【摘要】：錐干部畸形是常見的復(fù)雜性先天性心臟病(先心病),是導(dǎo)致兒童死亡的主要原因之一。近端流出道對(duì)錐干部的發(fā)育起著至關(guān)重要的作用。近端流出道隔是指半月瓣水平及瓣下的流出道分隔,此隔起初是由心內(nèi)膜嵴形成的一個(gè)間充質(zhì)形式的墊組織。在心臟發(fā)育過程中,近端流出道隔的間質(zhì)成分被心肌成分取代,此過程稱為“心肌化”。心肌化過程是流出道發(fā)育過程中的一個(gè)重要事件,心肌化障礙可導(dǎo)致流出道的結(jié)構(gòu)和功能異常,因此闡明流出道隔心肌化的形成過程將有助于進(jìn)一步揭示流出道畸形的發(fā)病機(jī)制。一些參與或影響心肌化過程的可能的細(xì)胞和分子機(jī)制被相繼提出,其中心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞、細(xì)胞凋亡和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(transforming growth factor, TGF)β2逐漸引起人們的注意。近年來人們還發(fā)現(xiàn)間隙連接蛋白(Conecxin, Cx)43與胚胎心臟錐干部的發(fā)育密切相關(guān)。Cx43缺失和過表達(dá)模型均顯示了右室流出道畸形和梗阻,并且心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞可能參與了其發(fā)病機(jī)制。因此,本課題利用Cx43基因敲除(knockout, KO)小鼠模型,旨在研究Cx43在心肌化過程中的作用及其可能的機(jī)制;進(jìn)一步揭示Cx43KO小鼠錐干部畸形的發(fā)病機(jī)制。 第一部分 正常小鼠心臟流出道隔的心肌化過程研究 研究目的 探討心臟近端流出道隔心肌化過程的時(shí)空規(guī)律以及心臟神經(jīng)嵴細(xì)胞、細(xì)胞凋亡在這一過程中的可能作用。 材料與方法 成年2月齡C57/BL6小鼠交配,選用胎齡(embryonic day, E)11.5天(day, d)至出生后1d小鼠為研究對(duì)象。采用免疫組化法測(cè)定橫紋肌肌動(dòng)蛋白α-SCA(α-Sarcomeric Actin),神經(jīng)嵴細(xì)胞的標(biāo)志物AP-2α(Activator protein-2a),凋亡相關(guān)分子Active Caspase-3的表達(dá);采用TUNEL(terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dUTP nick end labeling)法原位檢測(cè)細(xì)胞的凋亡程度。
【圖文】：

以上結(jié)果可以看出:近端流出道心內(nèi)膜墊于Ell.5開始融合，E13.5完成融合;心肌化從E12.5開始，至E15.5完成。整個(gè)心肌化過程呈現(xiàn)心肌從流出道隔由外向內(nèi)的內(nèi)向性生長(zhǎng)趨勢(shì)。(圖1一)l二、近端流出道隔AP一Za的表達(dá)Ell.5幾乎無(wú)AP一2a表達(dá);E12.5、E13.5可見少量表達(dá)，分別位于近端流出道心內(nèi)膜墊近融合處及散在于側(cè)翼心肌內(nèi);E1.45以后消失。(圖1一2)三、近端流出道隔AcvtieCaspas-e3的表達(dá)ActiveCaspase一3陽(yáng)性細(xì)胞集中出現(xiàn)在E12.5和E13.5的近端流出道隔，尤其以E13.5為著。E15.5以后極少出現(xiàn)。因此近端流出道隔的凋亡主要發(fā)生于E13.5。(圖l一3)四、Tt」NEL法檢測(cè)近端流出道隔細(xì)胞凋亡E12.5和E13.5近端流出道心內(nèi)膜墊近融合處散在多量凋亡細(xì)胞，以E13.5為著。E巧.5以后極少。與ActiveCasPaes一3檢測(cè)凋亡的結(jié)果相吻合。(圖1一4)

汗第一部分圖:圖1一1近端流出道隔。一CA的表達(dá)注:A為心臟冠狀面，，日一F為橫斷面。近端流出道心內(nèi)膜墊組織于Ell.5(A)開始有融合趨勢(shì)，E，3.5(C)基本完成融合;從E，2.5(B)開始，。一SCA陽(yáng)性細(xì)胞表現(xiàn)出從近端流出道隔外側(cè)向間質(zhì)性心內(nèi)膜墊內(nèi)生長(zhǎng)趨勢(shì)，E，.35及E14.5(O
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R725.4

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 孟凡星;Cx43在妊娠糖尿病新生鼠心臟中的表達(dá)及意義[D];暨南大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2644044