流式細(xì)胞儀測(cè)定轉(zhuǎn)染效率,篩選出最佳轉(zhuǎn)染強(qiáng)度(MOI),并以最佳轉(zhuǎn)染強(qiáng)度將HGF基因體外轉(zhuǎn)染MSCs;用ELISA法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后MSCs的HGF表達(dá)水平。 選擇雌性2月齡SD大鼠16只,制作UUO大鼠動(dòng)物模型,隨機(jī)分為移植組和對(duì)照組,再以UUO術(shù)后7、14天各分為2組,每組各4只。于UUO術(shù)后6惺蹦誚鄶

本文編號(hào)：2802042