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中藥二步序貫治療對哮喘小鼠氣道炎癥與重塑模型影響的對比研究

發(fā)布時間:2020-05-20 01:45
【摘要】:目的觀察人參五味子湯和小青龍湯二步序貫治療對哮喘小鼠氣道炎癥和重塑模型的影響,并進(jìn)行對比,探討其可能的機(jī)制。 方法健康雌性昆明系小鼠80只隨機(jī)分為8組,每組10只,氣道炎癥正常對照組(Ⅰa)、氣道炎癥模型組(Ⅰb)、氣道炎癥普米克令舒組(Ⅰc)、氣道炎癥二步序貫組(Ⅰd)、氣道重塑對照組(Ⅱa)、氣道重塑模型組(Ⅱb)、氣道重塑普米克令舒組(Ⅱc)、氣道重塑二步序貫組(Ⅱd)。Ⅰb、Ⅰc、Ⅰd、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd組小鼠采用卵清白蛋白致敏建立哮喘小鼠模型,并分別予以Ⅰc、Ⅰd、Ⅱc、Ⅱd組不同干預(yù)治療。HE染色和糖原染色觀察肺組織病理學(xué)變化,免疫組化測定肺組織中核因子κB(NF-κB)、GATA-3、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)和金屬蛋白酶組織抑制因子-1(TIMP-1)水平。 結(jié)果①HE染色:Ⅰa組氣管結(jié)構(gòu)和肺泡結(jié)構(gòu)完整,粘膜上皮完整,管腔光滑,無或僅有少許炎癥細(xì)胞浸潤;Ⅰb組氣道壁粘膜、粘膜下、肺間質(zhì)可見大量炎性細(xì)胞浸潤,主要是淋巴細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞,支氣管粘膜明顯充血水腫,上皮細(xì)胞壞死脫落,氣道內(nèi)可見大量粘液栓和脫落上皮細(xì)胞;Ⅰc、Ⅰd組小鼠較Ⅰb組明顯減輕。Ⅱa組支氣管管壁完整、光滑,支氣管肺組織以及血管周圍僅有少量或沒有炎癥細(xì)胞浸潤;Ⅱb組小鼠支氣管肺組織有嚴(yán)重的炎性細(xì)胞浸潤,支氣管管壁增厚,管腔狹窄,杯狀細(xì)胞增生伴高分泌:Ⅱc、Ⅱd組小鼠較Ⅱb組明顯減輕。②糖原染色:Ⅰb、Ⅱb相比較,Ⅱb組明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰa、Ⅱa組相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);ⅠⅡc相比較,Ⅱc明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰd、Ⅱd組相比較,Ⅱd明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。③NF-κB:Ⅰb、Ⅱb相比較,Ⅰb組明顯增加,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰa、Ⅱa組相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅰc、Ⅱc相比較,Ⅰc明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰd、Ⅱd組相比較,Ⅰd明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。④GATA-3:Ⅰb、Ⅱb相比較,Ⅰb明顯增加,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰa、Ⅱa組相比,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05):Ⅰc、Ⅱc相比較,Ⅰc明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰd、Ⅱd組相比較,Ⅰd明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。⑤MMP-9:Ⅰb、Ⅱb相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅰa、Ⅱa組相比,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅰc、Ⅱc相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅰd、Ⅱd組相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。⑥TIMP-1:Ⅰb、Ⅱb相比較,Ⅱb明顯增加,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰa、Ⅱa組相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅰc、Ⅱc相比較,Ⅱc。明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰd、Ⅱd,組相比較,Ⅱd組明顯增多,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。⑦M(jìn)MP-9/TIMP-1:Ⅰb、Ⅱb組MMP-9/TIMP-1比值比較,Ⅰb比值明顯較大,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰa、Ⅱa組MMP-9/TIMP-1比值比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Ⅰc、Ⅱc組MMP-9/TIMP-1比值比較,Ⅰc比值明顯較大,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Ⅰd、Ⅱd組MMP-9/TIMP-1比值比較,Ⅰd比值明顯較大,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論①在細(xì)胞和分子水平分別證明,人參五味子湯、小青龍湯二步序貫治療可以減輕氣道炎癥和氣道重塑;②人參五味子湯、小青龍湯二步序貫治療減輕氣道炎癥和氣道重塑的機(jī)制可能與NF-κB、GATA-3和MMP-9/TIMP-1有關(guān);③為進(jìn)-步研究更為合理的治療哮喘的中藥藥理學(xué)奠定了基礎(chǔ)。
【圖文】:

PAS染色,免疫組化


青島大學(xué)碩士學(xué)位論文圖2一 7Id組PAS染色(X400)圖2一 8Ild組PAS染色(x400)2.3免疫組化測支氣管肺組織NF一KB表達(dá):見表2,圖3I。、nb組小鼠支氣管肺組織免疫組化NF一KB可見大量棕黃色免疫陽性反應(yīng),主要位于氣管壁細(xì)胞、炎性細(xì)胞細(xì)胞漿和細(xì)胞核內(nèi),I、、nb相比較,,I、組明顯增加,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義口幾(0.01);I。、na組小鼠肺組織切片NF一KB免疫組化陽性細(xì)胞數(shù)量少,呈淡黃色,未見濃染棕黃色陽性細(xì)胞,I。、n。組相比較,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0.05):I。、I。、11。、Ild組小鼠肺組織切片NF一KB免疫組化可見棕黃色的陽性反應(yīng)

中藥二步序貫治療對哮喘小鼠氣道炎癥與重塑模型影響的對比研究


Id組GATAee3(x400)圖4一Ild組GATAes3(x400)
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R725.6

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本文編號:2671822

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