【摘要】： 第一部分麻黃堿對缺氧缺血性腦損傷后新生大鼠腦組織Nogo-A和突觸素表達(dá)的影響 目的: 探討髓鞘相關(guān)蛋白Nogo-A和突觸素在缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦組織的表達(dá)特點及麻黃堿對其表達(dá)的影響。 方法: 健康Sprague-Dawley新生大鼠96只,隨機(jī)分為假手術(shù)組,HIBD組和麻黃堿治療組,每組32只。于7日齡行左側(cè)頸總動脈結(jié)扎,吸入8%O2+ 92%N2混合氣體行缺氧處理2小時,制成HIBD模型。假手術(shù)組只作左頸總動脈分離而不結(jié)扎,不作缺氧處理。麻黃堿組于建模成功后腹腔注射麻黃堿1.5 mg·kg-1,假手術(shù)組和HIBD組大鼠腹腔注射等量生理鹽水。上述各組干預(yù)均為每日1次,共7日。術(shù)后1、2、3、4周,各組大鼠均隨機(jī)抽取8只,于麻醉下處死取腦,HE染色觀察腦組織病理變化,免疫組化法檢測髓鞘相關(guān)蛋白Nogo-A和突觸素表達(dá)情況。 結(jié)果: 1.腦組織病理變化情況:光鏡下可見缺氧缺血腦損傷大鼠腦組織皮質(zhì)和海馬有明顯的神經(jīng)病理損傷,上述改變在麻黃堿組明顯減輕。 2. Nogo-A蛋白表達(dá)情況:假手術(shù)組各時間點大鼠腦組織Nogo-A表達(dá)無明顯變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.05);與假手術(shù)組相比,HIBD組術(shù)后各時間點腦組織Nogo-A表達(dá)均增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.01);與HIBD組相比,麻黃堿治療組第2,3,4周Nogo-A表達(dá)明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.01)。 3. SYP蛋白表達(dá)情況:與假手術(shù)組相比,HIBD組術(shù)后各時間點腦組織突觸素表達(dá)均減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.01);與HIBD組相比,麻黃堿治療組第1,2,3周突觸素表達(dá)明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.01)。 結(jié)論: 新生大鼠HIBD后腦組織Nogo-A表達(dá)增高,可能是中樞神經(jīng)損傷后再生障礙的重要因素之一。麻黃堿可下調(diào)腦組織HIBD后Nogo-A的表達(dá),促進(jìn)突觸素的表達(dá),從而有利于新生動物HIBD后神經(jīng)軸突的再生。 第二部分麻黃堿聯(lián)合高壓氧治療對腦缺氧缺血后新生大鼠神經(jīng)功能的影響 目的: 探討麻黃堿聯(lián)合高壓氧治療對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷后神經(jīng)可塑性的影響及其分子機(jī)制。 方法: 新生Sprague-Dawley大鼠80只,隨機(jī)分成5組:假手術(shù)組,缺氧缺血組,麻黃堿治療組,高壓氧治療組以及麻黃堿和高壓氧聯(lián)合治療組,每組16只。于7日齡行左側(cè)頸總動脈永久結(jié)扎,吸入8%O2+ 92%N2混合氣體行低氧處理2小時,制成缺氧缺血性腦損傷模型。假手術(shù)組只作左頸總動脈分離而不結(jié)扎,不缺氧。麻黃堿組每日腹腔注射麻黃堿1.5 mg·kg-1,高壓氧組每日以2.5個大氣壓行2小時干預(yù),聯(lián)合治療組給予麻黃堿和高壓氧治療,假手術(shù)組和缺氧缺血組大鼠每日腹腔注射等量生理鹽水,上述各組干預(yù)均為每日一次,共7日。測定術(shù)后1周體重增長率。各組大鼠均于術(shù)后1周麻醉下處死8只取腦,HE染色觀察腦組織病理變化,免疫組化法檢測半胱天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)和軸突再生抑制蛋白(Nogo-A)表達(dá)情況。余新生鼠喂養(yǎng)至術(shù)后4周行5天的Morris水迷宮學(xué)習(xí)和記憶的測試。 結(jié)果: 1.體重增長及增長率:HI后1周時各治療組體重增長率大于HIBD組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.05)。與單一治療組相比,聯(lián)合治療組的體重增長率增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.05)。 2.腦組織病理變化情況:HE染色觀察到HIBD后腦組織廣泛的神經(jīng)元變性和水腫,正常排列結(jié)構(gòu)消失。上述改變在麻黃堿和高壓氧單一治療組有所減輕;聯(lián)合治療組神經(jīng)細(xì)胞的壞死及變性程度較HIBD組明顯減輕,僅見少量神經(jīng)元出現(xiàn)輕度皺縮。 3. Caspase-3和Nogo-A蛋白表達(dá)情況:與缺氧缺血組相比,麻黃堿、高壓氧單用及兩者聯(lián)用組腦組織Caspase-3和Nogo-A表達(dá)均減少,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.01);兩者聯(lián)用組Caspase-3和Nogo-A表達(dá)較單治療組減少,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義( P 0.01)。 4.行為學(xué)檢測:Morris水迷宮實驗顯示:第2-5天各組平均逃避潛伏期明顯短于缺氧缺血組( P 0.05) ,平臺穿過次數(shù)各組均多于缺氧缺血組( P 0.05);與兩單治療組相比,第3-5天兩者聯(lián)用組平均逃避潛伏期較短(P 0.01),平臺穿過次數(shù)較多(P 0.05)。 結(jié)論: 麻黃堿和高壓氧治療均能減輕新生大鼠缺氧缺血引起的腦組織損傷,提高新生缺氧缺血性腦損傷大鼠年長后的空間定向能力和學(xué)習(xí)記憶能力。與單一治療相比,兩者聯(lián)用具有更加顯著的保護(hù)作用。其機(jī)制考慮與下調(diào)缺氧缺血性腦損傷后Caspase-3和Nogo-A的表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

