【摘要】：急性下呼吸道感染是兒童呼吸系統(tǒng)常見病,包括支氣管炎、肺炎、支氣管擴張等。其中肺炎是造成兒童尤其是嬰幼兒時期死亡的首要因素,由于抗生素和疫苗應(yīng)用,肺炎患病率死亡率明顯下降,但近年來肺炎死亡率又呈現(xiàn)上升趨勢,傳統(tǒng)的實驗室檢測技術(shù)如細(xì)菌培養(yǎng)等可識別的病原微生物很少,而且檢出病原菌不能完全反映氣道菌群的變化,嚴(yán)重影響了早期對癥治療。肺炎的發(fā)生不僅涉及病原菌定植,氣道內(nèi)菌群失調(diào)同樣發(fā)揮重要作用,16SrDNA序列分析技術(shù)的應(yīng)用使人們對下呼吸道菌群的認(rèn)識進入一個嶄新的階段。但是目前肺部菌群改變與肺炎的關(guān)系仍知之甚少。本課題通過16SrDNA序列分析技術(shù)檢測兒童下呼吸道菌群分布的多樣性。通過檢測肺炎患者咽拭子及肺泡灌洗液樣本,發(fā)現(xiàn)肺炎患者下呼吸道菌群在豐富度及多樣性上明顯高于上呼吸道,但是其菌群豐度明顯低于上呼吸道。細(xì)菌性肺炎與非細(xì)菌性肺炎菌群存在差異的主要菌群為變形菌門嗜血桿菌屬等,KEGG代謝通路檢測分析則發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性肺炎較非細(xì)菌性肺炎存在代謝組學(xué)差異的主要通路是脂肪代謝通路中脂肪酸延長。支氣管哮喘(asthma)是以慢性氣道炎癥、支氣管高反應(yīng)性和可逆性氣道受阻為特點的慢性呼吸道疾病,其具體病因及發(fā)病機理至今尚未完全明確。雖然目前對哮喘發(fā)病機制和治療方式的相關(guān)研宄取得了長足的進步,但世界范圍內(nèi)哮喘發(fā)病率和死亡率仍在不斷上升。哮喘發(fā)病具有一定的家族遺傳性,但復(fù)雜多變的環(huán)境因素對哮喘的影響也不容忽視。環(huán)境因素是誘發(fā)哮喘和哮喘急性發(fā)作的重要危險因素,哮喘環(huán)境觸發(fā)因素主要包括空氣污染物,病原菌及其代謝產(chǎn)物等。研宄發(fā)現(xiàn)哮喘患者相較健康人氣道內(nèi)革蘭陰性菌類的變形菌門顯著增多,并且其中的嗜血桿菌屬與哮喘急性發(fā)作關(guān)系密切。脂多糖(LPS)是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的共同組分,也是革蘭陰性菌主要致病成分。已知氣道LPS暴露水平?jīng)Q定哮喘模型免疫反應(yīng)類型,高濃度的LPS誘導(dǎo)Thl型免疫反應(yīng),低濃度的LPS誘導(dǎo)Th2型免疫反應(yīng),既往認(rèn)為Th2表達(dá)增高造成的Thl/Th2比例失衡是哮喘發(fā)病的主要免疫學(xué)機制,近年來發(fā)現(xiàn)Thn/Treg細(xì)胞比例失衡同樣發(fā)揮著重要作用。本課題通過構(gòu)建經(jīng)典的短期哮喘小鼠模型,在哮喘激發(fā)期給予低劑量的LPS,發(fā)現(xiàn)在LPS的刺激下,哮喘小鼠肺組織出現(xiàn)了明顯的炎癥細(xì)胞浸潤,組織水腫及黏液分泌增多的病理表現(xiàn);實時熒光定量實驗發(fā)現(xiàn),BATF(Thl7轉(zhuǎn)錄因子)和RORA(Thl 7轉(zhuǎn)錄因子)的表達(dá)量在低濃度LPS作用下降明顯。LCL組STAT5(Treg轉(zhuǎn)錄因子)及FoxP3(Treg細(xì)胞因子)表達(dá)量明顯高于哮喘組;ELISA實驗發(fā)現(xiàn),在低濃度LPS作用下IL-17A濃度降低,TGF-p濃度LCL組高于哮喘組。實驗結(jié)果表明,在低濃度LPS的作用下哮喘小鼠ThO細(xì)胞向Treg細(xì)胞分化明顯增多,向Thl7細(xì)胞分化明顯減少。即低濃度LPS作用下Thl7/Treg比例下降,對哮喘免疫反應(yīng)有減輕作用。該課題對于我們更深入理解LPS對哮喘的作用機制以及明確LPS影響下哮喘的臨床表征提供里新思路,從而為LPS緩解哮喘癥狀提供理論依據(jù)以及可能的干預(yù)措施,具有非常重要的意義。
【圖文】：

ｓａｍｐｌｅｓ邋ｔｏ邋ｔｈｅ邋ｔｏｔａｌ邋ｎｕｍｂｅｒ邋ｏｆ邋ｓａｍｐｌｅｓ））．逡逑３．２上下呼吸道菌群及不同類型肺炎氣道菌群總體差異逡逑上下呼吸道菌群及細(xì)菌性肺炎和非細(xì)菌性肺炎氣道菌群相對差異如圖３．２所逡逑示，Ａ圖說明肺炎患者上下呼吸道菌群差異明顯，，細(xì)菌性肺炎和非細(xì)菌性肺炎氣逡逑道菌群差異不顯著；由Ｂ圖可見，在不同肺炎分組上呼吸道菌群豐度均高于下呼逡逑吸道。細(xì)菌性肺炎組上、下呼吸道占比例最高的是厚壁菌門和變形菌門；非細(xì)菌逡逑性肺炎組上呼吸道優(yōu)勢菌群為厚壁菌門和放線菌門，下呼吸道優(yōu)勢菌群厚壁菌門逡逑和柔膜菌門。逡逑８逡逑

ｆｌｏｒａ；邋ｅａｃｈ邋ｃｅｌｌ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｆｉｇｕｒｅ邋ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ邋ａｎ邋ＯＴＵ．）逡逑３．３上下呼吸道菌群多樣性及豐度差異逡逑肺炎患者總體樣本上下呼吸道菌群多樣性差異如圖３．３所示：Ａ圖可見下呼逡逑吸道菌群多樣性及菌群豐富度均高于上呼吸道。Ｂ圖可見上呼吸道主要菌門依次逡逑包括厚壁菌門、放線菌門、變形菌門、擬桿菌門、梭桿菌門等，其中豐度最高的逡逑是厚壁菌門和放線菌門。下呼吸主要菌群包括厚壁菌門、變形菌門、放線菌門、逡逑柔膜菌門、擬桿菌門和藍(lán)藻門等，其中豐度最高的是厚壁菌門和變形菌門。逡逑９逡逑
【學(xué)位授予單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R725.6

【參考文獻】

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1 劉傳合;洪建國;尚云曉;孫王君;多力坤·木扎帕爾;扇敏娜;高云;任筱

本文編號：2671146