【摘要】： 目的： 觀察兒童原發(fā)性腎病綜合征(primary nephrotic syndrome, PNS)治療過程中糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor, GR)亞型GRa、GRβ的mRNA表達(dá)水平,探討GRα和GRβ與兒童PNS的關(guān)系。通過GRα和GRβ的mRNA表達(dá)變化及各項(xiàng)臨床指標(biāo)的變化來評價(jià)三種糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid, GC)類藥物對兒童PNS的療效。 方法： 研究對象為天津市兒童醫(yī)院2008年11月-2009年10月收治的55例初治PNS患兒,隨機(jī)分為三組,潑尼松組(A組n=17),曲安西龍組(B組n=20),甲基潑尼松龍組(C組n=18)；以20名兒童為對照。PNS組分別在GC應(yīng)用0周、4周、8周時(shí)取血,通過半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中GRα和GRβ的mRNA表達(dá)水平,同時(shí)檢測PNS組血漿膽固醇(Cho)、血漿白蛋白(Alb)、24小時(shí)尿蛋白定量(24hUP)的變化,監(jiān)測患兒體重、血壓、睡眠、飲食等各項(xiàng)臨床指標(biāo),并記錄激素治療反應(yīng),隨訪轉(zhuǎn)歸情況。 結(jié)果： 1.GRα和GRβ的mRNA表達(dá)水平的變化 1)PNS組和對照組相比GRα和GRβ的mRNA水平變化 a)GC治療0周時(shí),PNS患兒GRα低于正常兒童,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；GRβ高于正常兒童,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 b)PNS患兒GRα表達(dá)在GC治療4周比0周降低,治療8周比4周升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；隨著GC的治療,PNS患兒GRβ表達(dá)在治療4周比0周升高,治療8周比4周升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2)各PNS組GRα和GRβ的mRNA水平的變化 a) GC治療0周時(shí),A、B、C三組的GRα和GRβ的mRNA水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 b)GC治療4周時(shí),A組和B組的GRα比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),C組高于A組和B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；GC治療8周,A組和B組的GRα比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),C組高于A組和B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 c)GC治療4周時(shí),C組和B組的GRβ比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05)；C組和B組均低于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；GC治療8周,C組和B組的GRβ比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；C組和B組均低于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3)PNS患兒GC耐藥6例,在GC治療0、4、8周時(shí),其GRα均低于GC敏感患兒,GRβ均高于GC敏感患兒,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 2.各項(xiàng)生化指標(biāo)的變化隨著GC治療,所有PNS患兒的血漿膽固醇均降低；血漿白蛋白上升；24小時(shí)尿蛋白定量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 1)Cho：三組PNS組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 2) Alb:GC治療4周時(shí),C組和B組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；C組和B組均高于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；GC治療8周,C組和B組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；C組和B組均高于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 3) 24hUP:GC治療4周時(shí)和治療8周時(shí),C組和B組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；C組和B組均低于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1.PNS患兒,PBMCs中GRα和GRβ的mRNA表達(dá)存在異常,其表達(dá)的紊亂可能是造成GC耐藥的原因之一。 2.GC對PNS患兒的治療,可以調(diào)節(jié)PBMCs中GRα和GRβ的mRNA表達(dá),不同的GC調(diào)節(jié)其變化的程度不同,可根據(jù)調(diào)節(jié)水平來評價(jià)GC的療效。 3. RT-PCR方法可應(yīng)用于臨床檢測PBMCs中GRα和GRβ的mRNA表達(dá),指導(dǎo)PNS患兒的GC選擇,評價(jià)治療效果,預(yù)測治療反應(yīng)及轉(zhuǎn)歸。 4.口服甲基潑尼松龍片可應(yīng)用于初治PNS患兒的治療；甲基潑尼松龍,曲安西龍對PNS患兒的治療療效優(yōu)于潑尼松。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R726.9
【圖文】：

s液4ml放入試管中稀釋血液，充分混勻，再用標(biāo)槍吸取混勻的血液，沿離心管壁緩慢的加入到淋巴細(xì)胞分離液之上，保持稀釋血液與淋巴細(xì)胞分離液之間清楚的界面。如圖1。 c)1500轉(zhuǎn)/分，離心巧分鐘，可見離心管中液體可分為四層。第一層:為血漿或組織勻漿液層;第二層:環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層;第三層:粒細(xì)胞層;第四層:為紅細(xì)胞層。如圖1。圖1外周血單個(gè)核細(xì)胞分離圖示d)用標(biāo)槍旋轉(zhuǎn)吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層，盡可能不要漏吸，注意不要吸到下面的沉淀，將吸取的液體放入新的離心管中，再加入Hank，s液4ml混勻，以2500轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘，棄掉上面液體。e)有時(shí)會混有少量紅細(xì)胞

津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文實(shí)驗(yàn)結(jié)果表7PNS組PNS組之間GC治療8周時(shí)GRa和G礎(chǔ)的變化(x士:)例數(shù)GRaGRpA組B組C組F0.598士0.1790.650士0.1260.741士0.1354.2190.551士0.1880.405士0.1820.375士0.2453.4657.一0

本文編號：2739225