發(fā)布時間：2019-11-29 19:13

【摘要】：目的：利用Caco-2腸上皮細(xì)胞單層屏障模型研究四種腸道微生物對腸道屏障的影響。 方法：建立Caco-2腸上皮細(xì)胞單層屏障模型，堿性磷酸酶檢測細(xì)胞極性。將實驗分為空白對照組、大腸埃希菌組、肺炎克雷伯菌組、糞腸球菌組、乳酸桿菌組，，在各組細(xì)菌作用下，Millicell-ERS電阻測定儀測定Caco-2腸上皮細(xì)胞單層跨上皮細(xì)胞電阻TEER值變化、酶標(biāo)儀檢測熒光黃通過率的變化；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測單層細(xì)胞zonulin；電鏡觀察細(xì)胞間緊密連接超微結(jié)構(gòu)變化；免疫熒光、Westernblot方法檢測緊密連接（TJ）相關(guān)蛋白Occludin、Claudin-1、ZO-1表達(dá)、分布和超微結(jié)構(gòu)變化。所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義，采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。 結(jié)果：堿性磷酸酶測定細(xì)胞單層呈明顯極性，TEER值穩(wěn)定在250 3

本文編號：2567580