【摘要】：目的:觀察新生兒臍帶血CD4~+CD25~+CD127~(low/-)調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)頻數(shù)變化,探討Treg與HBeAg的關系。 方法:將63例HBsAg陽性產(chǎn)婦分娩的新生兒臍帶血按產(chǎn)婦產(chǎn)前HBeAg狀態(tài)分為HBeAg陽性組(33例)和HBeAg陰性組(30例),并以HBsAg陰性產(chǎn)婦為正常對照組(22例)。均在產(chǎn)婦分娩時臍帶與新生兒離斷及胎盤剝離后用一次性無菌注射器抽取臍帶血。用紅細胞裂解法獲得臍帶血單個核細胞(CBMCs),Treg用CD4~+CD25~+CD127low/-流式抗體標記,髓樣樹突狀細胞(mDC)用lineage-HLADR~+ CD11c~+流式抗體標記,漿細胞樣樹突細胞(pDC)用lineage-HLADR~+CD123~+流式抗體標記, CD4~+效應T細胞用CD3~+CD4~+流式抗體標記,CD8~+效應T細胞用CD3~+CD8~+流式抗體標記。利用三色流式分析法對三組研究對象CBMCs中的Treg、mDC、pDC、CD4~+/CD8~+效應T細胞百分比進行分析。并對三組研究對象產(chǎn)婦及其臍帶血中的HBV血清標志物和HBVDNA水平進行檢測。 結果:HBeAg陽性組中有72.7%(24/33)新生兒臍帶血HBeAg陽性,而HBeAg陰性組臍帶血中HBeAg均為陰性,所有HBsAg陽性產(chǎn)婦新生兒臍帶血HBVDNA均為陰性。HBeAg陽性組、HBeAg陰性組及健康對照組新生兒臍帶血中Treg的比例分別為(7.02±1.46)%、(6.24±1.36)%、(6.01±0.82)%,與健康對照組和HBeAg陰性組相比較,HBeAg陽性組新生兒臍帶血中的Treg百分比明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而HBeAg陰性組和健康對照組之間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。三組中mDC的比例分別為(2.24±0.22)%、(2.45±0.32)%、(1.94±0.24)%,pDC的比例分別為(1.67±0.99)%、(1.64±0.63)%、(1.22±0.67)%,CD4+效應T細胞的比例分別為(71.37±9.63)%、(74.57±9.67)%、(71.38±10.9)%,CD8+效應T細胞的比例分別為(24.04±9.47)%、(21.5±6.83)%、(22.62±11.5)%,CD4+/CD8+效應T細胞的比值分別為(3.68±0.22)、(4.05±0.2)、(4.22±0.34)。三組中mDC,pDC,CD4~+/CD8~+效應性T細胞百分比及CD4+/CD8+效應T細胞的比值差異均沒有統(tǒng)計學意義(P0.05)。HBeAg陽性組臍帶血Treg百分比與產(chǎn)婦HBVDNA水平無關(r=-0.171,P0.05)。 結論:HBeAg可以通過胎盤到達胎兒體內(nèi),可能通過上調(diào)Treg的頻數(shù)導致新生兒出生后HBV的持續(xù)性感染。 目的:探討核苷(酸)類似物治療48周時的慢性乙型肝炎患者ALT不能復常的原因。 方法:選取2006年1月～2008年8月重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院門診及住院收治的核苷(酸)類似物治療至少48周的慢性乙型肝炎患者,部分患者在基線及48周時進行了肝組織學活檢。根據(jù)治療48周時的ALT水平分為ALT復常組和ALT未復常組。ALT復常定義為治療48周后連續(xù)隨訪6個月每次間隔大于2個月ALT值小于或等于正常范圍值上限。ALT未復常定義為治療48周后連續(xù)隨訪6個月每次間隔大于2個月ALT值均高于正常范圍值上限。病毒學突破定義為持續(xù)抗病毒治療過程中獲得病毒學應答后,血清HBVDNA水平較最低點上升1 log10拷貝/ml,且須經(jīng)間隔1個月連續(xù)2次檢測證實。治療48周后進一步對治療48周時HBVDNA轉陰的患者根據(jù)其ALT水平再分為HBVDNA陰性ALT復常組和HBVDNA陰性ALT未復常組。HBVDNA陰性定義為HBVDNA(PCR法)小于10~3拷貝/ml至少持續(xù)6個月。