【摘要】：目的:傳染性單核細(xì)胞增多癥(Infectious mononucleosis,IM)多是由EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)導(dǎo)致的一種急性或者亞急性淋巴細(xì)胞良性增生的傳染性疾病。原發(fā)性EBV感染多呈隱性感染,有臨床表現(xiàn)者近50%表現(xiàn)為IM。IM的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,目前一致認(rèn)為免疫病理?yè)p傷與其密切相關(guān)。3~5歲是我國(guó)兒童EBV感染的高峰年齡,感染率高達(dá)90%。本病臨床表現(xiàn)多樣,多具有不同程度的發(fā)熱、頸部淋巴結(jié)腫大、咽峽炎、眼瞼水腫、肝脾腫大、皮疹、肝功能損害、外周血淋巴細(xì)胞及異型淋巴細(xì)胞增多等,因臨床表現(xiàn)缺乏特異性以及首發(fā)癥狀的多樣性,而易被誤診。由于兒童的自身發(fā)育特征特別是嬰幼兒的細(xì)胞免疫和體液免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善,一些常規(guī)的實(shí)驗(yàn)方法對(duì)于診斷兒童IM存在一定局限性,有些實(shí)驗(yàn)需要特殊設(shè)備,費(fèi)用較為昂貴,不易普遍開展,尤其是廣大基層醫(yī)院,且目前又沒(méi)有新的檢測(cè)方法出現(xiàn)。β2-微球蛋白(Bata2-microglobulin,β2-MG)是細(xì)胞表面人類淋巴細(xì)胞抗原(HLA)的β鏈(輕鏈)部分,與免疫球蛋白穩(wěn)定區(qū)的結(jié)構(gòu)相似。血清β2-MG存在于除紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞以外的有核細(xì)胞內(nèi),主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。目前國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道β2-MG在一些淋巴增殖性疾病中明顯增高。腺苷脫氨酶(Adenosine deaminase,ADA)是一種與機(jī)體免疫系統(tǒng)密切相關(guān)的代謝酶類,參與細(xì)胞免疫,是T淋巴細(xì)胞活力的標(biāo)志物。鑒于IM患兒多表現(xiàn)為B淋巴細(xì)胞的增殖,T淋巴細(xì)胞處于激活狀態(tài),因此本研究擬探索新的檢測(cè)指標(biāo)為目的,檢測(cè)血清中與淋巴細(xì)胞相關(guān)的β2-MG與ADA在IM患兒中的表達(dá)水平,輔助診斷兒童IM,以探討β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)兒童IM臨床診斷的價(jià)值,同時(shí)對(duì)其變化的原因進(jìn)行初步探討。β2-MG與ADA在普通生化分析儀均能檢測(cè),且結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性好,敏感性高,方法簡(jiǎn)便快速,且價(jià)格低廉,具有在一般的實(shí)驗(yàn)室均可開展的優(yōu)勢(shì)。方法:1研究對(duì)象病例來(lái)自2018年1月-2019年1月期間河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院兒內(nèi)科,分3組:(1)IM組:明確診斷為IM的患兒80例,其中男性患兒44名,女性患兒36名,年齡6個(gè)月~13歲,平均4.61±3.40歲;(2)非IM組:首診癥狀與IM相似,診斷為非IM的住院患兒120例,其中男性患兒61名,女性患兒59名,年齡3個(gè)月~14歲,平均4.26±3.51歲(其中包括最終診斷為肺炎支原體感染患兒30名及病毒感染患兒68名);(3)健康對(duì)照組:健康體檢兒童40例,其中男性20名,女性20名,年齡6個(gè)月~12歲,平均4.55±4.20歲。各組間性別、年齡均無(wú)顯著差異。所有入選者均簽署醫(yī)院科研倫理和知情同意書。2檢測(cè)內(nèi)容收集所有受試兒童每人2份血液樣本,分別進(jìn)行以下項(xiàng)目的檢測(cè):2.1分離血清采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法測(cè)定β2-MG的含量,采用膠體金增強(qiáng)免疫法測(cè)定胱抑素C(Cystatin c,Cys C)的含量,采用酶法測(cè)定ADA活性,采用速率法測(cè)定谷草轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic-oxaloacetic transaminase,AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic-pyruvic transaminase,ALT)的活性,采用間接免疫熒光法檢測(cè)EBV特異性抗體,包括EBV衣殼抗體Ig M(VCA-Ig M)、EBV早期抗體Ig G(EA-Ig G)和EBV核心抗體(EBNA-Ig G)、EBV衣殼抗體Ig G(VCA-Ig G)及抗體親和力。