【摘要】：研究背景 心室重構(gòu)是心臟在多種形式的損傷因素作用下所產(chǎn)生的大小、形狀、室壁厚度和組織結(jié)構(gòu)等一系列變化,是病變修復(fù)和心室整體代償及繼發(fā)的病理生理反應(yīng)過(guò)程。在心室重構(gòu)中,多種炎癥細(xì)胞因子和神經(jīng)體液因子如血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ Ang Ⅱ)和內(nèi)皮素(endothelin, ET)等的作用,使心肌成纖維細(xì)胞(cardiac fibroblasts, CFs)通過(guò)分泌多種細(xì)胞因子與生長(zhǎng)因子、細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM)的合成與降解失衡、增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)化等多種途徑,參與病理性心室重構(gòu)過(guò)程。臨床上預(yù)防細(xì)胞增殖和心肌纖維化是阻止心室重構(gòu)的關(guān)鍵。Ang Ⅱ刺激CFs還可分泌多種細(xì)胞因子,這些因子以旁分泌或自分泌的方式調(diào)控CFs自身和周?chē)男募〖?xì)胞代謝結(jié)構(gòu)功能而參與心肌重構(gòu)。AngⅡ受體有四種亞型,分別為AT1R、AT2R、AT3R和AT4R,目前認(rèn)為Ang Ⅱ引起CFs產(chǎn)生的多種生物學(xué)效應(yīng)主要由AT1R介導(dǎo),臨床上用AT1R受體拮抗劑防治高血壓和心衰已取得較好的近期療效。AT1R又分為兩個(gè)亞型,即ATlaR和AT1bR。AT1受體為經(jīng)典的G蛋白偶聯(lián)受體(G protein coupled receptors, GPCRs),因此對(duì)G蛋白信號(hào)通路的調(diào)控是心肌重構(gòu)潛在的治療靶點(diǎn)。 AT1通過(guò)Gq蛋白激活磷脂酶C(Phospholipase C, PLC),水解二磷酸磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol4,5-bisphosphate, PIP2)產(chǎn)生三磷酸肌醇(1,4,5,-trisphosphate, IP3)和二�；视�(diacyl glycerol, DAG),促使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+庫(kù)釋放Ca2+,引起胞內(nèi)游離Ca2+濃度瞬間增加,活化蛋白激酶C(protein kinase C,PKC),介導(dǎo)PKC-依賴(lài)性酪氨酸激酶途徑,刺激人CFs蛋白質(zhì)合成過(guò)程。 受體在受到連續(xù)的刺激后通常會(huì)出現(xiàn)脫敏的現(xiàn)象。P-arrestin與G蛋白偶聯(lián)受體激酶(G-protein-coupled receptor kinases, GRK)聯(lián)合作用,通過(guò)介導(dǎo)受體脫敏和內(nèi)吞,對(duì)大部分GPCRs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路具有重要的負(fù)調(diào)節(jié)作用。β-arrestin有β-arrestin1和2兩個(gè)亞型,廣泛的存在于各種細(xì)胞中。當(dāng)GPCRs被激活后,β-arrestin轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜,結(jié)合到被激動(dòng)劑占領(lǐng)的受體上,促使這些受體與G蛋白分離,從而導(dǎo)致受體脫敏�；罨摩�-arrestin分子釋放出C末端,與胞內(nèi)小泡表面的網(wǎng)格蛋白(clathrin)結(jié)合,介導(dǎo)GPCRs的內(nèi)吞。β-arrestin可以調(diào)節(jié)內(nèi)吞后GPCRs的運(yùn)輸模式,在GPCRs循環(huán)中起到了特別的作用。近期研究表明,β-arrestin不僅僅是信號(hào)的終止子,還是GPCRs介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的支架蛋白,他還可以改變G蛋白介導(dǎo)的第二信使通路激活MAPK。除了調(diào)節(jié)GPCRs的脫敏和信號(hào)傳遞,β-arrestin1還可以進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)直接或間接影響一些轉(zhuǎn)錄因子,在基因表達(dá)調(diào)控上發(fā)揮更多的功能,P-arrestin介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)是細(xì)胞生物學(xué)的新發(fā)現(xiàn),也是治療GPCRs功能失調(diào)疾病的新靶點(diǎn)。