發(fā)布時(shí)間：2020-08-02 19:19

【摘要】：目的探討Toll樣受體-4(toll-like receptor-4,TLR4)及脂多糖受體CD14基因多態(tài)性與川崎病(Kawasaki disease, KD)易感性以及冠狀動(dòng)脈損傷之間的關(guān)系。 方法應(yīng)用雙色熒光標(biāo)記流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)76例川崎病兒童和118例健康兒童外周血白細(xì)胞TLR4的表達(dá)水平;采用聚合酶鏈反應(yīng)限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析方法檢測(cè)二組兒童TLR4基因(-896A/G),(-1196C/T)位點(diǎn)以及CD14基因(-260C/T)位點(diǎn)的基因型頻率和等位基因頻率及其與川崎病的關(guān)系;應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)二組兒童血清TNF-α的濃度。 結(jié)果 (1)川崎病組和健康對(duì)照組外周血白細(xì)胞TLR4表達(dá)的平均熒光強(qiáng)度(MFI)分別為2.87±0.96,10.55±4.87,23.36±8.28和3.26±0.65,7.55±1.21,25.41±6.97;二組TLR4均高表達(dá)單核細(xì)胞,低表達(dá)于中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞;但二組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 (2)在川崎病組和健康對(duì)照組均未發(fā)現(xiàn)TLR4基因(-896A/G)和(-1196C/T)的位點(diǎn)突變。 (3)川崎病組和健康對(duì)照組CD14基因(-260C/T)位點(diǎn)均有突變,其CC,CT,TT基因型分布分別為35.5%,30.3%,34.2%和38.1%,47.5%,14.4%(X2=11.62,P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其C,T等位基因頻率則分別為50.7%,49.3%和61.9%,38.1%(X2=4.76,P0.05)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其等位基因頻率的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)分析發(fā)現(xiàn)T等位基因攜帶者發(fā)生川崎病的風(fēng)險(xiǎn)是C等位基因的1.58倍。 (4)川崎病組血清TNF-α水平(73.9±21.7ng/ml)高于對(duì)照組(19.36±8.25ng/ml),差異有顯著性(t=2.047,p0.05)。 (5) CD14基因(-260C/T)位點(diǎn)基因型頻率和等位基因頻率在川崎病冠脈損傷組和未損傷組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X~2= 0.921,P0.05)。但其等位基因頻率的相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)分析發(fā)現(xiàn)T等位基因攜帶者發(fā)生冠脈損傷的風(fēng)險(xiǎn)是C等位基因的1.256倍。 結(jié)論TLR4基因(-896A/G)和(-1196C/T)位點(diǎn)多態(tài)性與川崎病發(fā)病無關(guān),CD14基因(-260C/T)多態(tài)性T等位基因與川崎病發(fā)病密切相關(guān), T等位基因可能是川崎病冠脈損傷的遺傳易感因素。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R725.4
【圖文】：

南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位表1. TLR4 -896A/G，-1196C/T和CD14-260C/T基因位點(diǎn)酶切情況位點(diǎn) 總長(zhǎng)度(bp) 內(nèi)切酶 酶切產(chǎn)物(bp)-896A/G 249 NcoI AA AG GG249 249，223，26 223，26-1196C/T 406 Hinfl CC CT TT406 406，389，27 389，27-260C/T 497 AvaⅡ CC CT TT497 497，353，144 353，144

-260C/T 497 AvaⅡ CC CT TT497 497，353，144 353，144圖2. TLR4 -896A/G位點(diǎn)PCR產(chǎn)物酶切后電泳圖譜M：DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)；1-12為純合子AA

圖4.CD14-260C/T位點(diǎn)PCR產(chǎn)物酶切后電泳圖譜M：DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)；1,2,5,6,9為純合子TT；3,7,8,10為雜合子CT；4,11為純合子CC8．4 質(zhì)控(1)測(cè)序鑒定將PCR-RFLP鑒定出的TLR4-896A/G，-1196C/T和CD14-260C/T的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海英俊生物技術(shù)有限公司純化后測(cè)序分析，結(jié)果顯示三個(gè)基因型PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果與其PCR-RFLP結(jié)果完全一致。A B

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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本文編號(hào)：2778948