【摘要】： 目的 研究增生性貧血患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(transferrin receptor 2，TfR2)表達(dá)情況，分析TfR2表達(dá)水平與貧血程度、骨髓紅系增生程度、基礎(chǔ)疾病種類和鐵狀況等指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系，探討TfR2在紅系造血方面的作用和在增生性貧血診斷方面的應(yīng)用價(jià)值。 方法 實(shí)驗(yàn)組系我院兒童血液腫瘤科收治的40例增生性貧血患者，對(duì)照組系經(jīng)骨髓檢查排除紅系疾病和血液系惡性腫瘤的10例患者。收集研究對(duì)象骨髓抗凝標(biāo)本，密度梯度離心方法提取制備骨髓單個(gè)核細(xì)胞，Trizol試劑提取細(xì)胞總RNA，逆轉(zhuǎn)錄后熒光定量PCR方法檢測(cè)TfR2 mRNA表達(dá)水平。以目標(biāo)基因TfR2和管家基因GAPDH起始拷貝數(shù)之比判斷TfR2相對(duì)表達(dá)量。統(tǒng)計(jì)分析TfR2相對(duì)表達(dá)量與臨床、血液學(xué)、骨髓檢查和鐵代謝指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系。 結(jié)果 1．實(shí)驗(yàn)組骨髓單個(gè)核細(xì)胞TfR2相對(duì)表達(dá)量的中位數(shù)為5.58，對(duì)照組為0.0518，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。 2．TfR2相對(duì)表達(dá)量與貧血程度具有明顯相關(guān)關(guān)系。輕度貧血組TfR2相對(duì)表達(dá)量的中位數(shù)為0.1971，與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.419)，提示輕度貧血可能尚不足以顯著刺激TfR2表達(dá)上調(diào)。但中度貧血和(極)重度貧血組TfR2相對(duì)表達(dá)量顯著高于輕度貧血組和對(duì)照組(P＜0.05和P＜0.001)，其TfR2相對(duì)表達(dá)量的中位數(shù)分別為3.83和6.79。等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析表明，實(shí)驗(yàn)組TfR2相對(duì)表達(dá)量與外周血Hb含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r_s=-0.715，P＜0.001)。 3．缺鐵性貧血組、地中海貧血組和其他溶血性貧血組TfR2相對(duì)表達(dá)量的中位數(shù)分別為4.13、7.63和2.34，與對(duì)照組相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(P≤0.001)，但不同基礎(chǔ)疾病組間比較差異無(wú)顯著性(P=0.537)，說(shuō)明TfR2表達(dá)受貧血及其程度影響，，而與基礎(chǔ)疾病無(wú)關(guān)。 4．增生性貧血患者不同鐵狀況組間TfR2相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著差異。 5．等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析表明，實(shí)驗(yàn)組TfR2相對(duì)表達(dá)量與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈正相關(guān)關(guān)系(等級(jí)相關(guān)系數(shù)r_s=0.533，P＜0.001)，而外周血Hb含量與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(等級(jí)相關(guān)系數(shù)r_s=-0.488，P=0.001)。 結(jié)論 1．增生性貧血患兒骨髓單個(gè)核細(xì)胞TfR2表達(dá)量顯著高于對(duì)照組，提示TfR2表達(dá)水平與骨髓增生程度密切相關(guān)，可能在紅系造血方面發(fā)揮著重要作用。 2．TfR2表達(dá)水平與外周血Hb含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，但與導(dǎo)致增生性貧血的基礎(chǔ)疾病無(wú)關(guān)，提示貧血(尤其是中重度貧血)是影響TfR2表達(dá)的重要因素。貧血可能通過(guò)引起組織缺氧等下游效應(yīng)誘導(dǎo)TfR2表達(dá)，TfR2可能是紅系造血中的一個(gè)重要的調(diào)節(jié)分子。 3．TfR2表達(dá)水平與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈正相關(guān)關(guān)系，而外周血Hb含量與骨髓幼紅細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)合國(guó)外關(guān)于TfR2高水平表達(dá)于胎肝細(xì)胞和幼紅細(xì)胞的研究報(bào)道，我們認(rèn)為TfR2在紅系造血方面具有十分重要的作用，而TfR2本身可能是反映骨髓紅系造血潛能的指標(biāo)，在診斷增生性貧血方面具有潛在臨床應(yīng)用價(jià)值。
【圖文】：

一、RNA鑒定 RNAOD26了ODZs。介于 1.8一2.0。將RNA在l%瓊脂糖上電泳15min后紫外透射分析儀觀察成像均見(jiàn)285、185、5S三條帶(圖1一1)，表明總RNA無(wú)明顯降解，提取的純度較高。

{…:書(shū)萬(wàn)29洲33書(shū)刀拍圖1一 3GAPDH標(biāo)準(zhǔn)模板熒光定量P以擴(kuò)增曲線、F主91一3魏眾腳嶸PCR叭and二 ddynamie二 veof腳n珍ct1日卜““.}攏耘一與轟崢c峨認(rèn)腸孕碑稱刁3已加1勝奄，護(hù)七時(shí)咤’忍貶O甲 011.麟，O娜翔娜了鑒口沙沁2.花2月2滾4當(dāng)O一廠二{腸，綺O準(zhǔn)腸.加右當(dāng)習(xí)止子弓睡拷貝數(shù)對(duì)數(shù)值圖1一4G趕錢1標(biāo)準(zhǔn)品的栩崔曲線Figl一realti勸eesR衛(wèi)歐田t匕rdcur說(shuō)ofG泊I互)H利用相對(duì)定量解析方法建立GAPDH熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線。在模板量5個(gè)10倍梯度稀釋范圍內(nèi)，Ct值與起始拷貝數(shù)間呈線性關(guān)系，20
【學(xué)位授予單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R725.5

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本文編號(hào)：2594760