大鼠心梗后心衰模型的心肌β-arrestin-1mRNA和蛋白表達(dá)均升高,免疫組化檢測(cè)提示β-arrestin-1可能是內(nèi)皮功能的主要調(diào)節(jié)因子。腎上腺過(guò)表達(dá)β-arrestin-1促進(jìn)心肌梗死后醛固酮水平的升高,從而加速心臟的有害再構(gòu)并降低心室功能。體內(nèi)抑制腎.上腺β-arrestin-1基因表達(dá)后可顯著減少循環(huán)中醛固酮水平而阻止上述有害變化。AT1R拮抗劑氯沙坦不能降低β-arrestin-1升高的醛固酮水平。對(duì)心衰動(dòng)物模型的研究提示,β1-腎上腺素受體和AT1R介導(dǎo)的β-arrestin依賴(lài)的EGFR/ERK信號(hào)活化對(duì)心臟起到了保護(hù)作用。 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(Epigallocatechin gallate, EGCG)是從綠茶中提取的一種單體成份,它是綠茶主要的活性和水溶性成份,是兒茶素中含量最高的組分,占綠茶毛重的9%-13%,具有潛在的抗炎、抗腫瘤等作用,同時(shí)對(duì)心臟的保護(hù)作用也受到關(guān)注。EGCG被認(rèn)為介導(dǎo)一氧化氮引起的血管舒張,保護(hù)缺血再灌注心臟。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)EGCG可以有效地減輕壓力負(fù)荷造成的大鼠心臟肥厚和重構(gòu),阻止心臟肥厚中的心肌細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激反應(yīng),抑制心肌成纖維細(xì)胞的異常增殖而改善心肌重構(gòu),組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)EGCG可有效的減輕左心室心肌纖維化程度。因此EGCG可能成為治療患者心肌重構(gòu)的有效藥物。 目前的研究多認(rèn)為EGCG對(duì)于心肌保護(hù)主要通過(guò)抑制氧化應(yīng)激,而沒(méi)有EGCG對(duì)心肌成纖維細(xì)胞AngⅡ受體AT1R調(diào)節(jié)作用的報(bào)道。但在嗎啡引起的身體依賴(lài)性研究中發(fā)現(xiàn),EGCG可以適度降低藍(lán)斑中嗎啡升高的cAMP水平,抑制多巴胺受體2(一種GPCRs)信號(hào)通路,對(duì)嗎啡引起的身體依賴(lài)性產(chǎn)生顯著地藥理作用。綜上所述,現(xiàn)有證據(jù)表明EGCG對(duì)G蛋白信號(hào)通路有確定作用,目前的研究多認(rèn)為EGCG的通過(guò)抑制氧化應(yīng)激發(fā)揮心臟保護(hù)作用,但尚不清楚EGCG對(duì)心肌成纖維細(xì)胞AngⅡ受體AT1R是否具有調(diào)節(jié)作用,同時(shí)β-arrestin是GPCRs的重要調(diào)節(jié)分子。因此我們希望了解在心肌成纖維細(xì)胞異�；罨^(guò)程中,AT1R的調(diào)節(jié)分子β-arrestin發(fā)揮了怎樣的作用？EGCG是否通過(guò)調(diào)節(jié)P-arrestin影響AT1R而發(fā)揮抑制心肌成纖維細(xì)胞異常增殖的作用？ 本實(shí)驗(yàn)擬在體外用AngⅡ活化的新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞為研究對(duì)象,采用小干擾RNA (small interfering RNAs, siRNA)、實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR (real-time quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR)和western blot等手段,探討β-arrestin在CFs中的表達(dá)和分布變化及其對(duì)AT1R信號(hào)的調(diào)控作用,以進(jìn)一步揭示CFs活化和ECM合成的機(jī)制,同時(shí)觀察EGCG對(duì)CFs β-arrestins表達(dá)和AT1R信號(hào)的影響,以進(jìn)一步闡明其抑制心肌成纖維細(xì)胞增殖和活化的分子機(jī)制。 研究目的 1.分離培養(yǎng)新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞,觀察EGCG對(duì)正常CFs和血管緊張素Ⅱ異常活化CFs功能的影響。 2.探討EGCG對(duì)心肌成纖維細(xì)胞β-arrestin-1和β-arrestin-2表達(dá)的影響,揭示β-arrestin表達(dá)變化與細(xì)胞活性之間的相關(guān)性。 