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增生性貧血患兒骨髓單個核細(xì)胞轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2表達(dá)情況及其意義

發(fā)布時間:2020-03-22 07:59
【摘要】: 目的 研究增生性貧血患兒骨髓單個核細(xì)胞轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(transferrin receptor 2,TfR2)表達(dá)情況,分析TfR2表達(dá)水平與貧血程度、骨髓紅系增生程度、基礎(chǔ)疾病種類和鐵狀況等指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系,探討TfR2在紅系造血方面的作用和在增生性貧血診斷方面的應(yīng)用價值。 方法 實(shí)驗(yàn)組系我院兒童血液腫瘤科收治的40例增生性貧血患者,對照組系經(jīng)骨髓檢查排除紅系疾病和血液系惡性腫瘤的10例患者。收集研究對象骨髓抗凝標(biāo)本,密度梯度離心方法提取制備骨髓單個核細(xì)胞,Trizol試劑提取細(xì)胞總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后熒光定量PCR方法檢測TfR2 mRNA表達(dá)水平。以目標(biāo)基因TfR2和管家基因GAPDH起始拷貝數(shù)之比判斷TfR2相對表達(dá)量。統(tǒng)計(jì)分析TfR2相對表達(dá)量與臨床、血液學(xué)、骨髓檢查和鐵代謝指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果 1.實(shí)驗(yàn)組骨髓單個核細(xì)胞TfR2相對表達(dá)量的中位數(shù)為5.58,對照組為0.0518,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。 2.TfR2相對表達(dá)量與貧血程度具有明顯相關(guān)關(guān)系。輕度貧血組TfR2相對表達(dá)量的中位數(shù)為0.1971,與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.419),提示輕度貧血可能尚不足以顯著刺激TfR2表達(dá)上調(diào)。但中度貧血和(極)重度貧血組TfR2相對表達(dá)量顯著高于輕度貧血組和對照組(P<0.05和P<0.001),其TfR2相對表達(dá)量的中位數(shù)分別為3.83和6.79。等級相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析表明,實(shí)驗(yàn)組TfR2相對表達(dá)量與外周血Hb含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r_s=-0.715,P<0.001)。 3.缺鐵性貧血組、地中海貧血組和其他溶血性貧血組TfR2相對表達(dá)量的中位數(shù)分別為4.13、7.63和2.34,與對照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P≤0.001),但不同基礎(chǔ)疾病組間比較差異無顯著性(P=0.537),說明TfR2表達(dá)受貧血及其程度影響,,而與基礎(chǔ)疾病無關(guān)。 4.增生性貧血患者不同鐵狀況組間TfR2相對表達(dá)量無顯著差異。 5.等級相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析表明,實(shí)驗(yàn)組TfR2相對表達(dá)量與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈正相關(guān)關(guān)系(等級相關(guān)系數(shù)r_s=0.533,P<0.001),而外周血Hb含量與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(等級相關(guān)系數(shù)r_s=-0.488,P=0.001)。 結(jié)論 1.增生性貧血患兒骨髓單個核細(xì)胞TfR2表達(dá)量顯著高于對照組,提示TfR2表達(dá)水平與骨髓增生程度密切相關(guān),可能在紅系造血方面發(fā)揮著重要作用。 2.TfR2表達(dá)水平與外周血Hb含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,但與導(dǎo)致增生性貧血的基礎(chǔ)疾病無關(guān),提示貧血(尤其是中重度貧血)是影響TfR2表達(dá)的重要因素。貧血可能通過引起組織缺氧等下游效應(yīng)誘導(dǎo)TfR2表達(dá),TfR2可能是紅系造血中的一個重要的調(diào)節(jié)分子。 3.TfR2表達(dá)水平與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈正相關(guān)關(guān)系,而外周血Hb含量與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)合國外關(guān)于TfR2高水平表達(dá)于胎肝細(xì)胞和幼紅細(xì)胞的研究報(bào)道,我們認(rèn)為TfR2在紅系造血方面具有十分重要的作用,而TfR2本身可能是反映骨髓紅系造血潛能的指標(biāo),在診斷增生性貧血方面具有潛在臨床應(yīng)用價值。
【圖文】:

瓊脂糖,分析儀,純度,成像


一、RNA鑒定 RNAOD26了ODZs。介于 1.8一2.0。將RNA在l%瓊脂糖上電泳15min后紫外透射分析儀觀察成像均見285、185、5S三條帶(圖1一1),表明總RNA無明顯降解,提取的純度較高。

擴(kuò)增曲線,標(biāo)準(zhǔn)模板,拷貝數(shù),熒光定量PCR


{…:書萬29洲33書刀拍圖1一 3GAPDH標(biāo)準(zhǔn)模板熒光定量P以擴(kuò)增曲線、F主91一3魏眾腳嶸PCR叭and二 ddynamie二 veof腳n珍ct1日卜““.}攏耘一與轟崢c峨認(rèn)腸孕碑稱刁3已加1勝奄,護(hù)七時咤’忍貶O甲 011.麟,O娜翔娜了鑒口沙沁2.花2月2滾4當(dāng)O一廠二{腸,綺O準(zhǔn)腸.加右當(dāng)習(xí)止子弓睡拷貝數(shù)對數(shù)值圖1一4G趕錢1標(biāo)準(zhǔn)品的栩崔曲線Figl一realti勸eesR衛(wèi)歐田t匕rdcur說ofG泊I互)H利用相對定量解析方法建立GAPDH熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線。在模板量5個10倍梯度稀釋范圍內(nèi),Ct值與起始拷貝數(shù)間呈線性關(guān)系,20
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R725.5

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本文編號:2594760

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