支氣管哮喘患兒誘導(dǎo)痰液中P物質(zhì)及炎性細(xì)胞變化的臨床研究
發(fā)布時間:2020-04-05 01:09
【摘要】: 前言 支氣管哮喘是多種炎癥細(xì)胞和炎癥因子共同參與的氣道慢性炎癥,該炎癥使易感者對多種激發(fā)因子具有氣道高反應(yīng)性。隨著對氣道炎癥研究的深入,由肺內(nèi)感覺神經(jīng)末梢釋放的感覺神經(jīng)肽所介導(dǎo)的氣道神經(jīng)源性炎癥日益受到重視。P物質(zhì)(SP)是感覺神經(jīng)肽中重要的一種,它具有收縮氣道平滑肌、促進(jìn)血漿外滲、促進(jìn)粘液高分泌、促進(jìn)炎癥介質(zhì)釋放及增加氣道高反應(yīng)性等方面的作用,所以認(rèn)為SP與哮喘關(guān)系密切。誘導(dǎo)痰技術(shù)是近年開展的,具有安全、有效、無創(chuàng)、重復(fù)性好、可靠性高等優(yōu)點(diǎn),且誘導(dǎo)痰中炎性細(xì)胞、炎性介質(zhì)等檢測明顯優(yōu)于血液及在小兒難于開展且創(chuàng)傷性較大的支氣管肺泡灌洗液(BALF),為此我們進(jìn)行了哮喘患兒誘導(dǎo)痰中SP變化的檢測。 對象與方法 1.臨床資料: 急性發(fā)作期(中重度)患兒入院前3天均無靜脈或口服激素史。急性發(fā)作期病例數(shù)34人,男18人,女16人,平均年齡7.1歲(4~14歲);緩解期30人,男18人,女12人,平均年齡6.8歲(4~14歲),兩組年齡無明顯差異。正常對照組18人,男10人,女8人,平均年齡7.0歲(4.5~12歲),既往無毛細(xì)支氣管炎或喘息性支氣管炎病史,無哮喘病史及家族史的健康兒童,1個月內(nèi)無呼吸道感染史。 2.室驗(yàn)方法: *)痰液的采集:哮喘急性發(fā)作期、緩解期、正常對照組兒重,各 采集誘導(dǎo)痰液一次。誘導(dǎo)痰液參照Pin等方法采集,分別用3%、 4%5%的生理鹽水超聲霧化吸人,每次約7分鐘,累計(jì)霧化時間 不超過30分鐘,有痰時可隨時咳出到一清潔平M中。選合格痰約 為*5毫升。取其中Ind痰標(biāo)本加人含有10%EDTA50gl、抑肽酶 8皿U中的預(yù)冷試管中,-70℃保存待用。再選痰液約0.5 Inl用中 國醫(yī)科大學(xué)生產(chǎn)的痰液蓄積保護(hù)液處理混均、離心,1900轉(zhuǎn)/分約 10分鐘,選細(xì)胞沉淀層涂片進(jìn)行HE染色。 ②痰液的處理:痰標(biāo)本用 4%醋酸稀釋至 20Inl,用勻漿儀攪 勻,40000 x g離心 30ndn,取上清液過* 柱,分別用 4%醋酸 10Inl,蒸餾水 10Inl沖洗,最后再用 Zrnl,0.豆%三氟醋酸(內(nèi)含 80% 乙睛)沖洗并收集沖洗液,真空冷凍抽干至粉末,-70℃存放。 ③巋P檢測:進(jìn)行放免測定時,將提存物用 0.3 Inl分析純緩沖 液O0nM磷酸緩沖液,PH7.人含3.7mg/Inl的EDTA,0.5%牛血 清白蛋白)復(fù)溶后,取0.ZInl進(jìn)行放免檢測,參照放免說明書步驟 進(jìn)行檢測。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 實(shí)驗(yàn)結(jié)果均用均值。標(biāo)準(zhǔn)差k。S)來表示,均數(shù)間比用t檢 驗(yàn)。 結(jié) 果 二.哮喘患兒急性發(fā)作期、緩解期及正常對照組支氣管誘導(dǎo)痰 中細(xì)胞計(jì)數(shù)變化。 哮喘患兒急性發(fā)作期痰中性粒細(xì)胞占總數(shù)的百分比較緩解 期、正常對照組,明顯增高,差異顯著f均<認(rèn)0*哮喘急性發(fā)作 期、緩解期支氣管誘導(dǎo)痰嗜酸粒細(xì)胞占總數(shù)的百分比較正常對照 組的,明顯增高,差異顯著J均<0.01。 ·2· 2.哮喘急性發(fā)作期、緩解期及正常對照組間支氣管誘導(dǎo)痰SP 含量的變化。 哮喘急性發(fā)作期支氣管誘導(dǎo)痰SP含量明顯高于緩解期及正 常對照組,差異顯著人均<0刀1;緩解期組與正常對照組比較,差 異無顯著性,P>O.05。 