3.闡明β-arrestin-1對(duì)心肌成纖維細(xì)胞AT1R表達(dá)、細(xì)胞活性、增殖和膠原合成能力的影響及EGCG的作用。 4.揭示EGCG對(duì)血管緊張素Ⅱ受體AT1R-Gq-PKC信號(hào)通路的影響。 研究方法 1.新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定 取新生1-3天的Sprague-Dawley (SD)大鼠,在超凈工作臺(tái)上無(wú)菌取出心臟,分離心室肌組織,剪碎,用胰蛋白酶和Ⅰ型膠原酶消化成單細(xì)胞懸液,去除非貼壁細(xì)胞,貼壁細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。進(jìn)行細(xì)胞爬片,冷丙酮固定后用免疫組化法檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中波形蛋白(成纖維細(xì)胞中大量表達(dá))的表達(dá)情況,染色陽(yáng)性證實(shí)為心肌成纖維細(xì)胞。第2-4代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。 2.體外給藥分組 細(xì)胞同步化后,用AngⅡ (1×10-7mol/L)體外作用CFs,設(shè)EGCG (1×10-9,1×10-8,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol/L)五個(gè)給藥組,用血管緊張素Ⅱ受體反向激動(dòng)劑纈沙坦(valsartan, Val)(1×10-6mol/L)作為陽(yáng)性對(duì)照給藥,給藥后培養(yǎng)24小時(shí),并設(shè)正常CFs組。檢測(cè)EGCG對(duì)正常CFs的影響設(shè)正常細(xì)胞組和EGCG (1×10-5mol/L)給藥組。 3.CFs細(xì)胞活力檢測(cè) 采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, MTT)法檢測(cè)CFs的活力。同步化后體外用AngⅡ刺激或給予不同濃度EGCG處理后培養(yǎng)24h,終止培養(yǎng)前6h每孔加入MTT,棄去上清后每孔加入二甲亞砜(Dimethyl sulfoxide, DMSO),震蕩30s后于酶標(biāo)儀570nm處檢測(cè)吸光度值。 4.CFs細(xì)胞增殖能力和膠原合成量檢測(cè) 采用3H-TdR參入法檢測(cè)CFs的增殖能力,3H-羥脯氨酸參入法檢測(cè)膠原合成量。細(xì)胞同步化后體外用AngⅡ刺激或給予不同濃度EGCG處理后培養(yǎng)24h,終止培養(yǎng)前6h每孔加入3H-TdR或3H-羥脯氨酸,培養(yǎng)結(jié)束用胰酶消化細(xì)胞,用多頭細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞至玻璃纖維紙上,烘干后加入閃爍液溶解,以液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定每分鐘的脈沖數(shù)cpm。 5. RT-qPCR檢測(cè) 用Trizol法提取CFs,總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,以GAPDH為參照,通過(guò)RT-qPCR技術(shù)檢測(cè)β-arrestin-1、AT1aR和AT1bR mRNA水平的表達(dá)。 6. Western blot檢測(cè) CFs中加入適量細(xì)胞裂解液,反復(fù)凍融破碎細(xì)胞,3000×g離心,提取上清即為細(xì)胞總蛋白,用Lowry法定量后加入上樣緩沖液,煮沸,進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE),經(jīng)過(guò)分離、轉(zhuǎn)膜、封閉、孵育一抗、二抗、顯色等,分別檢測(cè)細(xì)胞總β-arrestin-1、 β-arrestin-2、AT1R、Gq的表達(dá)水平。細(xì)胞總蛋白繼續(xù)用37000×g離心,上清為胞漿蛋白,定量后用于檢測(cè)細(xì)胞漿磷酸化PKC-delta的表達(dá)情況；沉淀用細(xì)胞裂解液溶解后定量,用于檢測(cè)細(xì)胞膜β-arrestin-1、AT1R和磷酸化PKC-delta (p-PKC-delta)表達(dá)水平。采用廣譜鈣粘附素(pan cadherin)鑒定胞漿胞膜蛋白的分離效率。 7.大鼠CFs β-arrestin-1的siRNA沉默 用β-arrestin-1的siRNA干擾試劑盒干擾大鼠CFs中β-arrestin-1基因表達(dá)。設(shè)計(jì)3對(duì)干擾序列。