【摘要】：嬰幼兒血管瘤(Infantile Hemangiomas, IH,下文簡(jiǎn)稱(chēng)為血管瘤)是兒童最常見(jiàn)的腫瘤之一,60-80%的病變累及頜面部。它是一種非常特殊的腫瘤,包括血管生成和血管退化兩種病理生理過(guò)程,根據(jù)其主要臨床病理特點(diǎn)可分為快速增生期、退化期和退化完成期。最近有研究發(fā)現(xiàn),增生期血管瘤內(nèi)有大量的髓系細(xì)胞(myeloid cells),部分血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞共表達(dá)髓系細(xì)胞標(biāo)志物,如CD14,CD45, CD32, CD15及CD83；我們的前期研究發(fā)現(xiàn)部分血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞共表達(dá)巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD68；另有研究發(fā)現(xiàn)血管瘤組織中大量存在CD8陽(yáng)性的細(xì)胞毒性T細(xì)胞,并且免疫調(diào)節(jié)劑2,3-吲哚胺二氧化酶(Indoleamine 2,3-dioxygenase, IDO)高表達(dá)于增生期血管瘤組織中,而在消退的過(guò)程中逐漸表達(dá)減少。所有這些研究都表明免疫及免疫介導(dǎo)的炎性過(guò)程在血管瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能起到重要的作用。 新發(fā)現(xiàn)的生物活性肽——同種異體移植炎癥因子1 (allograft inflammatory factor-1, AIF-1)不僅是巨噬細(xì)胞激活的標(biāo)志物,更是免疫反應(yīng)的重要調(diào)控因子。因此,我們推測(cè)AIF-1有在血管瘤發(fā)生發(fā)展中起到重要的調(diào)控作用,本研究旨在探討AIF-1在血管瘤發(fā)生發(fā)展中的表達(dá)及其可能的作用機(jī)制。研究?jī)?nèi)容分為以下三部分： 第一部分 同種異體移植炎癥因子1(AIF-1)在嬰幼兒血管瘤中的表達(dá)及定位的研究 目的：檢測(cè)AIF-1在血管瘤組織及對(duì)照組織(包括脈管畸形、化膿性炎性肉芽腫、胎盤(pán)、舌鱗狀細(xì)胞癌及正常皮膚)中的表達(dá),以及對(duì)比AIF-1在血管瘤病理過(guò)程中各個(gè)時(shí)期的表達(dá)差異；方法：用免疫組織化學(xué)S-P法對(duì)19例血管瘤組織及對(duì)照組織(包括26例脈管畸形、24例化膿性炎性肉芽腫、3例胎盤(pán)、10例舌鱗狀細(xì)胞癌及5例正常皮膚)的連續(xù)切片進(jìn)行AIF-1及CD34染色,并對(duì)血管瘤組織進(jìn)行AIF-1及CD34的免疫熒光雙染；結(jié)果：19例血管瘤組織中有17例(89%)中可檢測(cè)到AIF-1的表達(dá),AIF-1表達(dá)于血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿中,而24例化膿性炎性肉芽腫、26例靜脈畸形、5例正常皮膚、10例舌癌及5例胎盤(pán)的血管中均未見(jiàn)AIF-1的表達(dá)；并且AIF-1在血管瘤組織三個(gè)時(shí)期均高表達(dá),無(wú)顯著性差異(P0.05)；結(jié)論：AIF-1特異性地表達(dá)于血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞,而化膿性炎性肉芽腫、靜脈畸形、正常皮膚的血管、胎盤(pán)及惡性腫瘤新生血管均不表達(dá)AIF-1,提示AIF-1可以作為血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞特殊的生物學(xué)標(biāo)志物。 第二部分 同種異體移植炎癥因子1(AIF-1)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞激活及其機(jī)制的研究 目的：本部分研究旨在通過(guò)探討AIF-1對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用,來(lái)探討AIF-1對(duì)血管瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在的作用及其機(jī)制；方法：構(gòu)建AIF-1的表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1(-)-AIF-1轉(zhuǎn)染正常血管內(nèi)皮細(xì)胞系HUV-EC-Cs,建立AIF-1過(guò)表達(dá)的內(nèi)皮細(xì)胞株；通過(guò)MTT、流式細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖,內(nèi)皮細(xì)胞劃痕及遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移能力,成管實(shí)驗(yàn)及雞胚尿囊膜成血管實(shí)驗(yàn)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的分化能力、半定量的RT-PCR、Real time PCR及ELISA實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor, b-FGF)、金屬蛋白酶組織抑制劑1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1)、單核細(xì)胞趨化蛋白1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)及粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)的mRNA和蛋白水平；結(jié)果：正常內(nèi)皮細(xì)胞不表達(dá)AIF-1,轉(zhuǎn)染后AIF-1的表達(dá)顯著增加；MTTT及流式細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)顯示內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)AIF-1后增殖能力顯著增強(qiáng)(p0.05),停留于靜止期(G0／G1)的細(xì)胞比例明顯減少,而處于DNA合成期(S)及分裂期(G2／M)的細(xì)胞比例明顯增加；細(xì)胞劃痕及遷移實(shí)驗(yàn)同樣證實(shí)AIF-1能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移；同時(shí),成管實(shí)驗(yàn)及雞胚尿囊膜成血管實(shí)驗(yàn)顯示AIF-1能促進(jìn)血管生成；并且,AIF-1可以上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞bFGF的表達(dá),而對(duì)VEGF、TIMP-1、MCP-1及G-CSF的表達(dá)無(wú)影響； 結(jié)論：AIF-1有可能是通過(guò)上調(diào)bFGF的表達(dá)來(lái)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及血管生成,從而影響血管瘤的發(fā)生發(fā)展。 第三部分 在嬰幼兒血管瘤中同種異體移植炎癥因子1(AIF-1)上游調(diào)控因素的研究 目的：探討AIF-1在血管瘤中表達(dá)的原因；方法：用bFGF、VEGF、胰島素樣生長(zhǎng)因子2 (insulin-like growth factor 2, IGF 2)及低氧刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞,作用24h或48h后,運(yùn)用RT-PCR的方法檢測(cè)AIF-1的表達(dá)；結(jié)果：bFGF、VEGF、IGF 2的濃度及低氧均不能誘導(dǎo)AIF-1的表達(dá),并且不依賴(lài)于濃度及作用時(shí)間； 結(jié)論：在血管瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用的生長(zhǎng)因子并不影響AIF-1的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：武漢大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R732.2

