【摘要】：目的:大腸埃希菌是引起兒童腹腔感染的主要致病菌,近年來隨著抗生素的廣泛應(yīng)用,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的耐藥大腸埃希菌的檢出率呈不斷上升的趨勢。已證實膜孔蛋白的低表達與大腸埃希菌產(chǎn)生耐藥性相關(guān),但未有針對膜孔蛋白具體表達量與耐藥性的相關(guān)研究。本課題主要回顧性分析了天津市兒童醫(yī)院2010年至2016年腹腔感染患兒中ESBLs陽性大腸埃希菌的檢出率及其對常用抗生素的耐藥率,并體外檢測了不同濃度頭孢曲松、拉氧頭孢及亞胺培南對拉氧頭孢敏感的ESBLs陽性大腸埃希菌生長繁殖的影響,測定了在不同濃度拉氧頭孢作用下對拉氧頭孢敏感的ESBLs陽性大腸埃希菌的膜孔蛋白OmpF及OmpC的表達量,以探討膜孔蛋白表達量與耐藥性產(chǎn)生的相關(guān)性。方法:對天津市兒童醫(yī)院2010年至2016年腹腔感染患兒送檢的標(biāo)本進行研究,采用VITEK 2 COMPACT60全自動微生物鑒定儀進行菌株鑒定和藥物敏感試驗,選其中30株對拉氧頭孢敏感的ESBLs陽性大腸埃希菌,在不同濃度(分別為MIC值、1/2MIC值、1/4MIC值、1/8MIC值)頭孢曲松、拉氧頭孢及亞胺培南分別作用0h、12h、24h、36h、48h、60h六個時間點時進行活菌的計數(shù)及MIC值的測定并繪制細菌生長曲線;取不同濃度(分別為MIC值、1/2MIC值、1/4MIC值、1/8MIC值)拉氧頭孢作用于該30株大腸埃希菌,使用反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR方法檢測作用0h、12h、24h、36h、48h、60h六個時間點時膜孔蛋白OmpF mRNA及OmpC mRNA的表達水平。結(jié)果:1.2010年至2016年天津市兒童醫(yī)院腹腔感染患兒臨床分離培養(yǎng)大腸埃希菌共1349株,其中,ESBLs陽性大腸埃希菌的各年的構(gòu)成比分別為:25.10%、21.01%、20.00%、29.89%、31.03%、33.04%、32.33%。經(jīng)過行×列卡方檢驗,結(jié)果提示:2010年至2012年與2013年至2016年腹腔感染患兒中ESBLs陽性大腸埃希菌檢出率之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),呈上升趨勢;2010年至2016年,ESBLs陽性大腸埃希菌對氨芐西林、頭孢曲松、頭孢唑林、頭孢噻肟及頭孢呋辛的耐藥率均大于90%,對阿米卡星、拉氧頭孢、呋喃妥因、亞胺培南、美羅培南及哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率為0%~5%,而對其他抗菌藥物的耐藥率為9%~86.6%;2010年至2012年ESBLs陽性大腸埃希菌對拉氧頭孢的耐藥率與2013年至2016年的耐藥率相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),呈上升趨勢;ESBLs陰性大腸埃希菌對氨芐西林、慶大霉素及復(fù)方新諾明的耐藥率為36.1%~78.4%,對其他抗菌藥物的耐藥率為0%~25.9%。2.高濃度(MIC值、1/2MIC值)的頭孢曲松在用藥的起始36小時內(nèi)對大腸埃希菌有一定的抗菌作用,但在之后的24小時,大腸埃希菌的生長速度有明顯的上升,而低濃度(1/4MIC值、1/8MIC值)的頭孢曲松對大腸埃希菌的抗菌作用則不明顯;約占83%的大腸埃希菌在不同濃度拉氧頭孢作用下,拉氧頭孢濃度越高,抗菌作用越明顯,而剩余17%的大腸埃希菌高濃度(MIC值、1/2MIC值)拉氧頭孢作用組在作用48小時之后的抗菌作用低于低濃度(1/4MIC值、1/8MIC值)拉氧頭孢作用組,其大腸埃希菌的繁殖速度甚至較無抗生素作用的對照組更快;各濃度的亞胺培南均有明顯的抗菌作用,且隨著亞胺培南的濃度的增高,抗菌作用更加明顯。3.約83%大腸埃希菌的OmpF mRNA及OmpC mRNA的表達量在拉氧頭孢作用下未見明顯變化;而剩余17%大腸埃希菌在高濃度(MIC值、1/2MIC值)拉氧頭孢作用48h后,OmpF mRNA及OmpC mRNA呈低表達,但該組大腸埃希菌在低濃度(1/4MIC值,1/8MIC值)拉氧頭孢作用下,OmpF mRNA及OmpC mRNA的表達量均未見明顯改變。結(jié)論:1.ESBLs陽性大腸埃希菌的檢出率呈增高的趨勢,且對常用抗生素表現(xiàn)出較高的耐藥率,對于ESBLs陽性菌株的患兒,可使用的抗生素僅為拉氧頭孢及碳青霉烯類抗生素,但ESBLs陽性的大腸埃希菌對拉氧頭孢的耐藥率也呈現(xiàn)出增高的趨勢,臨床工作中應(yīng)依照體外藥敏試驗結(jié)果合理使用抗生素以減少耐藥菌株的產(chǎn)生。2.臨床分離的ESBLs陽性大腸埃希菌一般對頭孢菌素類抗生素耐藥,可選擇拉氧頭孢作為一線藥物,但部分拉氧頭孢敏感的ESBLs陽性大腸埃希菌(約占17%)在一定濃度(MIC值濃度及1/2MIC值濃度)拉氧頭孢作用48h后對大腸埃希菌的抗菌作用下降,大腸埃希菌對拉氧頭孢產(chǎn)生耐藥性,所以在臨床用藥的過程中,應(yīng)該加強對耐藥菌株的檢測,及時更換抗生素。3.部分拉氧頭孢敏感的ESBLs陽性大腸埃希菌(約占17%)在一定濃度(MIC值濃度及1/2MIC值濃度)作用48h后產(chǎn)生對拉氧頭孢的耐藥性與大腸埃希菌膜孔蛋白OmpF及OmpC的低表達有關(guān),當(dāng)OmpF及OmpC的表達量分別降至0.592及0.232的時候可提示臨床更換碳青霉烯類抗菌藥物。盡早更換碳青霉烯類抗生素,可以減少患兒的痛苦,縮短住院時間,更重要的是可減輕耐藥菌的變異。
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【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R725.1;R446.5

