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PVL新生大鼠腦組織P75NTR蛋白R(shí)hoAmRNA表達(dá)及意義

發(fā)布時(shí)間:2020-04-19 05:32
【摘要】:目的:建立新生大鼠PVL模型,了解新生大鼠PVL病理學(xué)改變及對(duì)神經(jīng)行為學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)。 方法:1.將新生2日齡SD大鼠98只隨機(jī)分為假手術(shù)組和PVL模型組。假手術(shù)組僅進(jìn)行右側(cè)頸總動(dòng)脈分離術(shù)而不作結(jié)扎及缺氧處理。PVL模型組大鼠行右側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎后吸入含6%氧氣和94%氮?dú)獾难醯旌蠚怏w,處理4小時(shí),建立新生大鼠PVL模型。 2.形態(tài)學(xué)觀察:兩組均在12h、24h、48h、72h、7d、14d、28d處死動(dòng)物,取腦組織切片。HE染色觀察病理改變,電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)。 3.正常飼養(yǎng)至一月后,在感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能及情感行為能力等方面作神經(jīng)行為學(xué)評(píng)價(jià)和生長(zhǎng)發(fā)育評(píng)估。 結(jié)果:1.腦組織HE染色光鏡觀察:假手術(shù)組細(xì)胞排列有序、胞核大、胞漿少、左右側(cè)腦室對(duì)稱。PVL組缺氧缺血后12h即見(jiàn)紋狀體內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞水腫;48小時(shí)出現(xiàn)核固縮、胼胝體細(xì)胞稀疏、排列紊亂;72h可見(jiàn)側(cè)腦室旁白質(zhì)呈篩網(wǎng)狀壞死;14天可見(jiàn)胼胝體變薄、腦室擴(kuò)大、皮質(zhì)下白質(zhì)空囊形成。 2.腦組織電鏡觀察:假手術(shù)組少突膠質(zhì)細(xì)胞染色質(zhì)分布均勻、核不規(guī)則、核仁明顯、胞漿少、線粒體形態(tài)規(guī)則。缺氧缺血后12小時(shí)即見(jiàn)膠質(zhì)細(xì)胞線粒體明顯改變;48小時(shí)可見(jiàn)膠質(zhì)細(xì)胞洞亡;72小時(shí)可見(jiàn)膠質(zhì)細(xì)胞壞死;28天可見(jiàn)髓鞘稀疏、形成不良。 3.生長(zhǎng)發(fā)育觀察:28天大鼠體重,假手術(shù)組為115.78±6.34g,PVL
【圖文】:

頸總動(dòng)脈


圖1。.22常規(guī)消毒鋪巾,頸部正中偏右作長(zhǎng)約Imc切口,圖2。.23分離并用5一0絲線雙結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈,圖3、4。.24縫合切口。.25返回常氧母鼠籠中休息1小時(shí),然后置于含6%氧氣和94氮?dú)饣旌蠚獾娜毖跖撝?小時(shí)(流量ZUmin),再放回常氧母鼠籠中飼養(yǎng)。.26假手術(shù)組:僅作頸部切口分離右側(cè)頸總動(dòng)脈,不結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈,縫合皮膚,不進(jìn)行缺氧處理。整個(gè)操作過(guò)程中,保持周?chē)h(huán)境溫度為30℃以上。第n頁(yè)

雙結(jié),頸總動(dòng)脈


圖3分離右側(cè)頸總動(dòng)脈圖4雙結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈.標(biāo)本處理3.1灌注:兩組大鼠經(jīng)過(guò)量乙醚麻醉后,剪開(kāi)胸腔暴露心臟,經(jīng)灌注肝素化生理鹽水20ml,,待流出液清亮后用4%多聚甲醛BPS(0.mlo比,HP.74)灌注直至肝臟明顯變白,肺臟明顯水腫,四肢完直后立即斷頭取全腦。.3.2固定:美藍(lán)標(biāo)記前自位置,置于4%多聚甲醛PBS液(0.lmo譏H.74),電鏡標(biāo)本置于2.5%戊二醛中固定7h2以上,標(biāo)本備用。3.3取材:根據(jù)大鼠腦立體定位圖譜9]l,將固定的鼠腦從前囪后以叉為中心,前后2一6nnIl做腦組織冠狀切面,切片備用。電鏡標(biāo)本側(cè)側(cè)腦室旁組織。
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號(hào)】:R722.1

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