發(fā)布時間：2019-05-05 09:16

【摘要】：目的1.調查2015年4月-7月在鄭州市某兒童醫(yī)院住院的手足口病患者的臨床體征、實驗室檢查資料,并比較分析輕、重癥患者實驗室指標的差異,為臨床檢測患者的重癥化提供依據。2.通過描述臨床分離的EV71病毒的病原體分子特征,并分析比較輕、重癥手足口病患者的EV71編碼區(qū)特征的差異性,從病原體的角度探討病原體引起手足口病重癥化的原因。3.探討EV71感染RD細胞后細胞內發(fā)生的氧化應激與細胞因子水平變化的關系。方法1.采用問卷調查對187例手足口病患者的一般情況和實驗室指標進行收集,利用單因素及多因素分析輕、重癥手足口病患者差異分布的實驗室指標。2.從GenBank數據庫收集經全基因組測序的EV71病毒共748株,通過文獻檢索最終篩選有明確臨床特征的共230株。然后通過生物信息學軟件進行230株EV71的分子特征分析,并進行差異位點的統(tǒng)計分析和二級結構及結構域的特點描述。3.通過檢測比較EV71感染RD細胞0h、12h、24h、48h后的細胞內的活性氧水平來判斷氧化應激的發(fā)生,然后通過Westernblot檢測細胞內的磷酸化、未磷酸化NF-kappaB和IkBα的蛋白水平變化,ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清中IL-6和TNF-α等炎性因子的表達。結果1.輕、重癥手足口病患兒的中性細胞比率、淋巴細胞比率、IgM、降鈣素原均隨時間動態(tài)變化(P0.05);中性細胞比率(OR=1.198,P=0.001)、淋巴細胞比率(OR=1.194,P=0.002)、白細胞個數(OR=0.916,P=0.024)、血清鈉離子(OR=0.690,P0.001)是手足口病患兒重癥化結局的影響或預警實驗室指標。2.共搜集到103株輕癥和127株重癥EV71型手足口病病人的病毒,以C4基因型為主,主要分布于亞太地區(qū)。分離于同一時間和地區(qū)的病毒之間的相似性較大,而分離于不同時間和地區(qū)的病毒相似性較小,遺傳距離較遠。輕癥來源的EV71病毒之間的VP1氨基酸序列同源性為96%-100%,重癥來源的病毒之間的VP1氨基酸序列同源性為94-100%,而輕癥和重癥來源的病毒之間同源性為92%-100%;輕、重癥病毒有41個氨基酸差異位點分布有統(tǒng)計學差異(P0.05),P3蛋白區(qū)域變異最大,有26個氨基酸差異位點(P0.001);蛋白質二級結構及非二級結構分別有21和20個氨基酸差異位點的分布,結構域未見差異位點的分布。3.EV71感染RD細胞24h、48h后與0h相比,細胞內活性氧水平的變化有統(tǒng)計學差異(P0.05);而且48h后NF-kappaB被激活轉運到細胞核內部的水平增加(P=0.0394).,與0h組即未感染空白對照組相比,感染12h、24h、48h后RD細胞中的IL-6細胞因子的水平均有明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05).;感染48h后RD細胞中的TNF-α的水平相比較感染0h組有一定的升高,差異具有統(tǒng)計學差異(P0.05).,而感染12h、24h組與感染0h組的TNF-α水平相比沒有統(tǒng)計學差異。結論1.手足口病患者病程中免疫水平處于動態(tài)變化,且影響重癥化結局。2.EV71病毒基因型分布具有時間和地區(qū)分布的差異;輕、重癥病例來源病毒的相似性較低,通過氨基酸替換影響蛋白質的一級、二級結構可影響蛋白質功能的變化。3.EV71感染RD細胞可以誘導細胞產生氧化應激,并可激活NF-kappaB促進細胞因子IL-6、TNF-α的表達。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R725.1

【相似文獻】

相關期刊論文 前1條

1 陳杰;武玲;;手足口病患兒外周血T淋巴細胞亞群及免疫球蛋白水平檢測結果分析[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2014年10期

相關博士學位論文 前1條

1 宋風霞;迷走神經通過α 7nAChR介導的免疫負調節(jié)在重癥EV71感染中的作用探討[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2017年

相關碩士學位論文 前3條

1 何紅芳;TLR3基因多態(tài)性與兒童腸道病毒71型感染的相關性研究[D];青島大學;2017年

2 遲彩霞;腸道病毒71型感染致兒童中樞神經系統(tǒng)損害相關因素分析[D];青島大學;2017年

3 曹宇娟;VP1蛋白A289T變異影響腸道病毒71型感染神經系統(tǒng)的初步研究[D];南方醫(yī)科大學;2017年

，

本文編號：2469449