2.2全血采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞術(shù)法檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(White blood cell,WBC)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)(Lymphocyte,LYM);采用涂片分類法計(jì)數(shù)異型淋巴細(xì)胞百分比。2.3檢測(cè)指標(biāo)在各組間進(jìn)行對(duì)比,并建立受試者工作特征曲線(ROC)分析β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)IM的臨床診斷價(jià)值。采用SPSS 24.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多個(gè)均數(shù)之間的兩兩比較采用方差分析,(方差齊用SNK-q檢驗(yàn),方差不齊用Dunnett-t檢驗(yàn)),采用受試者工作特征曲線(ROC)曲線及曲線下面積(AUC)評(píng)估β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)IM的診斷效能,采用皮爾遜相關(guān)性分析研究實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果:1.IM組的β2-MG、Cys C的含量;ADA、AST及ALT的活性;WBC、LYM及異型淋巴細(xì)胞百分比均顯著高于非IM組及健康對(duì)照組IM組:β2-MG的含量為4.30±1.05 mg/L,Cys C含量為0.96±0.22mg/L,ADA的活性為55.19±18.97 U/L,AST活性為64.68±26.37 U/L,ALT活性為69.09±23.82 U/L,WBC為14.38±7.01(×109),LYM為10.31±6.14(×109),異型淋巴細(xì)胞百分比為10.37±8.55(%)(其中大于10%的有32例,最低為2%,最高為40%);非IM組:β2-MG的含量為2.40±0.99 mg/L,Cys C含量為0.85±0.21mg/L,ADA的活性為29.68±15.43 U/L,AST活性為33.61±18.43 U/L,ALT活性為22.90±13.16 U/L,WBC為9.47±4.14(×109),LYM為4.30±2.26(×109),異型淋巴細(xì)胞百分比為5.15±4.39(%);健康對(duì)照組:β2-MG的含量為1.60±0.51 mg/L,Cys C含量為0.85±0.11mg/L,ADA的活性為16.81±3.27 U/L,AST活性為21.95±4.94 U/L,ALT活性為11.0±4.24 U/L,WBC為6.21±1.27(×109),LYM為2.73±0.85(×109),異型淋巴細(xì)胞百分比為0.78±0.73(%)。IM組的β2-MG和Cys C的含量,ADA、AST及ALT的活性,WBC、LYM及異型淋巴細(xì)胞百分比均顯著高于非IM組及健康對(duì)照組(P0.05);非IM組β2-MG的含量,ADA、AST及ALT的活性,WBC、LYM及異型淋巴細(xì)胞百分比均高于健康對(duì)照組(P0.05),而后兩組Cys C的含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.IM組抗VCA-Ig M陽(yáng)性患兒與抗VCA-Ig M陰性患兒的β2-MG、ADA水平無(wú)顯著差別80例IM患兒抗VCA-Ig M陽(yáng)性23例;抗EA-Ig G陽(yáng)性44例;抗VCA-Ig G 80例均為陽(yáng)性,且均為低親和力抗體。抗VCA-Ig M是IM患兒處于EBV感染早期特異性抗體,根據(jù)抗VCA-Ig M結(jié)果將80例IM患兒分為抗VCA-Ig M陽(yáng)性患兒23例,抗VCA-Ig M陰性患兒57例,抗VCA-Ig M陽(yáng)性患兒的β2-MG的含量為4.34±1.14 mg/L,ADA活性為56.78±19.24 U/L;抗VCA-Ig M陰性患兒的β2-MG的含量水平為3.96±1.00mg/L,ADA活性為54.55±18.99 U/L。兩組β2-MG、ADA比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.β2-MG及ADA與淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及異型淋巴細(xì)胞百分比之間均不相關(guān)β2-MG、ADA與LYM相關(guān)性分別為r=0.157,P0.05;r=0.092,P0.05。β2-MG、ADA與異型淋巴細(xì)胞百分比相關(guān)性分別為r=0.034,P0.05;r=0.111,P0.05。