發(fā)布時(shí)間：2020-05-09 13:54

【摘要】： 目的 建立窒息新生大鼠動(dòng)物模型,比較純氧與空氣復(fù)蘇對(duì)窒息新生大鼠腎組織超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞凋亡的影響,為臨床選擇使用純氧或空氣復(fù)蘇提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成3組,分別為純氧復(fù)蘇組(PO,n=10),空氣復(fù)蘇組(RA,n=10)正常對(duì)照組(N,n=10)。每組分為兩個(gè)亞組,(n=5):復(fù)蘇后24h組(PO24h、RA24h、N24h)及復(fù)蘇后72h組(PO72h、RA72h、N72h)。 建立新生大鼠缺氧模型,按實(shí)驗(yàn)分組給予純氧和空氣復(fù)蘇30min,建立復(fù)氧模型。分別于復(fù)蘇后24h及72h斷頸處死乳鼠,取雙側(cè)腎臟。按照光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡標(biāo)本制作要求分別固定。通過(guò)HE染色、免疫組織化學(xué)技術(shù)測(cè)定細(xì)胞調(diào)亡相關(guān)酶的表達(dá)及原位末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)確認(rèn)調(diào)亡細(xì)胞,運(yùn)用圖象分析技術(shù)檢測(cè)各組的陽(yáng)性單位PU值和調(diào)亡指數(shù)。運(yùn)用透射電子顯微鏡觀察腎近端小管及遠(yuǎn)端小管上皮細(xì)胞及腎小球超微結(jié)構(gòu)的改變。 結(jié)果 PO及RA組的腎組織HE染色均可觀察到腎近端和遠(yuǎn)端小管上皮水腫,管腔變小,未見(jiàn)出血壞死,腎小球結(jié)構(gòu)清楚,未見(jiàn)受損,以上病理變化72h組均較24h組明顯減輕,PO組與RA組之間未見(jiàn)明顯差別。電子顯微鏡觀察顯示PO組腎組織線粒體腫脹,空泡化,嵴斷裂程度均較相應(yīng)RA組嚴(yán)重,以24h組明顯。PO及RA72h組的腎組織線粒體腫脹,空泡化,嵴斷裂等病變均比相應(yīng)的24h組減輕。PO組Caspase-3在腎組織的表達(dá)高于RA組(P＜0.01),復(fù)蘇后24h組Caspase-3在腎組織的表達(dá)高于相應(yīng)72h組(P＜0.01)。TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒檢測(cè)凋亡細(xì)胞RA組的凋亡指數(shù)低于PO組(P＜0.01),相應(yīng)24h組與72h組均無(wú)差異(P＞0.05) 結(jié)論 電鏡觀察發(fā)現(xiàn)PO組腎小管上皮細(xì)胞線粒體病變比RA組更為嚴(yán)重,提示純氧復(fù)蘇比空氣復(fù)蘇造成較嚴(yán)重的氧化應(yīng)激損傷。 和RA組相比,PO組凋亡相關(guān)酶Caspase-3表達(dá)增高,TUNEL檢測(cè)凋亡指數(shù)升高。提示,氧化應(yīng)激可能通過(guò)細(xì)胞凋亡造成更多的組織損傷。 本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)PO及RA72h組的腎小管上皮細(xì)胞線粒體腫脹,空泡化,嵴斷裂等病變均比相應(yīng)的24h組減輕,提示,線粒體具有自身修復(fù)能力。
【圖文】：

表1復(fù)蘇對(duì)窒息新生大鼠腎小管上皮細(xì)胞casPase-3表達(dá)Pu值的影響(x士s)Tab.1InfiueneeofresuscitationonthePositiveunitofcasPase-3exPressioninrenaltubularePithelialcellsofasPhy對(duì)alneonatalrats(x士s)24h72hPO8.76士1.415.08士0.77RA5.86士0.814.17士0.84N2.82士0.592.98士0.63

表2復(fù)蘇對(duì)窒息新生大鼠腎小管上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)的影響(x士s)Tab.2InfluenceofrcsuseitationontheaPoPtotieindexofrcnaltUbularePithelialcellsofasPhyxialneonatalrats(x士s)24h72h5.85%士1.73%5.79%士1.67%1.20%士0.42%0.90%士0.22%0.58%士0.32%0.42%士0，41%
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R722.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2656240