【摘要】： 【目的】： IgA腎病(IgA Nephropathy, IgAN)是兒童常見的原發(fā)性腎小球疾病之一,臨床上主要表現(xiàn)為血尿或／和蛋白尿,并呈慢性進展性過程；病理特征為以IgA為主的免疫復(fù)合物在腎小球系膜區(qū)沉積所致的系膜增生性免疫性腎小球炎癥；其確切發(fā)病機制目前尚未完全清楚。業(yè)已明確,除腎小球病變外,腎小管間質(zhì)損傷程度也是影響IgAN進展和預(yù)后的主要因素之一。其中腎小管上皮細胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal Transition, EMT)作為腎小管間質(zhì)損傷的主要細胞行為參與了IgAN的發(fā)生發(fā)展過程。近來發(fā)現(xiàn)補體應(yīng)答基因-32(Response Gene to Complement-32, RGC-32)是膜攻擊復(fù)合物(C5b-9)介導(dǎo)細胞增殖及炎癥反應(yīng)的下游關(guān)鍵調(diào)控因子而參與炎癥反應(yīng)；Huang等體外實驗也發(fā)現(xiàn)RGC-32是轉(zhuǎn)化生長因子β(Transforming Growth Factor-beta, TGF-β)誘導(dǎo)EMT信號通路下游關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子而可能參與了腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生。因此我們推測RGC-32可能參與了IgAN急性或/和慢性進展過程。但是RGC-32在正常以及腎小球腎炎腎組織中的表達及分布規(guī)律如何、與疾病的關(guān)系及其臨床意義等均未見報道。為此,本實驗旨在了解RGC-32在正常以及兒童IgAN腎組織中表達及其可能的臨床意義。 【方法】： 采用免疫組織化學方法觀察正常腎組織以及兒童IgAN腎組織中RGC-32蛋白的表達與分布,同時觀察α-平滑肌肌動蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(Transforming Growth Factor-β1, TGF-β1)的表達與分布。按照腎組織病理損傷評分,將45例兒童IgAN分為三個亞組即輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組。采用單因素方差分析對RGC-32、α-SNA、TGF-β1的表達進行組間比較分析；對各組間臨床指標分析采用Kruskal Wallis H秩和檢驗；同時采用Spearman相關(guān)分析法對RGC-32、α-SMA、TGF-β1在IgAN腎組織中的表達、IgAN腎組織病理損傷程度、臨床指標如血清肌酐(Serum Creatinine, Scr)、尿微量蛋白系列[包括尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶/肌酐(N-acetyl-β-D-glucosamccharase/Creatinine, NAG/Cr)、尿微量白蛋白/肌酐(Microalbuminuria/Creatinine, Albu/Cr)、尿微量免疫球蛋白G/肌酐(Urinary Micro-immunoglobulin/Creatinine, IgGu/Cr)、尿α1-微球蛋白/肌酐(Urinaryα1-microglobulin/Creatinine,α1-Mu/Cr)]的關(guān)系進行統(tǒng)計學分析。 【結(jié)果】： 1.RGC-32蛋白在正常腎組織的所有腎小管(近端腎小管、遠端腎小管及集合管)均明顯表達,且主要分布于腎小管上皮細胞胞漿及核周；RGC-32蛋白在腎小球、腎小管間質(zhì)及腎血管未見表達。 2.RGC-32在兒童IgAN腎組織中的表達及意義：(1)RGC-32蛋白在IgAN腎組織中表達于所有腎小管上皮細胞,在腎小球、腎小管間質(zhì)及腎血管中未見表達。(2)RGC-32在正常腎組織、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組中的陽性表達指數(shù)分別為18.29±6.22%、23.90±9.65%、31.23±9.86%、34.52±10.63%。RGC-32在IgAN重度損傷組的陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=10.62,P0.01)及正常腎組織(F=16.23,P0.01),與中度損傷組差異無顯著性(F=3.29,P0.05)；中度損傷組RGC-32陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.33,P0.05)及正常腎組織(F=12.94,P0.05)；輕度損傷組與正常腎組織RGC-32陽性表達指數(shù)比較差異無顯著性(F=5.61, P0.05)。(3)RGC-32在IgAN腎組織中的陽性表達指數(shù)與兒童IgAN腎組織病理損傷評分呈正相關(guān)(r=0.382,P0.01)。