發(fā)布時(shí)間：2020-05-28 17:50

【摘要】：第一部分孤獨(dú)癥譜系障礙兒童腸道癥狀及腸道菌群與行為關(guān)系1背景:腸道癥狀及腸道菌群紊亂在孤獨(dú)癥譜系障礙(autism spectrum disorder,ASD)中常見,且腸道可以通過腸腦軸影響ASD的核心癥狀。目的:探索本地區(qū)ASD兒童胃腸道(gastrointestinal,GI)癥狀特點(diǎn),GI癥狀與行為相關(guān)關(guān)系,以及無GI癥狀A(yù)SD兒童的相關(guān)腸道菌群;同時(shí)探索ASD最突出GI癥狀亞型兒童的行為損害特點(diǎn)及相關(guān)腸道菌群改變。方法:孤獨(dú)癥癥狀使用孤獨(dú)癥行為量表(autism behaviour checklist,ABC),兒童孤獨(dú)癥評估量表(childhood autism rating scale,CARS),社交反應(yīng)量表(social responsiveness scale,SRS)進(jìn)行評定,孤獨(dú)癥社交行為相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)使用CD38和視黃酸受體相關(guān)孤兒受體α(acid-related orphan receptor alpha,RORA)基因作為標(biāo)志,引用國外(6-GI severity index,6-GSI)問卷作為GI癥狀評估工具。183例ASD兒童和66例CON兒童納入橫斷面調(diào)查,完成上述指標(biāo),比較兩組間GI癥狀差異。分析ASD兒童各GI癥狀與ABC、CARS、SRS、CD38和RORA基因表達(dá)水平的相關(guān)關(guān)系。分析ASD最突出GI癥狀兒童與無GI癥狀兒童行為差異。將收集到大便的ASD兒童按最突出GI癥狀、ASD無GI癥狀、對照組無GI癥狀進(jìn)行分層,各分層中隨機(jī)抽取24例,分別組成ASD+最突出GI癥狀、ASD-GI、CON-GI組,使用Illumina Mi Seq二代測序進(jìn)行菌群分析,探索ASD+最突出GI癥狀組與ASD-GI,ASD-GI與CON-GI的菌群組成差異。結(jié)果:ASD較CON而言,GI總問題(52.46%VS.36.36%)及便秘(33.33%VS.15.15%)患病率顯著增高(P均0.05),校正混雜因素后ASD較CON GI總問題(1.08±1.44 VS.0.68±0.98)及便秘得分(0.40±0.62 VS.0.17±0.41)顯著增高(校正P均0.05)。ASD兒童GI癥狀與ABC、CARS、SRS量表得分之間無顯著相關(guān)(P均0.05)。ASD兒童RORA基因表達(dá)量與GI癥狀總得分(相關(guān)系數(shù)=-0.21,P=0.0053)、便秘得分(相關(guān)系數(shù)=-0.18,P=0.0184)顯著負(fù)相關(guān),CD38基因表達(dá)量與GI總得分及各GI癥狀得分無顯著相關(guān)(P均0.05)。ASD有便秘比ASD無GI癥狀兒童ABC、CARS、SRS量表得分無顯著差異(P均0.05),RORA基因表達(dá)顯著降低(P=0.0075),CD38有降低趨勢但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。隨機(jī)抽樣菌群亞組分析,LEf SE分析顯示ASD-GI較CON-GI顯著優(yōu)勢菌群為Prevotella、Bifidobacterium、Lactobacillales、Streptococcus、Erysipelotrichaceae等。經(jīng)過Wilcoxon秩和檢驗(yàn)及多重假設(shè)檢驗(yàn)校正分析,顯著優(yōu)勢菌群為Coriobacteriia、Coriobacteriales、Erysipelotrichales、Pseudomonadales。LEf SE分析顯示ASD+便秘較ASD-GI兒童顯著優(yōu)勢菌群為Prevotellaceae、Prevotella、Paraprevotella、Megasphaera、Christensenellaceae;相對豐度顯著下降的菌群為Eggerthella。經(jīng)Wilcoxon秩和檢驗(yàn)以及多重假設(shè)檢驗(yàn)校正分析,ASD+便秘與ASD-GI間顯著差異菌群沒有找到。結(jié)論:ASD較CON GI癥狀顯著,GI癥狀與社交行為相關(guān)生物指標(biāo)相關(guān),Lactobacillales、Streptococcus、Bifidobacterium等在ASD-GI兒童中顯著升高。便秘在ASD兒童GI癥狀中居首位,且ASD便秘亞型兒童伴隨更多社交行為相關(guān)生物指標(biāo)損害,尚未發(fā)現(xiàn)ASD便秘亞型相關(guān)的腸道菌群,需進(jìn)一步研究。第二部分維生素A與孤獨(dú)癥譜系障礙兒童腸道癥狀、腸道菌群及行為的關(guān)系背景:第一部分研究發(fā)現(xiàn)ASD GI癥狀常見,且伴隨腸道菌群改變,這可能加重孤獨(dú)癥社交行為相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)的損害。維生素A(vitamin A,VA)在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育,腸道機(jī)械屏障、免疫屏障、生物屏障方面均有一定調(diào)節(jié)作用。目的:此部分研究旨在探索VA在ASD腸道癥狀、腸道菌群及行為方面的作用。方法:VA使用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)測定,孤獨(dú)癥癥狀使用ABC、CARS、SRS量表進(jìn)行評定,孤獨(dú)癥社交行為相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)使用CD38和RORA基因作為標(biāo)志,6-GSI問卷作為GI癥狀評估工具。首先,橫斷面調(diào)查的參與者同第一部分ASD兒童,其接受血漿VA水平、腸道癥狀、ABC、CARS、SRS、CD38和RORA基因表達(dá)水平的評估及測定。對VA與GI癥狀、ABC、CARS、SRS、CD38和RORA基因表達(dá)水平的相關(guān)關(guān)系進(jìn)行分析。然后,建立64例ASD兒童的隨訪隊(duì)列,完成VA大劑量20萬IU干預(yù),6月后隨訪。比較干預(yù)前后血漿VA水平、GI癥狀,ABC、CARS、SRS、CD38和RORA基因表達(dá)水平的差異。對64例中完成大便收集的20例兒童進(jìn)行腸道Illumina Mi Seq二代測序菌群分析,了解VA干預(yù)前后腸道菌群差異。結(jié)果:ASD患者中VA與GI總得分、大便性狀改變得分顯著負(fù)相關(guān)(γs=-0.15,γs=-0.18,P=0.0449,P=0.0268)。VA與孤獨(dú)癥癥狀量表ABC、CARS、SRS得分無顯著關(guān)系(全部P0.05)。VA與孤獨(dú)癥社交行為相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)CD38和RORA基因表達(dá)量顯著正相關(guān)(γs=0.30,γs=0.21,P=0.0001,P=0.0097)。VA干預(yù)6月后,64例隊(duì)列兒童原有GI總問題,便秘、腹瀉、大便氣味改變等癥狀好轉(zhuǎn)(全部P0.05);血漿VA,CD38和RORA基因表達(dá)水平顯著升高(全部P0.05);ABC、CARS、SRS得分無顯著差異(全部P0.05)。20例腸道菌群分析兒童,LEf SE和Wilcoxon秩和檢驗(yàn)均發(fā)現(xiàn),VA干預(yù)6月后,Bacteroidetes/Bacteroidia/Bacteroidales(門綱目水平)相對豐度顯著增加,Actinobacteria/Bifidobacteriales/Bifidobacteriaceae/Bifidobacterium(綱目科屬水平)相對豐度顯著降低。結(jié)論:VA對ASD兒童部分GI癥狀及孤獨(dú)癥社交行為相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)CD38及RORA有改善作用,Bacteroidetes/Bacteroidales可能是VA參與調(diào)解ASD的特異菌群,VA對ASD核心癥狀的作用需進(jìn)一步大樣本隨機(jī)對照研究去驗(yàn)證。
【圖文】：

