【摘要】： 目的 先天性髖脫位(congenital dislocation of the hip，CDH)是小兒骨科最常見(jiàn)的四肢畸形之一，地區(qū)與種族不同其發(fā)病率有很大差異，一般白種人發(fā)病率高，黑種人低，而黃種人介于兩者之間。高發(fā)區(qū)如美國(guó)、意大利其發(fā)病率為9～12‰，我國(guó)報(bào)道為0.91～3.80‰不等，男女之比約為1:4.75，單側(cè)多見(jiàn)，且左側(cè)多于右側(cè)。 彭明惺等通過(guò)家系調(diào)查和雙生子研究發(fā)現(xiàn)，先天性髖脫位一級(jí)親屬患病率明顯高于一般人群，表明本病為多基因遺傳病，與遺傳和環(huán)境因素密切相關(guān)。早在80年代，國(guó)內(nèi)外都曾有組織相容性抗原HLA與先天性髖脫位相關(guān)的報(bào)道，為先天性髖脫位的遺傳背景提供了有力的佐證。目前，國(guó)外尚無(wú)有關(guān)先天性髖脫位與HOX基因的相關(guān)報(bào)道。國(guó)內(nèi)2002年曾有1篇先天性髖脫位與HOXD9基因的報(bào)道，其結(jié)果為先天性髖脫位與HOXD9基因無(wú)明顯相關(guān)性，但由于病例數(shù)不足，其結(jié)果有假陰性的可能。為了進(jìn)一步探討先天性髖脫位與HOX基因的相互關(guān)系，本研究選取HOXD8基因內(nèi)二核苷酸重復(fù)序列多態(tài)性作為遺傳標(biāo)記，擴(kuò)充先天性髖脫位核心家系的數(shù)量，繼續(xù)進(jìn)行相關(guān)研究，旨在進(jìn)一步證實(shí)先天性髖脫位與HOX基因的相互關(guān)系。 方法 1．標(biāo)本收集及基因組DNA提取：共收集先天性髖脫位核心家系總體樣本101例，其中76例可用于TDT分析。所有病例均來(lái)源于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院小兒骨外科，所有患者的臨床表現(xiàn)、 體檢及X線檢查均符合單純型先天性髓脫位。收集101例核心 家系外周EDTA抗凝血SInl，按常規(guī)酚／氯仿法提取基因組DNA。 LKR擴(kuò)增：選�。�8基因內(nèi)3’端非編碼區(qū)的二核昔酸 重復(fù)序列多態(tài)性作為遺傳標(biāo)記。反應(yīng)體系 25 gi，循環(huán)條件：94℃ 預(yù)變性 10min，經(jīng) 94℃J5t、72t各 40s，共 35個(gè)循環(huán)，72℃延伸 7mino 3．等位基因分離檢測(cè)：PCR產(chǎn)物于含7moUL尿素的6％變性 聚丙烯酸胺膠上作垂直電泳，恒定功率40W，電泳2．sh，銀染后在 自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)上成像。 4數(shù)據(jù)處理：先天性髓脫位核心家系的傳遞不平衡檢驗(yàn) （TD人采用 SAS軟件中的 FREQ程序進(jìn)行分析，該軟件應(yīng)用核心 家系雜合子型父母未傳遞給子代的等位基因作為對(duì)照，計(jì)算P值， 并進(jìn)行Fish瓜精確性檢驗(yàn)，以檢測(cè)遺傳標(biāo)記位點(diǎn)與假設(shè)的疾病位 點(diǎn)之間是否存在傳遞不平衡。 結(jié) 果 1．HOXDS基因多態(tài)性分析：在101個(gè)先天性夠脫位核心家 系中檢測(cè)出16個(gè)等位基因片段，命名為等位基因1－16。 2．傳遞不平衡檢驗(yàn)：對(duì)于HOXDS等位基因4而言，雜合子 型父母向子代傳遞等位基因4的數(shù)目為19，未傳遞等位基因4的 數(shù)目為6，差異具有顯著性（X’＝6．46，P＝0．01 廠進(jìn)行雙側(cè) Fisher精確性檢驗(yàn)后，P值為0．012。HOXDS基因的等位基因4與 先天性夠脫位存在連鎖不平衡。 結(jié) 論 1．HOXDS基因多態(tài)性在中國(guó)人群的先天性夠脫位家系中分 ·2· 離出16個(gè)等位基因片段。 2．HOXDS基因可能與中國(guó)人群的先天性夠脫位存在相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R726.8
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.HOXDS基因多態(tài)性分析在101個(gè)先天性艦脫位核心家系中檢測(cè)出16個(gè)等位基因片段，命名為等位基因1一16。圖1為銀染聚丙烯酞胺凝膠電泳結(jié)果圖。2.傳遞不平衡檢驗(yàn)圖2顯示適合TDT分析的76個(gè)核心家系中的HOXDS基因多態(tài)性等位基因傳遞和不傳遞的示意圖。對(duì)于HOXDS等位基因4而言，雜合子型父母向子代傳遞等位基因4的數(shù)目為19，未傳遞等位基因4的數(shù)目為6，差異具有顯著性(獷二6.461，P=0.011)，進(jìn)行雙側(cè)Fisher精確性檢驗(yàn)后，P值為0.012。HOXDS基因的等位基因4與先天性艦脫位存在連鎖不平衡。表一3列出適合TDT分析的76個(gè)核心家系中各等位基因經(jīng)TDT檢驗(yàn)后的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖1為銀染聚丙烯酞胺凝膠電泳圖

圖276個(gè)核心家系等位基因傳遞圖表一376個(gè)核心家系TDT表0.0820.7350.011.644845658692064558506165317317652O.O.O.O.O.0.舊5注4名167253733303n46210319巧423444920000:20:3.0.0.0.0.6.0.3.0.0.LLO.L03469151213141323710.300519n1014巧6161319012213456795101112131415

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 顧鳴敏,陳仁彪;多基因遺傳病遺傳分析的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè);1998年02期

2 彭明惺，劉利君，周錫華，周素華;先天性髖關(guān)節(jié)脫位病因探討（附706例遺傳流行病學(xué)調(diào)查）[J];華西醫(yī)學(xué);1996年01期

3 徐明紅,馬瑞雪,麻宏偉,吉士俊;先天性髖脫位與HOXD9基因傳遞連鎖不平衡研究[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

本文編號(hào)：2771655