發(fā)布時間：2019-07-26 16:08

【摘要】：目的:探討窒息對新生小鼠β受體的影響及β_2受體激動劑對未成熟心肌細胞是否具有保護性。方法:第一部分取出生3天的ICR小鼠36只,隨機數(shù)字表法編號,分別于小鼠生后3、5、7、14、21、28天隨機從中各取6只,開胸取出心肌組織,分別進行免疫組化及western蛋白印跡法檢測心肌β_1、β_2受體表達。第二部分取出生3天的ICR小鼠12只,采用隨機數(shù)字表法隨機分為2組,對照(Control,CTL)組(n=6只)僅置于廣口瓶中,不做窒息處理。窒息(Asphyxia,AS)組(n=6只)參照新生鼠常壓窒息模型進行窒息處理,各組小鼠均開胸取出心肌組織,分別進行免疫組化及western蛋白印跡法檢測心肌β_1、β_2受體表達。第三部分取出生3天的小鼠36只,采用隨機數(shù)字表法隨機分為3組,CTL組(n=12只)僅置于廣口瓶中,不做窒息處理。AS組(n=12只)參照新生鼠常壓窒息模型進行窒息處理。非諾特羅(Fenoterol,FEN)組(n=12只)在窒息處理前2小時予以非諾特羅前期給予1次,余處理同AS組。分別在各組小鼠出生3天、28天行心臟超聲檢測小鼠心率及左心室射血分數(shù),開胸取心臟組織,免疫組化及western蛋白印跡法檢測心肌β_1、β_2受體表達。結(jié)果:1.CTL組出生第3、5、7、14、21、28天各組小鼠β_1受體表達隨著鼠齡增長逐漸增加,28天小鼠β_1受體表達明顯高于3天小鼠(P0.05);2.CTL組出生第3、5、7、14、21、28天各組小鼠β_2受體表達隨著鼠齡增長逐漸減少,28天小鼠β_2受體表達明顯低于3天小鼠(P0.05);3.與CTL組相比,AS組3天小鼠心肌β_1、β_2受體均出現(xiàn)明顯下調(diào)(P0.05);4.CTL組3天正常小鼠心肌細胞排列整齊,細胞核清晰,細胞膜完整,無炎性細胞滲出、心肌細胞水腫及壞死。AS組3天小鼠進行窒息處理后,心肌細胞排列紊亂,有少許炎性細胞滲出。AS組3天小鼠相比于CTL組,心率上升(P0.05),LVEF%明顯降低(P0.05),HB/WB比對比無明顯差異(P0.05),提示心肌損傷;5.與CTL組28天小鼠相比,AS組HW/BW比升高,FEN組HW/BW比降低,FEN組較AS組HW/BW降低(P0.05);6.與CTL組28天小鼠相比,AS組心率降低,FEN組心率升高,但三組組間互無明顯差異(P0.05);7.與CTL組28天小鼠相比,FEN組及AS組LVEF%均降低,FEN組對比AS組LVEF%升高(P0.05);8.與CTL組28天小鼠相比,FEN組及AS組β_1、β_2受體表達均降低,FEN組β_1受體相比于AS組有升高趨勢,無統(tǒng)計學意義(P0.05),FEN組β_2受體相比于AS組有升高趨勢(P0.05)。結(jié)論:1.正常小鼠心肌β_1、β_2受體表達在一定的時間段內(nèi)可以隨著鼠齡變化而發(fā)生改變,主要表現(xiàn)為β_1受體表達上調(diào),β_2受體下調(diào);2.窒息3天小鼠出現(xiàn)心率增快、LVEF%下降,提示窒息可以引起心肌損傷;3.窒息所致新生3天小鼠心肌損傷后,心肌β_1、β_2受體均出現(xiàn)大量下調(diào);4.特異性β_2受體激動劑非諾特羅處理后的窒息小鼠相比于單純窒息小鼠,HW/BW更低,LVEF%升高,β_2受體增加,提示非諾特羅可以改善心肌功能,可能是通過提高β_2受體活性來發(fā)揮作用。
【圖文】：

18圖 2 3d 小鼠窒息心肌細胞 β 受體表達變化（A）3d 小鼠窒息損傷后心肌細胞 β 受體免疫組化結(jié)果,可見窒息后小鼠心肌 β1、β2受體染色均變淺，，表達出現(xiàn)下調(diào)的趨勢；（B）3d 小鼠窒息損傷后心肌細胞 β 受體 western blot 表達結(jié)果；（C）3d 小鼠窒息后心肌細胞 β1受體蛋白表達統(tǒng)計圖，n=6，P<0.05，CTL3d vs.AS 3d；（D）3d 小鼠窒息后心肌細胞 β2受體蛋白表達統(tǒng)計圖，n=6，P<0.05，CTL3d vs.AS 3d。

25圖 3 窒息 3d 和 28d 小鼠各組 β 受體蛋白表達及心功能指標變化（A）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細胞 β1受體免疫組化結(jié)果；（B）3d、28d 小鼠CTL、AS、FEN 各組心肌細胞 β2受體免疫組化結(jié)果；（C）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細胞 β 受體蛋白 western blot 表達變化；（D）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細胞 β1受體蛋白表達統(tǒng)計圖，n=6，P>0.05，F(xiàn)EN 28d vs.AS 28d；（E）3d、28d 小鼠 CTL、AS、FEN 各組心肌細胞 β2受體蛋白表達統(tǒng)計圖，n=6，P<0.05，F(xiàn)EN 28d vs. AS 28d；(F) 3d、28d小鼠 CTL、AS、FEN 各組心率統(tǒng)計圖，n=6，P>0.05，F(xiàn)EN 28d vs.AS 28d；(G) 3d、28d 小鼠CTL、AS、FEN 各組 HW/BW 統(tǒng)計圖，n=6，P<0.05，F(xiàn)EN 28d vs. AS 28d；（H）3d、28d 小
【學位授予單位】：湖北醫(yī)藥學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R722.12

【參考文獻】

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本文編號：2519654