分別比較各組患者的基線及48周時的人口統(tǒng)計學、病毒學、肝組織學等指標。并用logistic回歸分析核苷(酸)類似物治療48周時影響ALT復常的因素。 結果: 1、所有患者ALT復常的影響因素分析共有371例患者入選,替比夫定治療17例,阿德福韋酯226例,恩替卡韋128例。其中男性占78.7%;HBeAg陽性占75.2%;平均年齡(31.3±8.3)歲;基線平均BMI(21.8±2.8)kg/m~2,平均ALT(136.7±86.3)U/L,平均HBVDNA(7.4±2.1)log10拷貝/ml。平均炎癥程度2(0-4),平均纖維化程度2(0-4)。 ALT復常組264例,ALT未復常組107例。兩組男性比例分別為73.1%和92.5%,年齡分別為(32.1±8.1)歲和(31.4±8.2)歲,基線BMI分別為(21.8±2.9)kg/m2和(23.2±3.4)kg/m~2,基線ALT分別為(147.3±85.1)U/L和(129.6±82.1)U/L,基線HBVDNA水平分別為(7.6±1.4)log10拷貝/ml和(7.7±1.4)log10拷貝/ml,基線HBeAg陽性率分別為74.6%和76.6%。177例患者在基線時接受了肝組織學活檢,兩組肝臟炎癥纖維化計分平均值均為2(0-4),G0-2比例分別為74.8%和76.3%,G3-4比例分別為25.2%和23.7%,S0-2比例分別為69.8%和76.3%,S3-4比例分別為30.2%和23.7%,脂變率分別為16.5%和18.4%。 治療48周時HBVDNA陽性率分別為35.2%和58.9%,病毒學突破率分別為0.76%和11.2%,HBeAg血清學轉換/轉陰率分別為21.8%和11%。62例患者在治療48周時接受了第二次肝組織學活檢,兩組肝臟炎癥纖維化計分平均值均為2(0-4),G0-2比例分別為88.7%和88.9%,G3-4比例分別為11.3%和11.1%,S0-2比例分別為83%和77.8%,S3-4比例分別為17%和22.2%,脂變率分別為17%和55.6%。 HBeAg陽性患者接受阿德福韋酯及恩替卡韋治療ALT復常率分別為66%和79.4%,HBeAg陰性患者接受阿德福韋酯及恩替卡韋治療ALT復常率分別為78.1%和61.5%。 單因素分析顯示ALT復常組的男性比例、基線時BMI及治療48周時的HBVDNA陽性率、病毒學突破率、肝臟脂肪變性率均低于ALT未復常組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。治療48周時的HBeAg血清學轉換/轉陰率,肝臟炎癥改善程度均高于ALT未復常組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。兩組患者的年齡,基線時的ALT,HBVDNA水平、HBeAg陽性率、肝臟炎癥纖維化分布、脂變率及治療48周時肝臟炎癥纖維化分布差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。HBeAg陽性患者中接受恩替卡韋治療的患者ALT復常率高于接受阿德福韋酯治療的患者,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而兩種藥物治療的HBeAg陰性患者ALT復常率差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 logistic回歸分析顯示男性,基線時BMI≥23 kg/m~2及治療48周時HBVDNA≥10~5拷貝/ml、病毒學突破、肝臟脂肪變性是治療48周時ALT未復常的獨立危險因素,而HBeAg血清學轉換/轉陰和HBVDNA下降≥4log_(10)拷貝/ml是ALT復常的保護性因素。對于基線時HBeAg陽性的患者,與恩替卡韋相比選用阿德福韋酯是ALT未復常的危險因素。 2、治療48周時HBVDNA轉陰患者ALT復常的影響因素分析 215例患者治療48周后HBVDNA轉陰,替比夫定治療8例,阿德福韋酯98例,恩替卡韋109例,其中男性占77.2%;HBeAg陽性占58.6%;平均年齡(33.5±8.4)歲;基線平均BMI(22.8±3)kg/m~2,平均ALT(156±90.3)U/L,平均HBVDN(7.4±1.3)log_(10)拷貝/ml。平均炎癥程度2(0-4),平均纖維化程度2(0-4)。 