【摘要】：目的：21-羥化酶缺乏癥(21-Hydroxylase Deficiency,21-OHD)是先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(Congenital Adrenal Hyperplasia, CAH)最常見的類型,臨床表現(xiàn)主要以雄激素增加和皮質(zhì)醇、醛固酮合成受損為特點(diǎn),可分為經(jīng)典型和非經(jīng)典型。經(jīng)典型可表現(xiàn)為程度不同的女嬰外生殖器男性化及出現(xiàn)低鈉、低氯、高鉀血癥,若治療不及時(shí),嚴(yán)重者可出現(xiàn)失鹽危象而死亡�；诮�(jīng)典型較高的發(fā)病率和死亡率,以血清17-羥孕酮(17-OHP)水平作為評價(jià)指標(biāo)的新生兒篩查在臨床上已作為常規(guī)的檢查項(xiàng)目,但由于存在假陰性或假陽性結(jié)果,故基因診斷被推薦作為第二梯隊(duì)的篩查方法。21-OHD致病基因CYP21A2是人類最具多態(tài)性的基因之一,真假基因高度同源,突變類型復(fù)雜多樣,給基因診斷帶來較大的難度。因此,本研究旨在建立一種臨床上適用的快速準(zhǔn)確的基因檢測方法,為患兒提供準(zhǔn)確的基因診斷,并為其家庭提供優(yōu)質(zhì)遺傳咨詢服務(wù)。 方法：對本實(shí)驗(yàn)室接診的5個(gè)臨床診斷為CAH的家系和9名(46,XX)外生殖器男性化患兒聯(lián)合應(yīng)用多重酶聯(lián)依賴探針擴(kuò)增(Multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)和特異性擴(kuò)增測序技術(shù)檢測CYP21A2基因突變情況。 結(jié)果：MLPA檢測出4例等位基因雜合缺失,1例CYP21A2/CYP21A1P開米拉,并結(jié)合測序明確了10名患兒的基因型,其中1172N突變在CAH(SV)患者中最常見。 結(jié)論：MLPA與特異性擴(kuò)增測序聯(lián)合應(yīng)用能夠?qū)?1-羥化酶缺乏癥進(jìn)行快速準(zhǔn)確的基因檢測。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R725.8
【圖文】：

碩士學(xué)位論.，2.~一王一悶日!l禹2、致病基因及突變類型簡介CYPZIAZ(舊稱:CYPZI，CYPZIB，GeneID1598，GenBankNC000006.10)基因編碼21一輕化酶，位于6號染色體短臂(6PZI.3)上的HLA一m區(qū)，與其無活性的假基因CYp21A1P(舊稱:CYpZI只CYpZIA)串聯(lián)排列在C釗和C4B基因的3’端(圖l)，兩者相距30Kb，真假基因均有10個(gè)外顯子，9個(gè)內(nèi)含子(圖l)，其外顯子和內(nèi)含子序列的同源性分別為98%和%%l6]。c價(jià)℃y尸21與其端粒側(cè)RPI基因和著絲粒側(cè)ZX丫召基因以及他們的截短假基因尺尸它和ZW{剔基因串聯(lián)構(gòu)成RCCX模塊(即一C4一CYPZI~TNX)(如圖1所示)。在白種人中，69%為雙模結(jié)構(gòu)，即RPI一C4A一CYPZIAIP~TNXA.RPZ一C4B一CYP21AZ一TNXB，17%為只含真基因的單模結(jié)構(gòu)，14%為三模結(jié)構(gòu)，四模結(jié)構(gòu)較為罕見陰。

整個(gè)C4B基因、CYPZIAZ基因5’端26或32kb(基于C4B基因的大小)片段的丟失，形成CYpZIAIP//CYpZIAZ開米拉(如圖2所示)。開米拉上存在致病突變，故不能編碼有活性的酶蛋白。目前為止，己報(bào)道6種不同類型的CYpZjAIp心了尸ZIAZ開米拉[9-l4]。7獄剔刀叭從萬開米拉可見于EhierSDanloS綜合征(一種常染色體隱性遺傳性疾病)1151，一些Cl’PZIAZ基因完全缺失的病例與Zx剔刀人吹丑開米拉形成有關(guān)[l6，’刀，目前至少有5種類型的刀.劍/刀以男開米拉被證實(shí)[’8]。減數(shù)分裂過程中不等交換重排也能產(chǎn)生CYpZIAZ基因的重復(fù)而致病，但較為少見，且重復(fù)的等位基因上常存在嚴(yán)重的致病突變:P.Q31sx或IVsZ(c.293一13A/C>G)[’9-，’]。將近50，0的致病突變?yōu)榉羌倩騺碓吹男掳l(fā)突變{22]，這些突變類型很容易通過測序技術(shù)進(jìn)行檢測。近來，該類報(bào)道逐漸增多123一25]。人類基因突變數(shù)據(jù)庫(HGMD，~hgmd.cf.ac.uk)和人類細(xì)胞色素P450(cYP)等位基因命名委員會(huì)(http刃訪WW{c即alleles.ki.se/cyPZI.htm)己記錄了超過140種CypZIAZ基因突變類型，目前為止尚沒有單個(gè)外顯子缺失的報(bào)道。

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本文編號：2770988