【摘要】：第一部分不同類型罕見重癥聯(lián)合免疫缺陷病的產(chǎn)前診斷分析目的:探討不同類型罕見重癥聯(lián)合免疫缺陷病(severe combined immunodeficiency disease,SCID)的產(chǎn)前診斷方法及結(jié)果分析。方法:以重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院2016至2017年進(jìn)行產(chǎn)前診斷的4個(gè)家系5例高危兒為研究對(duì)象,回顧性分析進(jìn)行羊水脫落細(xì)胞、臍帶血基因檢測(cè)及出生后基因復(fù)核的過(guò)程,并通過(guò)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞亞群分析、TCRVβ亞家族克隆譜、TREC及T淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行免疫學(xué)功能評(píng)估。結(jié)果:(1)4個(gè)家系分別為IL-2RG(家系1:c.562CT,p.Q188X;家系2:c.725GA、p.W237X)、RAG1(家系3:c.2168CT,p.A723V;c.2275CT,p.R759C;c.3020AG,p.N1007S)和IL-7Rα(家系4:IVS4+1GA;c.638CT,p.R206X)基因突變,父母一方或雙方為攜帶者;(2)經(jīng)過(guò)羊水脫落細(xì)胞檢測(cè),5例高危兒中3例為正�；蛐�,1例為攜帶者,1例為缺陷患兒;(3)3例正常基因型高危兒出生后現(xiàn)均體健,1例攜帶者進(jìn)一步行臍帶血檢查、生后基因復(fù)核,以及免疫學(xué)功能評(píng)估,均提示正常,與羊水脫落細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果一致。結(jié)論:羊水脫落細(xì)胞檢測(cè)在SCID的產(chǎn)前診斷中準(zhǔn)確性較高,但當(dāng)先證者為復(fù)合雜合突變時(shí),我們?cè)趯?duì)高危兒進(jìn)行羊水檢測(cè)后額外進(jìn)行了臍帶血檢測(cè)以除外羊水中母體組織細(xì)胞污染。X連鎖疾病可同時(shí)行性別篩查協(xié)助基因檢測(cè)。所有高危兒在出生后均應(yīng)行基因復(fù)核及免疫學(xué)功能評(píng)估,以驗(yàn)證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。第二部分ZAP70缺陷病的臨床、免疫學(xué)特征及基因突變分析目的:詳細(xì)描述了中國(guó)首例ZAP70缺陷的新型復(fù)合雜合突變,擴(kuò)展了ZAP70缺陷病的表型譜。方法:該患兒是一名7個(gè)月大男孩,于2016年6月在重慶醫(yī)科大學(xué)兒童醫(yī)院住院治療。我們對(duì)其外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)進(jìn)行了采集,并對(duì)淋巴細(xì)胞的亞群進(jìn)行分析,同時(shí)對(duì)淋巴細(xì)胞進(jìn)行免疫學(xué)功能學(xué)評(píng)估。結(jié)果:該患兒有早發(fā)及反復(fù)的感染,但其生長(zhǎng)發(fā)育正常,故提示為不典型重癥聯(lián)合免疫缺陷病。同時(shí)該患兒具有自身免疫性疾病系列表現(xiàn),包括濕疹樣皮疹、炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Disease,IBD)及難治性腹瀉,提示T細(xì)胞免疫耐受功能受損。免疫學(xué)分析結(jié)果提示患兒外周血CD8+T細(xì)胞選擇性缺失,CD4+T細(xì)胞對(duì)PHA刺激及CD19+B細(xì)胞對(duì)PWM刺激均無(wú)反應(yīng)。CD4+T細(xì)胞亞群分析顯示,患兒的濾泡輔助性T細(xì)胞(Tfh)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)水平均低于正常對(duì)照。對(duì)患兒進(jìn)行基因及蛋白表達(dá)分析,發(fā)現(xiàn)ZAP70基因新型復(fù)合雜合突變(c.598-599del CT,p.L200fs X28;c.847CT,p.R283X),ZAP70蛋白檢測(cè)提示表達(dá)量較正常對(duì)照明顯減少。結(jié)論:本文從臨床和免疫學(xué)的角度分析了中國(guó)首例ZAP70新型復(fù)合雜合突變患兒的臨床和免疫學(xué)特征。臨床表現(xiàn)為早發(fā)嚴(yán)重感染合并嚴(yán)重的自身免疫性疾病或過(guò)度炎癥的嬰兒,免疫表型為選擇性CD8缺乏,應(yīng)進(jìn)行ZAP70缺陷病的篩查。
【圖文】：

圖 1.1 4 個(gè) SCID 家系圖譜Figure 1.1 Family trees of four families2.2 高危兒基因檢測(cè)結(jié)果2.2.1 羊水脫落細(xì)胞基因分析高危兒 1 來(lái)自家系 1，高危兒 2 和高危兒 3 來(lái)自家系 2，高危兒 4 來(lái)自家系 3，高危兒 5 來(lái)自家系 4，如圖 1.2 所示，4 例高危孕婦羊水脫落細(xì)胞分析為高危兒 1、高危兒 2 和高危兒 3 為正�；蛐吞海呶� 4 為缺陷胎兒，與其先證者基因型完全相同，高危兒 5 為正常攜帶胎兒。缺陷胎兒基因診斷結(jié)果均經(jīng)雙向重復(fù)測(cè)序 2 次以上。

22圖 1.2 5 例高危兒基因診斷結(jié)果圖 A 為高危兒 1、2、3、4 羊水脫落細(xì)胞基因結(jié)果，高危兒 1、高危兒 2 及高危兒 3 均提示 IL-2RG 相應(yīng)位點(diǎn)無(wú)突變，，高危兒 4 提示 RAG1 基因 3 個(gè)位點(diǎn)突變（1（）2）（3），與先證者完全相同；圖 B 為家系 4 父母 IL-7Rα相應(yīng)位點(diǎn)基因測(cè)序及高危兒 5 羊水脫落細(xì)胞、臍帶血和出生后全血基因結(jié)果，提示其為雜合攜帶者，僅攜帶母親來(lái)源致病位點(diǎn)Figure 1.2 The sequencing figures of five high-risk fetus2.3 免疫學(xué)功能評(píng)估2.3.1 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及淋巴細(xì)胞亞群分析
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R725.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2645803