【摘要】：[背景和目的] 人類杯狀病毒(Human Caliciviruses, HuCVs)包括諾如病毒(Norovirus, NV)和札如病毒(Sapovirus, SAV),是引起全世界人類非細(xì)菌性急性胃腸炎暴發(fā)的主要病原,也是僅次于輪狀病毒引起嬰幼兒急性腹瀉散發(fā)的常見病原之一 諾如病毒又稱諾瓦克樣病毒(Norwalk-like virus),最初由Kapikian等在1972年通過免疫電鏡的方法從美國俄亥俄州諾瓦克鎮(zhèn)一起非細(xì)菌性胃腸炎暴發(fā)的患者糞便中分離得到；札如病毒(Sapovirus, SAV)以前稱札幌樣病毒(Sapporo-like virus),因最初于1977年在日本札幌市被發(fā)現(xiàn)而命名,是人和豬非細(xì)菌性急性胃腸炎的主要病原體之一。長期以來,由于對杯狀病毒缺乏簡易、敏感的檢測手段,使其導(dǎo)致人類患病的危害被嚴(yán)重低估。 近年來,隨著對杯狀病毒分子流行病學(xué)研究的深入,其重要性和危害性正逐漸被全面、系統(tǒng)的認(rèn)識。2005年1月,加拿大和美國相繼宣布暴發(fā)NV感染,引起了人們的廣泛關(guān)注。2006年11月,日本、新加坡、意大利等地相繼發(fā)生了NV集體感染事件,特別是日本暴發(fā)了25年來最嚴(yán)重的傳染性胃腸炎疫情,不到兩個(gè)月累計(jì)發(fā)生35.76萬人感染NV,引起了全球的廣泛關(guān)注。同期我國包括北京、廣東佛山、福建等省市均出現(xiàn)NV疫情,據(jù)全國病毒性腹瀉監(jiān)測網(wǎng)對11個(gè)省份5歲以下腹瀉兒童的監(jiān)測,NV檢出率為15%左右。由于該病毒傳染性很強(qiáng),常可導(dǎo)致突發(fā)性公共衛(wèi)生事件,美國已將其列為乙類生物恐怖因子。美國疾病控制中心(CDC)最新估計(jì),96%的非細(xì)菌胃腸炎暴發(fā)與NV有關(guān),而SAV則是嬰兒和小齡兒童病毒性腹瀉的主要病原體。 我國對諾如病毒的研究起步較晚,1995年方肇寅等首次在我國嬰幼兒腹瀉糞便標(biāo)本中檢測到諾如病毒。此后,北京、長春、河北、蘭州、廣州、福州等地均在兒童腹瀉糞便標(biāo)本中檢出NV。最近方肇寅等人在對1999年至2005年來自我國13個(gè)地區(qū)的嬰幼兒腹瀉糞便HuCVs研究中其陽性率為8.3%-38.6%,主要以NV為主,檢出率僅次于RV,表明我國AGE病例中NV感染也相當(dāng)普遍。 札如病毒在世界各地都有報(bào)道,2005年2月,日本某幼兒園中23人(包括6名成人)感染SAV病毒。我國上海交大華修國等于2008年在國內(nèi)不明原因腹瀉人群與腹瀉仔豬體內(nèi)分離到一種新的杯狀病毒,經(jīng)過鑒定和動物回歸實(shí)驗(yàn)證明該病毒為SAV。目前,國際上SAV的總體研究水平還處于起步階段。 雖然杯狀病毒感染在我國普遍存在,但是浙江地區(qū)杯狀病毒感染的分子流行特征尚缺乏系統(tǒng)研究,因此,研究杯狀病毒在浙江地區(qū)的分子流行病學(xué)規(guī)律、流行毒株特征及進(jìn)化情況,可以為本地區(qū)杯狀病毒引起的急性腹瀉的防治提供科學(xué)依據(jù),對我國急性腹瀉的預(yù)防控制工作也具有重要意義。 [對象和方法] 1.研究對象 2009年1月至2011年1月來自浙江地區(qū)5個(gè)哨點(diǎn)醫(yī)院腸道門診(包括杭州、寧波、紹興、湖州、衢州)就診的急性腹瀉患者3153例,包括5歲以下嬰幼兒和成人。每日腹瀉次數(shù)超過3次或大便性狀出現(xiàn)明顯異常(水瀉樣、蛋花湯樣、粘液樣或粘糊樣)定義為腹瀉病例。 2.實(shí)驗(yàn)方法 2009-2011年監(jiān)測期間連續(xù)收集以上3153例急性腹瀉患者的糞便標(biāo)本,并同時(shí)進(jìn)行調(diào)查,填寫調(diào)查表,電話隨訪完善調(diào)查表。對收集的標(biāo)本采用多重PCR方法進(jìn)行輪狀病毒(RV)、杯狀病毒(NV和SAV)等病毒檢測,并選取部分?jǐn)U增后的杯狀病毒陽性產(chǎn)物進(jìn)行序列測定,應(yīng)用DNAMAN(5.1.0.0)和MEGA4.0軟件對杯狀病毒和相關(guān)參考株進(jìn)行序列的多重比對和系統(tǒng)進(jìn)化分析。 [結(jié)果] 1.2009年1月至2011年1月,本研究共檢測浙江地區(qū)3153份急性腹瀉標(biāo)本,杯狀病毒檢出率較高,為18.42%,僅次于輪狀病毒的檢出率(20.10%)。 2.諾如病毒共檢出265份(12.36%,265/2144；52份為NV-G基因型,213份為NV-GⅡ基因型)；札如病毒檢出率為6.06%(130/2144)。5歲組檢出率最高,其次是15-65歲組,5-15歲組檢出率最低。浙江地區(qū)急性腹瀉患者中杯狀病毒感染全年均有發(fā)生,以冬春季節(jié)(11-4月)感染較多,另外夏季(6-8月)檢出率也相對較高。 3.隨機(jī)抽取15株諾如病毒和10株SAV進(jìn)行測序分析,NV基因型別包括：G Ⅰ-1(3株)、G Ⅰ-2(1株)、G Ⅱ-4/2006b變異株(7株)、G Ⅱ-2(1株)、G Ⅱ-7(1株)和G Ⅱ-4/2008變異株(2株)；SAV基因型別包括：G Ⅰ-2(5株)、G Ⅰ-1(4株)和G Ⅱ-1(1株)。 [結(jié)論] 1.杯狀病毒是浙江地區(qū)引起急性腹瀉的一個(gè)重要病原,僅次于輪狀病毒的檢出率,且諾如病毒檢出率高于札如病毒。該病毒主要感染五歲以下嬰幼兒,冬春季節(jié)為感染高發(fā)季節(jié)。 2.浙江地區(qū)急性腹瀉患者杯狀病毒感染呈現(xiàn)遺傳多樣性特征,諾如病毒在浙江地區(qū)包括GI-1、GI-2、GⅡ-2、GⅡ-7、GⅡ-4五個(gè)基因型,GⅡ-4/2006b可能是本地區(qū)的流行優(yōu)勢株；札如病毒包括G Ⅰ-2、G Ⅰ-1和G Ⅱ-1三個(gè)基因型,G Ⅰ-2基因型是流行優(yōu)勢株。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R725.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2686168