【摘要】： 目的:建立呼吸道合胞病毒(RSV)感染SD大鼠動物模型。研究RSV感染后SD大鼠肺內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子(NGF、BDNF、NT3及NT4)濃度的變化與氣道神經(jīng)可塑性改變間的關(guān)系,為嬰幼兒哮喘的預(yù)防治療提供新的思路。 方法:1-2周齡SD大鼠共60只,隨機分為2組,A組:正常對照組;B組RSV感染組。每組30只,采用每周1次呼吸道合胞病毒滴鼻法制作模型。在第8周進行氣道阻力測定,留取左肺行HE染色觀察氣道炎癥改變及免疫組化明確氣道突觸囊泡素和神經(jīng)絲的表達變化,原位雜交法檢測肺組織RSV RNA的表達,取右肺行組織勻漿后,以酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測肺組織勻漿上清液神經(jīng)營養(yǎng)因子(NGF、BDNF、NT3及NT4)濃度的變化。 結(jié)果:(1)一般情況:實驗組大鼠漸出現(xiàn)卡他性鼻炎、呼吸氣促、毛亂、活動度降低的臨床表現(xiàn)。(2)體溫:滴鼻后24小時內(nèi)實驗組動物體溫上升幅度較基礎(chǔ)體溫有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05),而對照組滴鼻前后體溫變化沒有統(tǒng)計學(xué)差異。(3)體重:干預(yù)8周后,兩組實驗動物體重沒有明顯差別。(4)原位雜交檢測肺組織RSV RNA的表達:對照組大鼠肺組織中未見RSV RNA陽性信號,而實驗組大鼠肺間質(zhì)細胞中可見明顯的RSV RNA陽性信號。(5)氣道反應(yīng)性:干預(yù)8周后,各組間大鼠的氣道阻力基礎(chǔ)值差異無顯著性,在RSV感染組隨著鹽酸組胺濃度的升高,氣道阻力明顯增高。(6)HE染色:光鏡下實驗組大鼠肺組織符合典型間質(zhì)性肺炎的病理改變。(7)免疫組化:8周RSV組大鼠氣道壁突觸囊泡素及神經(jīng)絲陽性分布部位及形態(tài)與對照組相似,但分布密度較對照組明顯上調(diào)(P＜0.05),陽性產(chǎn)物為棕紅色顆粒,顆粒與對照組相比較粗大。(8)神經(jīng)營養(yǎng)因子表達水平:RSV感染組NGF及BDNF表達水平較對照組明顯增高(P＜0.05);而NT_3及NT_4表達水平則較對照組沒有明顯差別。(9)相關(guān)性分析:NGF及BDNF濃度表達均與氣道突觸囊泡素表達呈正相關(guān)關(guān)系(r_1=0.892,r_2=0.995,P＜0.05),與神經(jīng)絲表達呈正相關(guān)關(guān)系(r_1=0.949,r_2=0.936,P＜0.05),與氣道高反應(yīng)性也呈正相關(guān)關(guān)系(r_1=0.929,r_2=0.910,P＜0.05)。 結(jié)論:(1)本實驗發(fā)現(xiàn)RSV感染可引起大鼠的氣道神經(jīng)可塑性的改變,表現(xiàn)為氣道神經(jīng)內(nèi)SYN、NF的表達增加,此二者的密度可反映氣道神經(jīng)的密度分布;(2)RSV感染組大鼠肺組織勻漿中NGF及BDNF濃度較對照組明顯增高;(3)NGF及BDNF可能參與了RSV感染所致大鼠氣道神經(jīng)可塑性改變的調(diào)節(jié)過程,從而導(dǎo)致氣道高反應(yīng)性的發(fā)生。
【圖文】：

2周齡8周齡圖2-2接種Rsv大鼠與對照組大鼠體重比較(測肺組織RSVRNA:顯示對照組大鼠肺組織中未見RSV的ISH信管上皮細胞及肺泡上皮細胞中可見明顯的R成功建立。(見附錄圖5、6)定:的基礎(chǔ)值各組大鼠間的氣道阻力基本無差別組隨著鹽酸組胺濃度的升高，氣道阻力明顯m創(chuàng)ml時，氣道阻力較基礎(chǔ)明顯上升，增高達2一4)。相比之下對照組氣道阻力升高幅度較

對照組相似，但其分布密度較對照組明顯上調(diào)，陽性產(chǎn)物為棕紅色顆粒，顆粒與對照組相比亦明顯粗大(見附錄圖9、10、11、12)。圖像分析表明RSV感染組SYN陽性產(chǎn)物平均密度明顯大于對照組(P<0.05)。見下表2一6，圖2一5。表2一6各組大鼠氣道sYN及NF陽性反應(yīng)產(chǎn)物平均密度值的比較(淤s，個肛P)組別對照組(n=5)實驗組(n=5)SYN平均密度值12.54士1.9225.48士2.39*注:與對照組比較*P<0.05NF平均密度值 5.30士 1.4113.09士1.17*，

本文編號：2605696