表明隨著IgAN腎組織病理損傷程度的加重,RGC-32在腎小管的表達逐漸增強。提示RGC-32表達水平與IgAN病理損傷程度有關(guān)。 3.RGC-32與α-SMA表達的關(guān)系：(1)α-SMA蛋白在正常腎組織中主要表達于腎血管平滑肌,在腎小球、腎小管及腎小管間質(zhì)未見表達；在IgAN腎組織中,α-SMA蛋白除在腎血管表達外,在腎小球、腎小管間質(zhì)有不同程度的表達,在腎小管未見表達。(2)α-SMA蛋白在正常腎組織、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組的腎小管間質(zhì)的陽性表達指數(shù)分別為11.58±6.78%、14.59±6.78%、22.34±12.16%、28.68±9.51%。α-SMA在IgAN重度損傷組的陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=14.08,P0.01)及正常腎組織(F=17.10,P0.01),但與中度損傷組比較差異無顯著性(F=6.34,P0.05)；中度損傷組α-SMA陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.75,P0.05)及正常腎組織(F=10.76,P0.05)；輕度損傷組與正常腎組織α-SMA陽性表達指數(shù)比較無顯著差異(F=3.02,P0.05);α-SMA在IgAN(?)腎組織中的陽性表達指數(shù)與兒童IgAN腎組織病理損傷評分呈正相關(guān)(r=0.476,P0.01)。表明隨著IgAN腎組織病理損傷程度加重,α-SMA在腎小管間質(zhì)的表達逐漸增強。(3)在IgAN腎組織中,RGC-32與α-SMA的陽性表達指數(shù)呈正相關(guān)(r=0.594,P0.01)。 4.RGC-32與TGF-β1表達的關(guān)系：(1)TGF-β1蛋白在正常及IgAN腎組織中表達于所有腎小管上皮細胞,在腎小球、腎小管間質(zhì)及腎血管未見表達；與RGC-32蛋白分布規(guī)律一致。(2)TGF-β1在正常腎組織、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組的陽性表達指數(shù)分別為12.89±9.12%、18.45±6.31%、25.75±10.31%、29.22±10.27%。TGF-β1在IgAN重度損傷組的陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=10.77,P0.01)及正常腎組織(F=16.33,P0.01),與中度損傷組相比差異無顯著性(F=3.48,P0.05)；中度損傷組TGF-β1陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.29,P0.05)及正常腎組織(F=12.85,P0.05)；輕度損傷組與正常腎組織TGF-β1陽性表達指數(shù)比較無顯著差異(F=5.56, P0.05)。TGF-β1在IgAN腎組織中的陽性表達指數(shù)與兒童IgAN腎組織病理損傷評分呈正相關(guān)(r=0.482,P0.01)。表明隨著IgAN腎組織病理損傷程度加重,TGF-β1在腎小管中的表達逐漸增強。(3)在IgAN腎組織中,RGC-32與TGF-β1的陽性表達指數(shù)呈正相關(guān)(r=0.521,P0.01)。(4)TGF-β1在IgAN腎組織中的陽性表達指數(shù)與α-SMA的陽性表達指數(shù)亦呈正相關(guān)(r=0.435,P0.01)。 5.RGC-32表達與IgAN臨床相關(guān)指標的關(guān)系：(1)對照組、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組之間的臨床指標Scr、尿NAG/Cr、Albu/Cr、IgGu/Cr、α1-Mu/Cr差異無顯著性(H=7.142、4.829、4.589、4.120、3.755,P0.05)。(2)IgAN腎組織中RGC-32陽性表達指數(shù)與Scr、尿NAG/Cr、Albu/Cr、IgGu/Cr、α1-Mu/Cr均無相關(guān)性(r=0.117、-0.115、-0.138、-0.176、-0.028,P均0.05)。提示RGC-32表達與IgAN臨床指標Scr、尿微量蛋白無密切關(guān)系。 【結(jié)論】： 1.本研究通過免疫組織化學方法,首次發(fā)現(xiàn)RGC-32蛋白在正常腎組織中表達于腎小管上皮細胞,而在腎小球、腎小管間質(zhì)及腎血管未見表達。 2.RGC-32表達與兒童IgAN病理損傷程度明顯正相關(guān),其表達水平能夠反映IgAN病理損傷程度。 3.RGC-32可能參與了IgAN患兒的腎小管間質(zhì)損傷,尤其是TGF-β1誘導(dǎo)的EMT過程。
【學位授予單位】：復(fù)旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R726.9
【圖文】：