CFs用不含抗生素的血清培養(yǎng)到70%以上融合,吸棄舊培養(yǎng)液,PBS洗滌,加不含抗生素、含5%胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)的DMEM。將siRNA/Lipofectamin2000復(fù)合物,加到含有細(xì)胞和Opti-MEM培養(yǎng)基的6孔板中。孵育6h后,除去復(fù)合物,更換5%DMEM,再培養(yǎng)24h、48h、72h。熒光顯微鏡觀察最佳轉(zhuǎn)染時(shí)間,提取蛋白,進(jìn)行Western Blot檢測(cè),確定最佳干擾序列和干擾效率。 8.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。數(shù)值變量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組間均數(shù)比較采用小樣本T檢驗(yàn),多組間差異顯著性比較采用One-Way ANOVA方差分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 研究結(jié)果 1.心肌成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)情況 用倒置顯微鏡觀察,心肌成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,2-3天即呈匯合狀態(tài),細(xì)胞排列整齊緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng)。心肌成纖維細(xì)胞呈梭形,胞體較大,胞質(zhì)透明；細(xì)胞核較大,呈橢圓形,通常含2-3個(gè)核,無(wú)自發(fā)性搏動(dòng)。 2.心肌成纖維細(xì)胞的鑒定 用免疫組化法檢測(cè)上述方法培養(yǎng)的第2代新生大鼠心臟細(xì)胞中波形蛋白表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞波形蛋白染色呈強(qiáng)陽(yáng)性,符合心肌成纖維樣細(xì)胞的特征。 3. EGCG對(duì)正常大鼠心肌成纖維細(xì)胞活力、增殖和膠原合成的影響 EGCG對(duì)正常大鼠CFs的細(xì)胞活力、增殖和膠原合成能力均無(wú)顯著影響(P0.05)。說(shuō)明EGCG對(duì)正常CFs沒(méi)有抑制作用。 4. EGCG對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的大鼠心肌成纖維細(xì)胞活力、增殖和膠原合成的影響 MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),EGCG1×10-7-1×10-5mol/L濃度依賴(lài)性的抑制(?)AngⅡ誘導(dǎo)的CFs細(xì)胞活力(P0.05或P0.01),Val1×10-6mol/L也具有明顯的抑制作用(P0.01); AngⅡ作用24h后,細(xì)胞3H-TdR和3H-羥脯氨酸的參入量顯著增多,EGCG1×10-7-1×10-5mol/L顯著抑制AngⅡ作用下CFs的增殖能力(P0.05或P0.01), EGCG1×10-6-1×10-5mol/L明顯減少活化CFs膠原的產(chǎn)生(P0.05或P0.01), Val均可以抑偉(?)AngⅡ誘導(dǎo)的CFs增殖和膠原合成(P0.01)。以上結(jié)果提示,EGCG體外對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)的CFs異�；罨�、增殖和膠原合成有顯著恢復(fù)作用。 5. EGCG對(duì)AngⅡ作用下CFs p-arrestin-1和β-arrestin-2表達(dá)水平的影響與其對(duì)細(xì)胞活力影響的相關(guān)性分析 AngⅡ作用下,CFs中P-arrestin-1mRNA的表達(dá)水平顯著升高(P0.01),EGCG1×10-6、1×10-5mol/L顯著恢復(fù)β-arrestin-1mRNA水平(P0.01)。然而,AngⅡ的刺激和EGCG體外給藥均不能影響CFs中β-arrestin-2的蛋白表達(dá)水平(P0.05)。上述研究結(jié)果證實(shí),P-arrestin-1參與了AngⅡ誘導(dǎo)的CFs活化,而β-arrestin-2作用不明顯,且β-arrestin-1也是EGCG發(fā)揮作用的分子靶點(diǎn)之一。將EGCG對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)下CFs活力的影響和β-arrestin-1mRNA水平的影響進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),二者存在顯著地正相關(guān)(R2==0.9304,P=0.0019)。