【摘要】： 先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung's disease，HD)是小兒腸梗阻的常見病因，目前其腸管運動障礙的病理生理機制尚未明確。Cajal間質(zhì)細胞(interstitial cells of Cajal，ICCs)是分布在胃腸道神經(jīng)末梢與平滑肌之間的一類特殊細胞，它們通過縫隙連接彼此相連，被認為是腸道平滑肌運動的起搏點及協(xié)調(diào)者。在胃腸道c-kit免疫組化染色方法標(biāo)記ICCs具有特異性，而Connexin43是人類最重要的縫隙連接蛋白。 目的 本研究應(yīng)用抗c-kit和抗Connexin43雙標(biāo)免疫組化方法觀察ICCs和Connexin43在HD痙孿段、移行段及擴張段腸管中的分布狀態(tài)及ICCs的連接方式，以探討HD的發(fā)病機制。 資料方法 本組11例HD手術(shù)標(biāo)本，均經(jīng)組織學(xué)檢查證實診斷。患兒年齡5月—2.5歲，男8例，女3例。常見型9例，長段型2例。均行經(jīng)肛門soave巨結(jié)腸根治術(shù)。對每例取痙攣段、移行段及擴張段系膜側(cè)全層腸壁組織，常規(guī)石蠟包埋、切片，采用SABC雙標(biāo)免疫組化染色。以擴張段近端腸管做自身對照。光鏡下觀察以及計數(shù)ICCs數(shù)目，對HD擴張段與痙攣段的肌間神經(jīng)叢內(nèi)和環(huán)肌內(nèi)的ICCs數(shù)目進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果ICCs分布在環(huán)肌內(nèi)和肌間神經(jīng)叢區(qū)，呈紡錘形，沿其縱軸有2個長的主要突起，細胞核較大，胞漿內(nèi)可見紫藍色顆粒樣物質(zhì)。環(huán)肌內(nèi)的ICCs位于肌間隔內(nèi)，與平滑肌細胞緊貼，并與平滑肌纖維平行走行。ICCs在HD的有神經(jīng)節(jié)細胞段腸管與無神經(jīng)節(jié)細胞段腸管分布不同，在HD的擴張段(即有神經(jīng)節(jié)細胞段)：ICCs大量分布在環(huán)肌內(nèi)，此區(qū)域ICCs很豐富，形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)；肌間神經(jīng)叢區(qū)也分布大量ICCs，主要分布在神經(jīng)叢周邊，與周圍界限明顯。在HD痙攣段(即無神經(jīng)節(jié)細胞段)：環(huán)肌內(nèi)ICCs明顯減少甚至缺如，僅肌間神經(jīng)叢區(qū)域有少許ICCs，ICCs彼此間距離遠，連接 不明顯，對每一例HD擴張段與痙攣段環(huán)肌內(nèi)和肌間神經(jīng)叢中的ICCs數(shù)目 進行比較，發(fā)現(xiàn)HD無神經(jīng)節(jié)細胞腸管ICCs數(shù)目明顯減少，差異具有顯著 性意義(p0 .001)。抗Co皿e石n43陽性表達呈鮮紅色顆粒狀，主要分布在 以下三個部位:(l)、主要在ICCs的胞體及突起上;(2)、在環(huán)、縱肌內(nèi)，主要在 環(huán)肌內(nèi)和環(huán)肌外側(cè)緣，在兩相鄰肌細胞的胞膜接觸處和其兩側(cè)的胞漿內(nèi)，呈 紅色細絲狀及小的點片狀;(3)、大量分布在環(huán)、縱肌之間的肌間神經(jīng)叢區(qū)。 在HD的有神經(jīng)節(jié)細胞腸管:上述區(qū)域均可見Connexin43明顯的表達，Con- ne石n43陽性表達的強弱和分布與ICCs分布具有一致性。在HD的無神經(jīng) 節(jié)細胞腸管:在環(huán)肌內(nèi)和肌間神經(jīng)叢區(qū)殘存的ICCs上Connexin43陽性表達 明顯減弱甚至喪失;在環(huán)、縱肌的肌纖維間仍可見Connexin43表達，但減 弱;在肌間神經(jīng)叢區(qū)Colmexin43也明顯減弱甚至消失。 結(jié)論 本研究證實與神經(jīng)節(jié)細胞缺如一樣，病變腸管缺少ICCs是HD病理改 變之一。HD病變腸管不僅Cajal間質(zhì)細胞減少，而且存在縫隙連接蛋白 Connexin43表達異常，ICCs彼此及與平滑肌細胞形成縫隙連接。ICCs和 Connexin43分布異常必將導(dǎo)致腸管慢波節(jié)律和興奮傳導(dǎo)異常，從而引起或 加重HD發(fā)病，而腸管中殘存IcCs的數(shù)量和功能可能與HD臨床癥狀輕重 有一定關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號】：R726.5

【參考文獻】

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1 張惠琴,辛?xí)匝?陳必良,趙三純,馬向東;足月妊娠子宮肌間隙連接cx43 mRNA及其蛋白的表達意義[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1999年09期

本文編號：2757705