圖 1 課題假設(shè)圖ig 1 Scheme of the research hypothesis ASD GI 癥狀、腸道菌群及行為的腸道菌群，改善 ASD 行為。一共分系障礙兒童腸道癥狀及腸道菌群與卷對 ASD、CON 進(jìn)行比較，了解 采用孤獨(dú)癥行為量表（autism behaildhood autism rating scale, CARS），）及孤獨(dú)癥行為相關(guān)生物學(xué)指標(biāo) CDorphan receptor alpha, RORA）基因 癥狀與行為相關(guān)關(guān)系；同時(shí)進(jìn)行分無 GI 癥狀兒童的行為差異；將 ASD

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文行為的相關(guān)關(guān)系。第二節(jié)為 VA 作用于 ASD 兒童腸道癥狀、腸道菌群及行為瞻性隊(duì)列研究。將第一部分納入的 ASD 兒童進(jìn)行 VA20 萬單位補(bǔ)充，6 月后。比較干預(yù)前后 VA、GI 癥狀、腸道菌群及孤獨(dú)癥行為的差異，，探討 VA 是否通過調(diào)節(jié) ASD GI 癥狀及腸道菌群，影響 ASD 行為，同時(shí)找到 ASD 中 VA 調(diào)特異腸道菌群。技術(shù)路線第一部分：孤獨(dú)癥譜系障礙兒童腸道癥狀及腸道菌群與行為關(guān)系
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R749.94

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 春婷,李廷玉,劉友學(xué),瞿平;邊緣型維生素A缺乏對幼鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及干預(yù)效果[J];中華兒科雜志;2005年07期

本文編號：2685602