【共引文獻(xiàn)】

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3 付康;趙燕英;劉收;鐘雅;陳正望;;同種異體移植炎性因子-1:一種多功能的炎性蛋白質(zhì)[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2007年01期

4 李發(fā)芳;陳正望;;新生物活性肽—daintain/AIF-1在乳腺癌中的表達(dá)[J];湖北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2005年04期

5 趙燕英;王建和;付康;陳正望;陸婕;;細(xì)胞因子Daintain/AIF-1的純化及其單克隆抗體的制備與鑒定[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

6 殷敏智;張忠德;吳湘如;奚政君;儲(chǔ)謙;;嬰兒性血管瘤24例臨床病理分析[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2007年04期

7 ;Characterization and expression analysis of an allograft inflammatory factor-1 homologue in yellow grouper (Epinephelus awoara)[J];Acta Oceanologica Sinica;2008年06期

8 郭伶俐;邢新;;特殊類(lèi)型血管瘤的臨床和生物學(xué)特征[J];中國(guó)美容整形外科雜志;2007年06期

9 黃欣媛;陳正望;;Daintain/AIF-1:一個(gè)疾病相關(guān)的多功能炎癥因子[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年14期

10 顏冬菁;蓋文麗;趙燕英;黃欣媛;陳正望;陸婕;;小鼠Daintain/AIF-1基因啟動(dòng)子的克隆及其熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年06期

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3 林菁艷;去神經(jīng)后疼痛大鼠術(shù)后早期鎮(zhèn)痛的脊髓背角結(jié)構(gòu)可塑性體視學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

4 趙忠芳;普萘洛爾治療血管瘤分子機(jī)制的初步研究及臨床應(yīng)用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2011年

5 王偉;炎癥因子Daintain/AIF-1在動(dòng)脈粥樣硬化中的功能研究[D];華中科技大學(xué);2011年

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2 鄭艷利;Wistar大鼠口腔粘膜癌變過(guò)程的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2007年

3 高云;死亡受體及配體中反義同源盒序列的篩選、鑒定及活性研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

4 王偉;AIF-1原核載體的構(gòu)建及表達(dá)純化[D];華中科技大學(xué);2006年

5 趙燕英;Daintain/AIF-1的純化及其單克隆抗體的制備與鑒定[D];華中科技大學(xué);2006年

6 王茹兮;大炎肽/同種異體移植炎癥因子-1對(duì)MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞的增殖作用[D];華中科技大學(xué);2007年

7 黃欣媛;Daintain/AIF-1酵母雙雜交誘餌表達(dá)載體的構(gòu)建及初步鑒定[D];華中科技大學(xué);2007年

8 黃祖根;耳廓?jiǎng)屿o脈畸形治療中選擇性介入栓塞的作用研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

9 姚偉;穩(wěn)定抑制β-catenin的RNAi真核載體的構(gòu)建及其對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株體內(nèi)外增殖作用的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

10 雍熙;平陽(yáng)霉素治療血管瘤臨床研究—單中心21年治療回顧性分析[D];川北醫(yī)學(xué)院;2014年

本文編號(hào)：2758374