以上結(jié)果提示,EGCG對(duì)CFs活力的抑制作用與減少β-arrestin-1基因表達(dá)有關(guān),β-arrestin-1在CFs的異�；罨锌赡芷鸬酱龠M(jìn)作用。 6.β-arrestin-1在AngⅡ誘導(dǎo)CFs AT1R表達(dá)、細(xì)胞活化、增殖和膠原合成中的作用及EGCG的影響 為進(jìn)一步確定β-arrestin-1在CFs活化中的作用,我們用siRNA沉默CFs中β-arrestin-1的表達(dá),RT-qPCR和western blot法篩選出最佳干擾序列為Sense:5'-AG CCUUCUGUGCUGAGAACTT-3', Anti-sense:5'-GUUCUCAGCACAGAAGGCUTT-3’,該序列可以減少56.7%的β-arrestin-1基因表達(dá)和55%的蛋白表達(dá)。與對(duì)照序列相比,在沉默了β-arrestin-1基因的CFs中加入AngⅡ培養(yǎng)24h,細(xì)胞膜AT1R分布明顯增多(P0.05),對(duì)細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖能力和膠原合成能力的影響明顯減小(分別為P0.01、P0.01和P0.05)；EGCG1×10-5mol／L體外給藥可以進(jìn)一步升高AngⅡ作用下AT1R膜表達(dá)(P0.05),抑制細(xì)胞的活力和增殖能力(P0.05),但對(duì)膠原合成沒(méi)有明顯影響(P0.05)。以上結(jié)果證明,β-arrestin-1調(diào)節(jié)AT1R內(nèi)吞,是參與AngⅡ介導(dǎo)CFs活化過(guò)程的關(guān)鍵分子,也是EGCG發(fā)揮治療作用的重要靶點(diǎn)。 7. EGCG對(duì)Angll作用下CFs中AT1R、β-arrestin-1和Gq表達(dá)的影響 在AngⅡ刺激下,CFs中AT1aR mRNA水平降低(P0.05),EGCG1×10-5mol/L體外給藥可以使其恢復(fù)到接近正常水平,但AT1bR mRNA水平?jīng)]有明顯變化,提不AngⅡ主要通過(guò)影響AT1aR發(fā)揮活化CFs的作用。進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn),AngⅡ誘導(dǎo)的CFs中β-arrestin-1總表達(dá)和胞膜表達(dá)均明顯升高(P0.01),而AT1R,總表達(dá)和胞膜表達(dá)均降低(P0.01),Gq蛋白總表達(dá)減少(P0.01)。EGCG1×10-5mol/L減少β-arrestin-1的總表達(dá)(P0.05)；EGCG1×10-6和1×10-5mol/L不同程度減少β-arrestin-1的胞膜表達(dá)(P0.01和P0.05); EGCG1×10-6和1×10-5mol/L顯著升高AT1R,總表達(dá)和胞膜表達(dá)；然而EGCG對(duì)Gq蛋白的表達(dá)減少?zèng)]有恢復(fù)作用。 8. EGCG對(duì)Angll作用下CFs中p-PKC-delta表達(dá)的影響 與正常細(xì)胞相比,AngⅡ刺激CFs使細(xì)胞漿中p-PKC-delta表達(dá)明顯減少, EGCG1×10-6和1×10-5mol/L體外給藥顯著升高降低的胞漿p-PKC-delta水平,但AngⅡ和EGCG均不能影響胞膜p-PKC-delta的表達(dá)。 結(jié)論 1.細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察和免疫組化法共同證實(shí)用酶消化法分離心室肌組織得到的貼壁細(xì)胞為心肌成纖維細(xì)胞。 2. EGCG體外給藥對(duì)正常CFs的細(xì)胞活力、增殖和膠原合成能力沒(méi)有影響,而對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)下CFs的異�；罨�、增殖和膠原合成有顯著抑制作用。 3.β-arrestin-1是參與AngⅡ介導(dǎo)CFs活化過(guò)程的關(guān)鍵分子,β-arrestin-2未發(fā)揮明顯作用。 4. β-arrestin-1調(diào)節(jié)AT1R內(nèi)吞,在CFs的異�；罨锌赡芷鸬酱龠M(jìn)作用,EGCG對(duì)CFs活力的抑制作用與減少β-arrestin-1表達(dá)、抑制(?)ATIR內(nèi)吞有關(guān)。 5. AngⅡ主要通過(guò)影響AT1aR及其下游信號(hào)通路活化CFs, EGCG通過(guò)抑制β-arrestin-1總表達(dá)和胞膜表達(dá),不同程度的恢復(fù)AT1R下游信號(hào)分子水平,發(fā)揮治療作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R541.6

