發(fā)布時間：2020-08-06 13:26

【摘要】：目的 以中濃度氧( FiO_2 : 60% )吸入法制作新生小鼠支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary Dysplasia,BPD)動物模型,研究中濃度氧暴露對新生小鼠肺部變化的影響、并檢測其血中及肺血管內(nèi)皮細(xì)胞膜抗原Endoglin(CD105)的表達(dá)情況及CD105在血和肺組織中的表達(dá)關(guān)系,以尋求BPD新生小鼠肺微血管發(fā)育不良新的發(fā)病機制。 方法 將50只4日齡清潔級新生昆明小鼠,隨機分為2組(氧氣組、空氣組),每組25只。氧氣組置于氧濃度為60%的氧箱中,空氣組置于氧濃度為21%的空氣中,建立BPD小鼠模型,每組于不同時間點,隨機選取5只新生小鼠,分別于實驗的第0d、第7d、第14d、第21d、第28d時稱重后,摘眼球法留取血標(biāo)本,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測血清中CD105的表達(dá)水平,分離肺組織,HE染色,光鏡下觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化,測量呼吸膜的厚度,計算放射狀肺泡計數(shù)(radical alveolar counts,RAC)表示肺泡的數(shù)目,進(jìn)行肺組織纖維化評分,免疫組織化學(xué)染色后,通過圖像分析技術(shù)測定CD105的積分光密度,對肺組織中的CD105表達(dá)水平進(jìn)行半定量分析,SPSS13.0統(tǒng)計分析CD105在兩部位中表達(dá)的相關(guān)性。 結(jié)果 1.實驗動物一般狀態(tài):氧氣組有不同程度的精神反應(yīng)差,體重增長緩慢,生長發(fā)育遲緩,刺激后反應(yīng)遲鈍,肢體活動少,并出現(xiàn)不同程度呼吸困難和發(fā)紺。 2.HE染色下,隨著吸氧時間的延長,于吸氧第21d時氧氣組肺組織中出現(xiàn):正常的肺泡結(jié)構(gòu)消失,肺泡腔顯著增大,肺泡融合,放射狀肺泡計數(shù)減少(P0.01),呼吸膜增厚(P0.01),肺間質(zhì)細(xì)胞增加,膠原纖維明顯增生呈玻璃樣變(P0.01),此變化符合BPD病理學(xué)的特征。 3.空氣組血清中CD105濃度在各時間點無顯著性改變,平均值波動在264.69～268.55ng/L(P0.05)之間。氧氣組小鼠血清中CD105濃度于吸氧第7d((346.42±14.68,P0.01)后顯著高于空氣組,隨著吸氧時間的延長,CD105的表達(dá)水平呈逐漸增高的趨勢(14d:400.25±20.10,21d:505.15±6.15,P 0.01),吸氧21d后(28d:451.88±9.96,P 0.01)表達(dá)水平有所降低,但仍高于同齡空氣組。 4.肺組織免疫組化分析顯示:在實驗過程中CD105抗原在部分空氣組小鼠肺部組織中也有弱陽性表達(dá),表達(dá)部位主要為血管內(nèi)皮細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞和肺間質(zhì)。于吸氧7d后,氧氣組CD105的表達(dá)水平與空氣組相比有顯著差異(2.24±0.15,P0.01),在肺泡上皮細(xì)胞和肺間質(zhì)中也可見明顯的陽性表達(dá),且隨氧療通氣時間的延長,表達(dá)水平逐步上調(diào),于吸氧第21d時達(dá)到最高峰,以后稍有減弱,但依然維持較高水平。兩組于實驗0d時,CD105的表達(dá)水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(1.19±0.09,P0.05)。氧氣組吸氧后肺組織中的CD105均較空氣組明顯升高(P 0.01)。 5.CD105在BPD新生小鼠血清中和肺組織中的表達(dá)水平呈正相關(guān)( r = 0.973)。 結(jié)論 1.持續(xù)60%濃度的氧暴露可導(dǎo)致新生小鼠肺組織出現(xiàn)肺泡發(fā)育障礙、肺微血管發(fā)育異常和肺組織纖維化等病理形態(tài)學(xué)改變,此變化符合早產(chǎn)兒BPD的發(fā)生發(fā)展特點和病理學(xué)改變。 2.CD105在血清中及肺組織中的表達(dá)水平隨著吸氧時間的增加而呈增高的趨勢,并在血清中和肺組織中的表達(dá)水平呈正相關(guān)。 3.CD105可能代替?zhèn)鹘y(tǒng)的血管生長因子,成為支氣管肺發(fā)育不良微血管發(fā)育障礙的新的調(diào)節(jié)因子。
【學(xué)位授予單位】：泰山醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R722.1
【圖文】：

圖 1 實驗第 21d（上為氧氣組，下為空氣組） 圖 2 實驗第 28d（右為氧氣組，左為空氣組）圖 3 空氣組肺切片（HE 染色,x200） 圖 4 氧氣組吸氧前肺切片（HE 染色,x200）

圖 1 實驗第 21d（上為氧氣組，下為空氣組） 圖 2 實驗第 28d（右為氧氣組，左為空氣組）圖 3 空氣組肺切片（HE 染色,x200） 圖 4 氧氣組吸氧前肺切片（HE 染色,x200）

圖 3 空氣組肺切片（HE 染色,x200） 圖 4 氧氣組吸氧前肺切片（HE 染色,x200）圖 5 空氣組實驗第 7d 肺切片（HE 染色,x200） 圖6 氧氣組吸氧第 7d 肺切片（HE 染色,x200）

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

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本文編號：2782465