發(fā)布時(shí)間：2020-03-29 06:53

【摘要】：呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus, RSV)是嬰幼兒呼吸道感染最常見的病原體之一,特別是2-6個(gè)月的嬰兒。RSV感染后常致嚴(yán)重毛細(xì)支氣管炎和肺炎。呼吸道合胞病毒感染常見于嬰幼兒且特別好發(fā)于六個(gè)月以下的嬰幼兒,并表現(xiàn)得更為嚴(yán)重且常有重復(fù)感染。呼吸道合胞病毒感染也見于老年人群,甚至各年齡階段的人群,是相當(dāng)常見的引起呼吸道感染的病毒病原。該病原的流行常好發(fā)于深秋冬及早春季節(jié)。 本實(shí)驗(yàn)從華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院、武漢市兒童醫(yī)院和武漢科技大學(xué)漢陽(yáng)醫(yī)院等醫(yī)院收集呼吸道感染兒童病例標(biāo)本108例,全部進(jìn)行多重RT-PCR檢測(cè)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)。采用Hep-2細(xì)胞作為敏感細(xì)胞系,對(duì)所采集的108份病例標(biāo)本中的部分進(jìn)行病毒分離。為了進(jìn)一步深入研究武漢地區(qū)兒童感染呼吸道合胞病毒的分子流行病學(xué),本實(shí)驗(yàn)隨機(jī)選取了兩株RSV實(shí)驗(yàn)室分離株進(jìn)行呼吸道合胞病毒的G蛋白編碼基因的克隆和測(cè)序,對(duì)其進(jìn)行了遺傳進(jìn)化分析。本實(shí)驗(yàn)還初步建立了轉(zhuǎn)染態(tài)pEGFP-N1-hRSV的細(xì)胞模型,為進(jìn)一步深入探索RSV G單一病毒蛋白在宿主細(xì)胞內(nèi)的功能和RSV致呼吸道相關(guān)疾病的蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供了有效的手段和奠定了一定基礎(chǔ)。相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,所采集的108例病例標(biāo)本中,RSV陽(yáng)性占23例,其中A型RSV16例,B型RSV7例,A型和B型混合感染0例。對(duì)兩株實(shí)驗(yàn)室RSV分離株進(jìn)行了其G基因的分子流行病學(xué)研究,發(fā)現(xiàn)兩株分離株均屬A亞型RSV且具較高的核苷酸序列同源性。本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了含RSV G基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的Hela細(xì)胞模型,為G基因的功能和其蛋白質(zhì)組學(xué)研究提供了有效手段和方法。
【學(xué)位授予單位】：華中師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R725.6

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本文編號(hào)：2605630