【參考文獻】

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1 韓松濤;曾德鵬;徐梅;譚玉潔;;產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的耐藥機制研究[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2016年12期

2 董輝;鐘利;林茹;趙慧崢;趙志軍;;臨床分離大腸埃希菌多重耐藥菌株與外膜蛋白的相關(guān)研究[J];中國抗生素雜志;2016年05期

3 盧玲玲;鄭國軍;涂斐佩;吳海鷗;;大腸埃希菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥機制研究[J];中國抗生素雜志;2016年04期

4 田陽帆;華春珍;李建平;;408例血培養(yǎng)大腸埃希菌陽性患兒臨床分析[J];臨床兒科雜志;2016年03期

5 楊永弘;劉鋼;;我國兒科常見致病菌抗生素耐藥形勢嚴(yán)峻[J];中華實用兒科臨床雜志;2016年04期

6 唐文明;;注射用拉氧頭孢鈉與甲硝唑注射液配伍的穩(wěn)定性考察[J];抗感染藥學(xué);2015年06期

7 潘玫;陳山;李穩(wěn);劉臣彪;石媛;;大腸埃希菌耐藥特征及質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮耐藥基因分布[J];中國感染與化療雜志;2016年01期

8 Nicholas Delihas;;Discovery and characterization of the first non-coding RNA that regulates gene expression,micF RNA:A historical perspective[J];World Journal of Biological Chemistry;2015年04期

9 李碗芯;孫莉娜;林向民;;革蘭氏陰性細菌外膜蛋白耐藥功能及其抑菌策略研究進展[J];福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2015年06期

10 張娜;張洪濤;肖斌;杜介方;曹青鳳;;多重耐藥菌醫(yī)院感染的研究進展[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);2015年05期

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本文編號：2324019