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原發(fā)性腎病綜合征兒童外周血單個(gè)核細(xì)胞中TLR-2、TLR-4、TLR-6表達(dá)與血清IgG、IgM水平相關(guān)性分析

發(fā)布時(shí)間:2020-07-25 19:12
【摘要】:背景兒童原發(fā)性腎病綜合征(idiopathic nephrotic syndrome,INS)發(fā)病機(jī)制尚不清楚。多年來認(rèn)為INS發(fā)病與免疫紊亂有關(guān)。早期提出T細(xì)胞主要參與INS的發(fā)生發(fā)展,近年來發(fā)現(xiàn)血中免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)水平高低與INS的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后存在聯(lián)系。Toll樣受體(toll-like receptors,TLRs)是一種模式識(shí)別受體,在機(jī)體固有免疫和特異性免疫反應(yīng)中起到重要作用。前期我們研究了TLR-1、TLR-3、TLR-9在INS兒童外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的表達(dá),提示TLR-1、TLR-3、TLR-9可能與疾病活動(dòng)有關(guān),但TLR-2、TLR-4、TLR-6在INS兒童PBMC表達(dá)的報(bào)道甚少,且與血中Ig水平是否有相關(guān)性,需要進(jìn)一步臨床驗(yàn)證,故本研究探討TLR-2、TLR-4、TLR-6及血清IgG、IgM在兒童INS發(fā)病機(jī)制中可能作用。目的檢測(cè)并觀察INS兒童PBMC中TLR-2、TLR-4、TLR-6及血清IgG、IgM在活動(dòng)期及緩解期不同階段的水平變化,探討TLR-2、TLR-4、TLR-6及血清IgG、IgM在兒童INS發(fā)病過程中可能作用。方法選取2017年6月至2018年10月在新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的42名INS兒童(32名男性,10名女性)作為研究組,門診健康體檢29名兒童(19名男性,10名女性)作為對(duì)照組,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)測(cè)定INS兒童在活動(dòng)期和緩解期及健康兒童PBMC中TLR-2mRNA、TLR-4mRNA和TLR-6mRNA的表達(dá)水平,并采用免疫比濁法檢測(cè)INS兒童活動(dòng)期及健康兒童血清IgG、IgM的水平。結(jié)果1.INS兒童活動(dòng)期PBMC中TLR-2mRNA、TLR-4mRNA和TLR-6mRNA表達(dá)水平顯著高于緩解期及對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05),且緩解期PBMC中TLR-2mRNA、TLR-4mRNA和TLR-6mRNA表達(dá)水平高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。2.INS兒童活動(dòng)期血清IgG水平顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而活動(dòng)期血清IgM水平顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.INS兒童活動(dòng)期PBMC中TLR-2mRNA、TLR-4mRNA、TLR-6mRNA的表達(dá)水平與血清IgG、IgM水平均無明顯相關(guān)性,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。結(jié)論1.INS兒童PBMC中TLR-2mRNA、TLR-4mRNA和TLR-6mRNA表達(dá)水平顯著升高,提示TLR-2、TLR-4、TLR-6可能參與INS發(fā)病機(jī)制。2.INS兒童活動(dòng)期血清IgG水平降低,IgM水平增高,對(duì)進(jìn)一步探討腎病發(fā)病機(jī)制有重要意義。3.INS兒童活動(dòng)期PBMC中TLR-2mRNA、TLR-4mRNA、TLR-6mRNA的表達(dá)水平與血清IgG、IgM水平均無明顯相關(guān)性,推測(cè)TLR-2、TLR-4、TLR-6和IgG、IgM可能分別通過不同途徑參與INS兒童的發(fā)病機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R726.9
【圖文】:

曲線圖,基因擴(kuò)增,曲線圖,新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院


新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2 結(jié)果2.1 TLR-2、TLR-4、TLR-6mRNA 表達(dá)結(jié)果的穩(wěn)定性及可靠性評(píng)價(jià)每個(gè)樣本的目的基因做 3 次試驗(yàn)減少試驗(yàn)誤差,TLR-2、TLR-4、TLR-6、GAPDH基因的擴(kuò)增曲線圖(如圖 1-4),溶解曲線圖(如圖 5-8),溶解曲線均只有單一峰型的曲線,提示引物設(shè)計(jì)特異性高,反應(yīng)條件良好。

曲線圖,基因擴(kuò)增,曲線圖,新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院


新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2 結(jié)果2.1 TLR-2、TLR-4、TLR-6mRNA 表達(dá)結(jié)果的穩(wěn)定性及可靠性評(píng)價(jià)每個(gè)樣本的目的基因做 3 次試驗(yàn)減少試驗(yàn)誤差,TLR-2、TLR-4、TLR-6、GAPDH基因的擴(kuò)增曲線圖(如圖 1-4),溶解曲線圖(如圖 5-8),溶解曲線均只有單一峰型的曲線,提示引物設(shè)計(jì)特異性高,反應(yīng)條件良好。

曲線圖,基因擴(kuò)增,曲線圖,引物設(shè)計(jì)


提示引物設(shè)計(jì)特異性高,反應(yīng)條件良好。圖 1 TLR-2 基因擴(kuò)增曲線圖 圖 2 TLR-4 基因擴(kuò)增曲線圖Fig.1 Gene amplification curve of TLR-2 Fig.2 Gene amplification curve of TLR-4

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本文編號(hào):2770244

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