β2-MG及ADA與淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及異型淋巴細(xì)胞百分比之間相關(guān)程度弱,基本無(wú)相關(guān)。4.IM患兒肝損害組ADA活性高于IM患兒肝功正常組;IM患兒肝功正常組ADA活性明顯高于非IM組及健康對(duì)照組80例IM患兒中存在肝損害的有52例,占所有IM患兒的65%。肝損害患兒的ADA活性為59.0±18.86 U/L,高于肝功正�；純篈DA活性49.04±14.28 U/L,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而IM患兒肝功正常組ADA活性顯著高于非IM組ADA活性29.68±15.43 U/L及健康對(duì)照組ADA活性16.81±3.27 U/L,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.IM組β2-MG及ADA水平高于肺炎支原體組和病毒組IM組中β2-MG含量為4.30±1.05 mg/L,ADA活性為55.19±18.97 U/L;肺炎支原體組β2-MG含量為2.33±1.02 mg/L,ADA活性為27.69±11.68U/L;病毒組β2-MG含量為2.40±0.93 mg/L,ADA活性為29.54±17.76 U/L。IM組β2-MG含量、ADA活性均顯著高于肺炎支原體組、病毒組(乙型流感病毒、柯薩奇A1、B7、副流感病毒、埃可病毒、呼吸道合胞病毒、巨細(xì)胞病毒、風(fēng)疹病毒),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.ROC曲線分析β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷兒童IM具有較高的準(zhǔn)確性、靈敏度、特異度β2-MG診斷IM的ROC曲線下面積AUC為0.884,靈敏度為88.8%,特異度為83.3%,約登指數(shù)為0.721;ADA診斷IM的ROC曲線下面積AUC為0.884,靈敏度為82.5%,特異度為83.3%,約登指數(shù)為0.658;β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)診斷IM的ROC曲線下面積AUC為0.91,靈敏度為90.0%,特異度為84.2%,約登指數(shù)為0.742。β2-MG、ADA以及β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)準(zhǔn)確性、特異度、靈敏度均高于對(duì)AST、ALT、WBC、LYM、Cys C及異型淋巴細(xì)胞百分比的檢測(cè);β2-MG與ADA聯(lián)合檢測(cè)準(zhǔn)確性更高,靈敏度、特異度均高于單獨(dú)檢測(cè)β2-MG和ADA,最佳Cutoff值β2-MG為3.05 mg/L,ADA為39.50 U/L。結(jié)論:1.血清β2-MG、ADA診斷兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥的準(zhǔn)確性、靈敏度、特異性均高于AST、ALT、WBC、LYM、Cys C及異型淋巴細(xì)胞百分比,且兩者聯(lián)合檢測(cè)優(yōu)于單項(xiàng),對(duì)于輔助診斷兒童IM具有一定的臨床價(jià)值。2.肝損害可能不是IM患兒血清ADA活性升高的主要原因,但肝損害可增強(qiáng)ADA活性升高程度。IM患兒β2-MG、ADA水平與淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、異型淋巴細(xì)胞百分比之間基本不相關(guān)。3.β2-MG與ADA對(duì)于輔助鑒別診斷IM、肺炎支原體感染及一些其他病毒感染,有一些參考價(jià)值。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R725.1
【圖文】：

的活性（Fig.4），WBC、LYM 計(jì)數(shù)（Fig.5）Fig.6）均顯著高于非 IM 組及健康對(duì)照組（P<0含量（Fig.1），ADA（Fig.3）、AST 及 ALT 的活 計(jì)數(shù)（Fig.5）及異型淋巴細(xì)胞百分比（Fig.6）05），兩組 Cys C 含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*#

1 膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測(cè)血清 β2-微球蛋白含ination of β2-microglobulin in serum by dimetry.*compare with non-IM group, P<0.05; #ol group, P<0.05*##2-MGβoncntraeiont(g/L)m

【參考文獻(xiàn)】

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1 黃宇;孫鳴;胡斌;劉朔婕;馬平;洪國(guó)|

本文編號(hào)：2730398