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WAVE1、PDGFR-β在兒童急性白血病的表達(dá)及其關(guān)系探討

發(fā)布時(shí)間:2020-07-18 08:02
【摘要】: 目的:白血病是我國(guó)兒童和青少年最常見的惡性疾病,揭示兒童急性白血病的發(fā)病機(jī)制,對(duì)于防治兒童白血病具有非常重要的意義。同其它惡性腫瘤一樣,兒童急性白血病的發(fā)生也是多因素參與,確定兒童急性白血病常見的致病基因,將其定位、分離,并研究其生物學(xué)功能成為兒童白血病研究中極其重要的方面。WAVE1 (WASP-family verprolin homologous protein 1)為近年來發(fā)現(xiàn)的新型肌動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)蛋白,在肌動(dòng)蛋白聚合和細(xì)胞骨架重排中發(fā)揮重要作用。近年研究發(fā)現(xiàn)WAVE1在人類血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞株中高表達(dá)。前期課題已經(jīng)發(fā)現(xiàn)WAVE1在兒童急性白血病患兒BMMCs中高表達(dá),并發(fā)現(xiàn)WAVE1與耐藥及抗凋亡作用密切相關(guān),但其與白血病作用機(jī)制尚未完全明確。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)WAVE1和PDGFR-β在兒童急性白血病患者及HL-60、Raji細(xì)胞中的表達(dá),探討WAVE1和PDGFR-β與白血病的關(guān)系,并研究二者之間是否存在調(diào)控關(guān)系。 方法:收集急性白血病患者骨髓標(biāo)本,根據(jù)病程分為初治組、復(fù)發(fā)組、緩解組,同時(shí)收集同期貧血查因患者骨髓標(biāo)本為對(duì)照組,提取骨髓單個(gè)核細(xì)胞,RT-PCR方法檢測(cè)WAVE1和PDGFR-β在mRNA水平的表達(dá);培養(yǎng)HL-60、Raji細(xì)胞,分為轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-WAVE1組(轉(zhuǎn)染組)和轉(zhuǎn)染pcDNA3.1空載體組(對(duì)照組),轉(zhuǎn)染W(wǎng)AVE1 siRNA組(干擾組)和轉(zhuǎn)染空干擾載體組(對(duì)照組),轉(zhuǎn)染48小時(shí)后收取細(xì)胞提取RNA和蛋白,分別以RT-PCR、Western Blot方法在mRNA、蛋白水平檢測(cè)WAVE1和PDGFR-β表達(dá)。 結(jié)果:1.在急淋和急非淋中,與緩解組和對(duì)照組比較,初治組和復(fù)發(fā)組的WAVE1和PDGFR-β表達(dá)均顯著增高(P0.05);初治組和復(fù)發(fā)組比較及緩解組和對(duì)照組比較,WAVE1和PDGFR-β的表達(dá)無差異(P0.05)。 2.在mRNA水平,HL-60細(xì)胞、Raji細(xì)胞干擾組WAVE1表達(dá)明顯降低,而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的182%及141%;轉(zhuǎn)染組WAVE1相對(duì)于對(duì)照組增加40%、55%,而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的54%、65%。 3.在蛋白水平,HL-60細(xì)胞、Raji細(xì)胞內(nèi)干擾組WAVE1表達(dá)明顯降低,而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的157%及146%;轉(zhuǎn)染組WAVE1相對(duì)于對(duì)照組增加45%、54%,而PDGFRβ表達(dá)分別為對(duì)照組的59%、60%。 結(jié)論:1.WAVE1和PDGFR-β在急性白血病的初治組、復(fù)發(fā)組高表達(dá),緩解組低表達(dá),并與病程相關(guān)。 2. HL-60、Raji細(xì)胞在mRNA水平、蛋白水平均有WAVE1、PDGFR-β的表達(dá),WAVE1表達(dá)增高而PDGFR-β表達(dá)下調(diào),WAVE1表達(dá)降低而PDGFR-β表達(dá)上調(diào)。
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R733.7

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本文編號(hào):2760628

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