碩士學位論文RGc一犯在兒童lgA腎病腎組織中的表達及意義為了進一步了解IgAN腎組織RGC一32表達水平與IgAN腎組織病理損傷度的關(guān)系，經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，兩者呈正相關(guān)(r=0.382，P<0.ol)(見圖2)。隨著IgAN腎組織病理損傷程度的加重，RGC一32在腎小管的表達逐漸增強提示RGC一32表達與IgAN病理損傷程度有關(guān)(見照片P5一P12)。

腎小管間質(zhì)的陽性表達指數(shù)分別為11.58士6.78%、14.59士6.78%、22.34士12.16%、28.68士9.51%。a一sMA在IgAN重度損傷組的陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(介14.08，P<0.ol)及正常腎組織(F=17.10，P<0.ol)，但與中度損傷組比較差異無顯著性(F==6.34，P>0.05);中度損傷組a-SMA陽性表達指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.75，P<0.05)及正常腎組織(F=10.76，尸仗0.05);輕度損傷組與正常腎組織a一sMA陽性表達指數(shù)比較無顯著差異(F=3.02，幾0.05)(見表3及圖3)。表3.a-SMA陽性表達指數(shù)正�！I組織輕度損傷組(鄉(xiāng)分)中度損傷組(5一9分)重度損傷組份10分)例數(shù)(n)416l5l4a-SMA陽性表達指數(shù)(v0)11.58土6.7814.5矢6.7822.34士12.16*#28.68士9.51”##與正常腎組織相比，與輕度損傷組相比，.六0.05，‘，尸切.01;#P<0.05，翻尸<0.01。

【參考文獻】

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1 許艷芳,江德文,李桂芬,高麗真,傅檳檳;IgA腎病小管間質(zhì)損害與預(yù)后[J];福建醫(yī)科大學學報;2005年02期

2 姚俊霞;彭峰;劉濤;李斌;易建華;朱禮國;吳人亮;;腎小管上皮細胞轉(zhuǎn)分化與IgA腎病預(yù)后的相關(guān)性分析[J];廣東醫(yī)學;2008年03期

3 楊霽云;;補體與小兒腎小球疾病[J];臨床兒科雜志;2006年04期

4 胡鵬;覃遠漢;李銘芳;經(jīng)承學;;兒童慢性腎臟疾病的流行現(xiàn)況[J];實用兒科臨床雜志;2008年17期

5 中華醫(yī)學會兒科學分會腎臟病學組;91所醫(yī)院1990～2002年小兒慢性腎衰竭1268例調(diào)查報告[J];中華兒科雜志;2004年10期

6 吳杰 ,陳香美 ,師鎖柱;血管病變在1005例IgA腎病中的意義及其影響因素[J];中華醫(yī)學雜志;2003年04期

7 姜新猷;我國兒科腎臟病臨床回顧與展望[J];中國實用兒科雜志;2000年06期

本文編號：2713774