25圖 1 HIBD 后 1 周海馬組織病理改變（HE 染色，×200）1-1 假手術(shù)組：海馬區(qū)細(xì)胞排列整齊，輪廓正常；1-2 HIBD 組：大量細(xì)胞水腫，彌漫性神經(jīng)元丟失；1-3 麻黃堿組，僅見少量神經(jīng)元出現(xiàn)輕度皺縮Figure1 Pathological changes in thehippocampus of neonatal rats 1 wk afterhypoxic-ischemic brain damage (HIBD)(Hematoxylin-eosin staining, × 200).1-1 Normal cell structure in the lefthippocampus in the sham operation group; 1-2cellular edema and diffuse neuronaldegeneration in the HIBD group; 1-3 slightshrinkage in the ephedrine group.圖 2 HIBD 損傷后 3 周 Nogo-A 在大腦皮表達(dá) (免疫組化染色，×400)2-1 假手術(shù)組：Nogo-A 陽性細(xì)胞較少，，較淡；2-2 HIBD 組：Nogo-A 呈強(qiáng)陽性表染色較深；2-3 麻黃堿組：Nogo-A 陽性散在分布，染色較淡Figure 2 Nogo-A expression incerebral cortex at 3 wk hypoxic-ischemic brain damage (H(Immunohistochemical staining, × 400).2-1 Increased immunoreactive cells insham operation group; 2-2 immunoreacells in the HIBD group; 2-3 only aimmunoreactive cells in the ephedrine grou

25圖 1 HIBD 后 1 周海馬組織病理改變（HE 染色，×200）1-1 假手術(shù)組：海馬區(qū)細(xì)胞排列整齊，輪廓正常；1-2 HIBD 組：大量細(xì)胞水腫，彌漫性神經(jīng)元丟失；1-3 麻黃堿組，僅見少量神經(jīng)元出現(xiàn)輕度皺縮Figure1 Pathological changes in thehippocampus of neonatal rats 1 wk afterhypoxic-ischemic brain damage (HIBD)(Hematoxylin-eosin staining, × 200).1-1 Normal cell structure in the lefthippocampus in the sham operation group; 1-2cellular edema and diffuse neuronaldegeneration in the HIBD group; 1-3 slightshrinkage in the ephedrine group.圖 2 HIBD 損傷后 3 周 Nogo-A 在大腦皮表達(dá) (免疫組化染色，×400)2-1 假手術(shù)組：Nogo-A 陽性細(xì)胞較少，較淡；2-2 HIBD 組：Nogo-A 呈強(qiáng)陽性表染色較深；2-3 麻黃堿組：Nogo-A 陽性散在分布，染色較淡Figure 2 Nogo-A expression incerebral cortex at 3 wk hypoxic-ischemic brain damage (H(Immunohistochemical staining, × 400).2-1 Increased immunoreactive cells insham operation group; 2-2 immunoreacells in the HIBD group; 2-3 only aimmunoreactive cells in the ephedrine grou
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R722.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 涂悅;馬鐵柱;吳繪;;基質(zhì)金屬蛋白酶與腦缺血研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2006年01期

2 謝英,杜熠,耿興超,侯新樸;神經(jīng)生長因子脂質(zhì)體大鼠鼻腔給藥的藥效學(xué)研究[J];中國藥學(xué)雜志;2005年10期

本文編號：2592997