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10 范延紅,趙連友,王海昌;精氨酸升壓素對(duì)心肌成纖維細(xì)胞膠原合成和一氧化氮合成的影響[J];西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志;2004年02期

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1 王麗萍;鄧秀玲;;K_(Ca)3.1在血管緊張素Ⅱ促進(jìn)大鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖中的作用[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

2 趙麗梅;張巍;王麗萍;鄧秀玲;;K_(Ca)3.1在AGEs誘導(dǎo)的大鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖中的作用[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

3 陳超;杜建海;張幼怡;;β腎上腺素受體經(jīng)cAMP/Epac/PKC信號(hào)通路介導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞分泌IL-6[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

4 柴少虎;王小永;陳志云;安學(xué)勤;沈偉國(guó);;殼聚糖微球?qū)GCG的微膠囊載體作用[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第十三屆膠體與界面化學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];2011年

5 夏子榮;李菊香;周瑞紅;顏素娟;羅偉;程曉曙;吳清華;蘇海;吳延慶;;STAT3、ERK 1/2、PI3-K信號(hào)通路在心肌營(yíng)養(yǎng)素-1致心肌成纖維細(xì)胞增殖中的作用[A];江西省第四次中西醫(yī)結(jié)合心血管學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2008年

6 楊劍;蔣寶泉;孫海嵐;郭靜;劉潔;林欣;;表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯對(duì)高糖促血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)[A];第13屆全國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2011年

7 杜琪珍;沈星榮;蔣迎;;茶葉中EGCG的制備化分離新技術(shù)[A];海峽兩岸茶葉科技學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2000年

8 王曄愷;周吉航;曾芳;周世權(quán);黃燕燕;劉曉光;;EGCG在Hela細(xì)胞中的作用靶點(diǎn)[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

9 程井軍;吳其愷;彭銳;孫國(guó)杰;;電針對(duì)非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝組織氧化及抗氧化狀態(tài)的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十三屆內(nèi)科肝膽病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

10 楊s，

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