【摘要】：我們應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)、定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)了63例急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)細(xì)胞系和53例原發(fā)性兒童ALL患者的p73、DCC、nm23-H1、nm23-H2和E2A-PBX1融合基因mRNA表達(dá)改變情況，同時(shí)結(jié)合病人的臨床病例資料進(jìn)行了分析。應(yīng)用DNA甲基化酶譜測(cè)定(REP)、雙亞硫酸鹽修飾的PCR(MSP)和PCR產(chǎn)物測(cè)序(BGS)等技術(shù)對(duì)63例急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系p73基因第1外顯子的甲基化進(jìn)行了檢測(cè)。63例ALL細(xì)胞系中，p73mRNA異常表達(dá)率33.3％(21／63)；DCC mRNA陰性表達(dá)率46.0％(29／63)；nm23-H1、-H2 mRNA表達(dá)明顯高于正常血細(xì)胞；E2A-PBX1融合基因mRNA占11.0％(7／63)，全部為前B-ALL，占前B-ALL 19.0％(7／37)。53例原發(fā)性兒童ALL中，p73 mRNA陰性表達(dá)率26.4％(14／53)，DCC mRNA陰性表達(dá)率39.6％(21／53)，nm23-H1、-H2的表達(dá)明顯高于正常血細(xì)胞，4例(7.5％)檢測(cè)到E2A-PBX1mRNA。p73 mRNA陰性表達(dá)與ALL無病生存期(DFS)、總生存期(OS)的降低有明顯關(guān)系。E2A-PBX1融合基因mRNA也與患者預(yù)后有明顯關(guān)系。63例ALL細(xì)胞系中，38.1％存在p73基因的高甲基化。正常淋巴細(xì)胞和不存在p73基因高甲基化的細(xì)胞系表達(dá)p73mRNA，，大多數(shù)高甲基化的細(xì)胞系不表達(dá)p73 mRNA。研究結(jié)果表明，兒童ALL中p73mRNA存在較高的陰性表達(dá)，其主要機(jī)制為p73基因高甲基化，p73基因失活在ALL的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，p73 mRNA檢測(cè)對(duì)判斷兒童ALL患者的預(yù)后有一定臨床意義。兒童ALL中存在較高比例的DCC mRNA陰性表達(dá)和nm23-H1、-H2 mRNA的高表達(dá)，說明在ALL的發(fā)生發(fā)展中DCC基因失活和nm23-H1、-H2基因的過表達(dá)起有一定作用。DCC、nm23-H1、-H2 mRNA表達(dá)狀況與預(yù)后無明顯關(guān)系。E2A-PBX1融合基因雖然不是兒童ALL中的常發(fā)事件，但有一定的預(yù)后意義。p73、DCC、nm23-H1、-H2基因相互之間無明顯相關(guān)性。
【圖文】：

硫氰酸肌一有機(jī)溶劑法從ALL細(xì)胞系中提取細(xì)胞總RNA

nm23一HIGAPDHRT一PCR擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳。M為22，24，26，28，30，32，34，36，38不rl40循環(huán)(HEL細(xì)胞系)。nm23一Hl/GAPDH/HEL一n.}—}一
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2000
【分類號(hào)】：R733.71

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本文編號(hào)：2711681