【摘要】： 先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung's disease，HD)是小兒腸梗阻的常見(jiàn)病因，目前其腸管運(yùn)動(dòng)障礙的病理生理機(jī)制尚未明確。Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of Cajal，ICCs)是分布在胃腸道神經(jīng)末梢與平滑肌之間的一類特殊細(xì)胞，它們通過(guò)縫隙連接彼此相連，被認(rèn)為是腸道平滑肌運(yùn)動(dòng)的起搏點(diǎn)及協(xié)調(diào)者。在胃腸道c-kit免疫組化染色方法標(biāo)記ICCs具有特異性，而Connexin43是人類最重要的縫隙連接蛋白。 目的 本研究應(yīng)用抗c-kit和抗Connexin43雙標(biāo)免疫組化方法觀察ICCs和Connexin43在HD痙孿段、移行段及擴(kuò)張段腸管中的分布狀態(tài)及ICCs的連接方式，以探討HD的發(fā)病機(jī)制。 資料方法 本組11例HD手術(shù)標(biāo)本，均經(jīng)組織學(xué)檢查證實(shí)診斷�；純耗挲g5月—2.5歲，男8例，女3例。常見(jiàn)型9例，長(zhǎng)段型2例。均行經(jīng)肛門soave巨結(jié)腸根治術(shù)。對(duì)每例取痙攣段、移行段及擴(kuò)張段系膜側(cè)全層腸壁組織，常規(guī)石蠟包埋、切片，采用SABC雙標(biāo)免疫組化染色。以擴(kuò)張段近端腸管做自身對(duì)照。光鏡下觀察以及計(jì)數(shù)ICCs數(shù)目，對(duì)HD擴(kuò)張段與痙攣段的肌間神經(jīng)叢內(nèi)和環(huán)肌內(nèi)的ICCs數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果ICCs分布在環(huán)肌內(nèi)和肌間神經(jīng)叢區(qū)，呈紡錘形，沿其縱軸有2個(gè)長(zhǎng)的主要突起，細(xì)胞核較大，胞漿內(nèi)可見(jiàn)紫藍(lán)色顆粒樣物質(zhì)。環(huán)肌內(nèi)的ICCs位于肌間隔內(nèi)，與平滑肌細(xì)胞緊貼，并與平滑肌纖維平行走行。ICCs在HD的有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段腸管與無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段腸管分布不同，在HD的擴(kuò)張段(即有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段)：ICCs大量分布在環(huán)肌內(nèi)，此區(qū)域ICCs很豐富，形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)；肌間神經(jīng)叢區(qū)也分布大量ICCs，主要分布在神經(jīng)叢周邊，與周圍界限明顯。在HD痙攣段(即無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞段)：環(huán)肌內(nèi)ICCs明顯減少甚至缺如，僅肌間神經(jīng)叢區(qū)域有少許ICCs，ICCs彼此間距離遠(yuǎn)，連接 不明顯，對(duì)每一例HD擴(kuò)張段與痙攣段環(huán)肌內(nèi)和肌間神經(jīng)叢中的ICCs數(shù)目 進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)HD無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞腸管ICCs數(shù)目明顯減少，差異具有顯著 性意義(p0 .001)�？笴o皿e石n43陽(yáng)性表達(dá)呈鮮紅色顆粒狀，主要分布在 以下三個(gè)部位:(l)、主要在ICCs的胞體及突起上;(2)、在環(huán)、縱肌內(nèi)，主要在 環(huán)肌內(nèi)和環(huán)肌外側(cè)緣，在兩相鄰肌細(xì)胞的胞膜接觸處和其兩側(cè)的胞漿內(nèi)，呈 紅色細(xì)絲狀及小的點(diǎn)片狀;(3)、大量分布在環(huán)、縱肌之間的肌間神經(jīng)叢區(qū)。 在HD的有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞腸管:上述區(qū)域均可見(jiàn)Connexin43明顯的表達(dá)，Con- ne石n43陽(yáng)性表達(dá)的強(qiáng)弱和分布與ICCs分布具有一致性。在HD的無(wú)神經(jīng) 節(jié)細(xì)胞腸管:在環(huán)肌內(nèi)和肌間神經(jīng)叢區(qū)殘存的ICCs上Connexin43陽(yáng)性表達(dá) 明顯減弱甚至喪失;在環(huán)、縱肌的肌纖維間仍可見(jiàn)Connexin43表達(dá)，但減 弱;在肌間神經(jīng)叢區(qū)Colmexin43也明顯減弱甚至消失。 結(jié)論 本研究證實(shí)與神經(jīng)節(jié)細(xì)胞缺如一樣，病變腸管缺少ICCs是HD病理改 變之一。HD病變腸管不僅Cajal間質(zhì)細(xì)胞減少，而且存在縫隙連接蛋白 Connexin43表達(dá)異常，ICCs彼此及與平滑肌細(xì)胞形成縫隙連接。ICCs和 Connexin43分布異常必將導(dǎo)致腸管慢波節(jié)律和興奮傳導(dǎo)異常，從而引起或 加重HD發(fā)病，而腸管中殘存IcCs的數(shù)量和功能可能與HD臨床癥狀輕重 有一定關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R726.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 張惠琴,辛?xí)匝?陳必良,趙三純,馬向東;足月妊娠子宮肌間隙連接cx43 mRNA及其蛋白的表達(dá)意義[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1999年09期

本文編號(hào)：2757705