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探究TLR4對小鼠腸黏膜緊密連接蛋白的調(diào)控作用

發(fā)布時(shí)間:2020-04-02 10:16
【摘要】:目的:探究Toll樣受體4阻斷劑(TLR4-Ab)對脂多糖(LPS)引起的小鼠腸黏膜緊密連接蛋白的損傷是否有拮抗作用。方法:將24只BALB/C小鼠分為對照組、模型組(LPS組)、TLR4處理組(TLR4-Ab組)(n=8),用10%水合氯醛麻醉小鼠(0.3m L/只),模型組予以腹腔注射LPS(5mg/kg)建立內(nèi)毒素血癥小鼠模型,TLR4處理組在腹腔注射LPS同時(shí)給予抗TLR4單克隆抗體(10μg/只)腹腔注射,對照組以生理鹽水(1m L/kg)替代。各組分別于注射后3h處死小鼠,取各組小鼠遠(yuǎn)端小腸組織,采用RT-PCR及免疫組化法檢測核轉(zhuǎn)錄因子-κBp65,腫瘤壞死因子-α及緊密連接蛋白Claudin1,Occludin,ZO-1的mRNA表達(dá)和蛋白定位表達(dá)。結(jié)果:1.在NF-κBp65的mRNA及蛋白表達(dá)水平上,LPS組明顯高于對照組(P0.05),TLR4處理組明顯低于LPS組(P0.05);2.在TNF-α的mRNA及蛋白表達(dá)水平上,LPS組明顯高于對照組(P0.05),TLR4處理組明顯低于LPS組(P0.05);3.在Claudin1,Occludin,ZO-1的mRNA及蛋白表達(dá)水平上,LPS組明顯低于對照組(P0.05);TLR4處理組Claudin1,ZO-1的mRNA表達(dá)及Claudin1,Occludin,ZO-1的蛋白表達(dá)明顯高于LPS組(P0.05)。結(jié)論:1.抗TLR4單克隆抗體可下調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κBp65的mRNA和蛋白的表達(dá);2.抗TLR4單克隆抗體可下調(diào)炎癥因子TNF-α的mRNA和蛋白的表達(dá);3.抗TLR4單克隆抗體可上調(diào)Claudin1、ZO-1的mRNA和Claudin1、Occludin及ZO-1蛋白的表達(dá);4.抗TLR4單克隆抗體對LPS引起的緊密連接蛋白的損傷具有拮抗作用。
【圖文】:

腸黏膜,免疫組化檢測,上皮細(xì)胞,對照組


圖 2 各組緊密連接蛋白及 TNF-α、NF-κBp65 陽性信號 IOD 值的比較*示 LPS 組與對照組相比,P<0.05;#示 TLR4-Ab 組與 LPS 組相比,,P<0.05C D EAB
【學(xué)位授予單位】:中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R720.597

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2611817

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