ALT復常組171例,ALT未復常組44例。兩組的男性比例分別為72.5%和95.5%,年齡分別為(34±8.6)歲和(33±8.5)歲,基線時BMI分別為(22±2.9) kg/m~2和(23.6±3.1) kg/m~2,ALT分別為(152.2±88.2)U/L和(163±102)U/L,HBVDNA水平分別為(7.4±1.5)log_(10)拷貝/ml和(7.4±1.2)log_(10)拷貝/ml,HBeAg陽性率分別為58.8%和59.1%。110例患者在基線時接受了肝組織學活檢,兩組肝臟炎癥纖維化計分平均值均為2(0-4),G0-2比例分別為71.8%和80%,G3-4比例分別為28.2%和20%,S0-2比例分別為65.9%和76%,S3-4比例分別為34.1%和24%,脂變率分別為17.6%和28%。 治療48周時的HBeAg血清學轉換/轉陰率分別為31%和26.9%。39例患者在治療48周時接受了第二次肝組織學活檢,兩組肝臟炎癥纖維化計分平均值均為2(0-4),G0-2比例分別為82.4%和80%,G3-4比例分別為17.6%和20%,S0-2比例分別為79.4%和80%,S3-4比例分別為20.6%和20%,脂變率分別為14.7%和60%。 HBeAg陽性患者接受阿德福韋酯及恩替卡韋治療ALT復常率分別為82.5%和78.3%。HBeAg陰性患者接受阿德福韋酯及恩替卡韋治療ALT復常率分別為89.7%和61.5%。 單因素分析顯示HBVDNA陰性ALT復常組的男性比例、基線時BMI及48周時的肝臟脂肪變性率均低于ALT未復常組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而兩組患者年齡、基線ALT、HBVDNA水平、HBeAg陽性率、肝臟炎癥纖維化分布及脂變率,48周時HBeAg血清學轉換/轉陰率及肝臟炎癥纖維化分布及改善情況差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。對于治療48周時HBVDNA轉陰的HBeAg陰性患者接受阿德福韋酯治療的ALT復常率高于接受恩替卡韋治療的患者,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而HBeAg陽性患者接受上述兩種藥物治療的ALT復常率差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 logistic回歸分析顯示男性、基線時BMI≥23 kg/m~2和治療48周時肝臟脂肪變性是HBV轉陰后ALT未復常的獨立危險因素,在該部分HBeAg陰性的患者中,與恩替卡韋比選用阿德福韋酯治療是ALT復常的保護性因素。 結論:男性、基線時超重及治療48周后HBVDNA≥10~5拷貝/ml,HBVDNA下降值小于4log_(10)拷貝/ml,HBeAg持續(xù)陽性和48周時肝臟脂肪變性及肝臟炎癥程度未得到明顯改善都是慢性乙型肝炎患者接受核苷(酸)類似物治療48周時ALT不能復常的重要原因。
【圖文】：

均為陰性；所有 HBsAg 陽性產(chǎn)婦新生兒臍帶血 HBVDNA 均為陰性。上述結果提示 HBeAg 可以通過胎盤到達新生兒體內(nèi)(P<0.05)。（見表 1）我們對 33 例 HBeA陽性產(chǎn)婦中的 12 例和所有的新生兒臍帶血進行了 HBeAg 定量檢測，，HBeAg 陽性產(chǎn)婦外周血 HBeAg 含量與其新生兒臍帶血中的 HBeAg 含量無相關性（r=-0.038P>0.05）。見圖 1表 1 產(chǎn)婦外周血 HBeAg 與新生兒臍帶血 HBeAg 的關系 產(chǎn)婦HBeAg臍帶血HBeAg+- 合計+24 9 33- 0 30 30合計 24 39 63χ2值 7.11*P 0.004**采用配對卡方檢驗

C D圖 2 DC 亞群檢測設門策略及細胞比例Figure2 The gating of dendritic cells population and its proportion
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R512.62;R714.2

【參考文獻】

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本文編號：2663180