討 論 HSP與小兒哮喘的研究: 1感覺神經(jīng)肽與哮喘: 支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜,隨著對氣道炎癥研究的深人,由 肺內(nèi)感覺神經(jīng)末梢釋放的神經(jīng)肽所介導(dǎo)的氣道炎癥反應(yīng)即神經(jīng)源 性炎癥日益受到重視,為研究哮喘的發(fā)病機(jī)制開辟了一個新的途 徑。 氣道的神經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)較復(fù)雜,除了經(jīng)典的膽堿能和腎上腺素 能神經(jīng)系統(tǒng)外,還包括非腎上腺素能A膽堿能(NANC)神經(jīng)系 統(tǒng)。NANC神經(jīng)系統(tǒng)包括非腎上腺素能抑制神經(jīng)和非膽堿能興奮 性神經(jīng),感覺神經(jīng)肽是非膽堿能興奮性神經(jīng)的重要遞質(zhì)/P是其 中重要一種。SP等感覺神經(jīng)肽是當(dāng)該神經(jīng)末梢受到物理、化學(xué)等 因素刺激時,通過軸突反射機(jī)制釋放的。軸突反射機(jī)制是B。es 在1986年首次提出的,即當(dāng)氣道上皮損傷時,暴露出傳人神經(jīng)末 梢,經(jīng)氣道內(nèi)炎癥介質(zhì)刺激,可以選擇性刺激因損傷而暴露的C一 纖維神經(jīng)末梢,通過軸突反射,從感覺神經(jīng)的側(cè)突分枝釋放SP等 感覺神經(jīng)肽,從而在氣道內(nèi)發(fā)揮其生物活性,導(dǎo)致支氣管收縮、增 加氣道粘膜滲出、促進(jìn)粘液高分泌及促進(jìn)細(xì)胞因子、炎性介于釋放 等方面,產(chǎn)生一系列的哮喘病理特征。SP是具有眾多生物活性的 11肽在P及其受體廣泛分布于呼吸道及肺內(nèi)氣道上皮、血管內(nèi)皮 及腺體周圍。InlllD等研究顯示人和動物的氣道內(nèi)均存在有SP ·3· 免疫活性的感覺神經(jīng)通路,,并從上皮至動脈是一條連續(xù)的通路。 2石P在小兒哮喘中的作用: SP主要通過引起氣道平滑肌收縮、增加血漿外滲
【圖文】:
發(fā)作期、緩解期及正常對照組間支氣管誘導(dǎo)痰中SP含量討論小兒哮喘的研究:經(jīng)膚與哮喘:喘是由多種細(xì)胞和細(xì)胞組份共同參與的氣道慢制較復(fù)雜。隨著對氣道炎癥研究的深人,近十年經(jīng)末梢釋放的神經(jīng)膚或遞質(zhì)所介導(dǎo)的氣道炎癥癥日益受到重視,為研究哮喘的發(fā)病機(jī)制開辟經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)較復(fù)雜,除了經(jīng)典的膽堿能和腎上,還包括非腎上能、膽NANC
【學(xué)位授予單位】:中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2003
【分類號】:R725.6
本文編號:2614320
【圖文】:
發(fā)作期、緩解期及正常對照組間支氣管誘導(dǎo)痰中SP含量討論小兒哮喘的研究:經(jīng)膚與哮喘:喘是由多種細(xì)胞和細(xì)胞組份共同參與的氣道慢制較復(fù)雜。隨著對氣道炎癥研究的深人,近十年經(jīng)末梢釋放的神經(jīng)膚或遞質(zhì)所介導(dǎo)的氣道炎癥癥日益受到重視,為研究哮喘的發(fā)病機(jī)制開辟經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)較復(fù)雜,除了經(jīng)典的膽堿能和腎上,還包括非腎上能、膽NANC
【學(xué)位授予單位】:中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2003
【分類號】:R725.6
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號:2614320
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