【摘要】：目的探討外源性褪黑素(melatonin, MT)對(duì)母嬰分離(maternal separation, MS)新生大鼠行為發(fā)育及腦區(qū)糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor, GR)表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。 方法新生同窩雄性SD大鼠隨機(jī)分為單純母嬰分離(MS)組、褪黑素(MT)組和對(duì)照組,每組15只。大鼠于P24 h ~ P14 d進(jìn)行母嬰分離實(shí)驗(yàn);P7 d ~ P20 d,MS組及對(duì)照組大鼠分別予以生理鹽水腹腔注射,MT組大鼠則予以MT(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔注射注射,容積均為10 mL·kg~(-1)。大鼠行為學(xué)檢測(cè)采用水迷宮試驗(yàn)及懸吊試驗(yàn)測(cè)試,于P28 d~P29 d進(jìn)行。P30 d取各組大鼠海馬及前額皮質(zhì)組織,采用免疫組化檢測(cè)GR陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),RT-PCR法檢測(cè)GR mRNA表達(dá)。 結(jié)果(1) MS組大鼠水迷宮測(cè)試學(xué)會(huì)正確上臺(tái)所需的訓(xùn)練次數(shù)[(13.33±1.88)次]較對(duì)照組[(8.87±1.46)次]明顯增加(P0.05),MT組大鼠學(xué)會(huì)正確上臺(tái)所需的訓(xùn)練次數(shù)[(9.20±1.61)次]與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),較MS組明顯減少(P0.05)。在懸吊試驗(yàn)中,與對(duì)照組[(28.27±2.09)s]相比,MS組懸吊時(shí)間[(15.67±2.26)s]明顯縮短,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在予以MT干預(yù)后,MS大鼠懸吊時(shí)間明顯延長(zhǎng),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。MT組[(27.40±2.35)s]與對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性差異(P0.05)。(2) MS組海馬GR蛋白(79.63±10.95)及mRNA(0.64±0.29)表達(dá)均較對(duì)照組[(135.24±11.75),(0.96±0.32)]均明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),經(jīng)MT處理后,大鼠海馬GR蛋白(129.57±12.76)及mRNA (0.95±0.34)表達(dá)明顯升高,與對(duì)照組相仿(P0.05)。在前額皮質(zhì)組織中,也得到近似的結(jié)果,即MS組前額皮質(zhì)組織中GR蛋白(73.04±8.55)及mRNA(0.57±0.30)表達(dá)均較對(duì)照組[(116.15±9.94),(0.88±0.33)]均明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),經(jīng)MT處理后,大鼠前額皮質(zhì)GR蛋白(111.99±10.45)及mRNA (0.87±0.34)表達(dá)明顯升高,與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論早期母嬰分離所致的應(yīng)激可導(dǎo)致大鼠遠(yuǎn)期行為能力發(fā)育受損。HPA軸參與母嬰分離所致的遠(yuǎn)期行為問(wèn)題。外源性MT可能通過(guò)降低腦區(qū)GC與其受體的親和力及上調(diào)海馬及前額皮質(zhì)中GR表達(dá)水平,減輕早期母嬰分離所致高濃度GC帶來(lái)的神經(jīng)損傷,而改善遠(yuǎn)期行為發(fā)育。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R722.1
【圖文】：

表 1 三組大鼠水迷宮試驗(yàn)及懸吊試驗(yàn)結(jié)果比較( x ±s)e comparison of the results in water maze test and suspension test of ratdifferent groups ( x ±s) n 水迷宮試驗(yàn)(次) 懸吊試驗(yàn) 15 13.33±1.88* 15.67±2.2 15 9.20±1.61* 27.40±2.3 15 8.87±1.46 28.27±2. 33.779 148.68 0.000 0.000比較，*P<0.05。 with control group, *P<0.05.

圖 2 三組大鼠懸吊實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較The comparision of the results in suspension test of rats among diffe大鼠海馬及前額皮質(zhì)組織中 GR 免疫組化染色結(jié)果疫反應(yīng)陽(yáng)性產(chǎn)物為胞漿內(nèi)褐色沉淀物，在海馬及前額皮質(zhì)GR 免疫反應(yīng)陽(yáng)性產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞核內(nèi)，胞漿免疫染色，陰性表達(dá)呈淡藍(lán)色。MS 組與對(duì)照組比較，海馬和前反應(yīng)陽(yáng)性物顯著減低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，予 M皮質(zhì)組織中 GR 免疫反應(yīng)陽(yáng)性物較 MS 組顯著增強(qiáng)(P<0.無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05) (見(jiàn)表 2、圖 3、圖 4)。

Table 2 The comparison of the OD value of GR immunoactivity in hippocampcortex of rats among different groups ( x ±s)組別 n 海馬 前額MS 組 15 79.63±10.95* 73.04MT 組 15 129.57±12.76* 111.99對(duì)照組 15 135.24±11.75 116.1F 值 100.162 90P 值 0.000 0注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。Compared with control group, *P<0.05.

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2 楊s

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