【摘要】：目的1.探討鈣視網(wǎng)膜蛋白(calretinin,CR)在診斷先天性腸無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥(congenital aganglionosis)即先天性巨結(jié)腸(hirschsprung's disease,HD)中的概率及意義。2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法,觀察對比CR、神經(jīng)元特異性烯醇酶(neuron-specific enolase,NSE)、B細(xì)胞淋巴瘤／白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)在HD病變段及正常腸段腸壁表達(dá)情況,評價其在診斷HD中的臨床價值。方法1.收集我院2008年1月至2014年10月經(jīng)病理檢查蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色確診為HD病例共495例的病案資料,包括鋇劑灌腸(contrast enema,CE)、直腸肛管測壓(anorectal manometry, ARM)、經(jīng)直腸粘膜吸引活檢(rectal suction biopsy,RSB)等結(jié)果,通過上述各項(xiàng)檢查陽性率來比較其在診斷HD中的價值,并分析出現(xiàn)CR陰性結(jié)果原因。2.收集我院2011年6月至2013年11月巨結(jié)腸術(shù)后經(jīng)HE染色確診為HD的手術(shù)標(biāo)本16例,包括HD病變段及近端切緣(即正常腸段),分別對病變段及正常腸段組織切片進(jìn)行CR. NSE、Bcl-2免疫組織化學(xué)染色,計算機(jī)成像系統(tǒng)照相存盤,通過圖像分析軟件(Image-Pro Plus)判定各標(biāo)志物在HD病變段及正常腸段神經(jīng)叢中陽性染色面積百分比。結(jié)果1.495例HD患兒中,435例術(shù)前CE,265例術(shù)前ARM,254例CR檢查,其中術(shù)前經(jīng)RSB112例,術(shù)后142例。CE、ARM及CR診斷陽性率分別為81.1%、90.6%、99.6%,其中CR陽性率術(shù)前為98.2%,術(shù)后達(dá)100%。2.CR在正常腸壁粘膜下及肌間神經(jīng)叢呈陽性反應(yīng),HD病變段粘膜下及肌間神經(jīng)叢呈陰性表達(dá)。NSE、Bcl-2在正常腸壁粘膜下及肌間神經(jīng)叢呈陽性反應(yīng),HD病變段神經(jīng)節(jié)細(xì)胞陰性表達(dá),部分神經(jīng)纖維陽性表達(dá)。3.定量分析：CR染色HID病變段與正常腸段神經(jīng)叢陽性染色面積百分率存在統(tǒng)計學(xué)差異。NSE、 Bcl-2染色HD病變段與正常腸段神經(jīng)叢陽性染色面積百分率無統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論1.診斷HD需依靠病史、典型的臨床表現(xiàn)及輔助檢查,特殊輔助檢查中CR陽性率術(shù)前為98.2%,術(shù)后達(dá)100%。2.CR免疫組化染色可顯示正常腸壁神經(jīng)節(jié)細(xì)胞結(jié)構(gòu),呈陽性表達(dá),HD病變段呈陰性表達(dá),CR可作為診斷HD一項(xiàng)重要的神經(jīng)標(biāo)志物。3.CR可廣泛用于臨床,作為術(shù)前診斷HD的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
[Abstract]:Objective 1. To investigate the probability and significance of calcium retina protein (calretinin,CR) in the diagnosis of (congenital aganglionosis) (congenital megacolon). CR, neuron-specific enolase (neuron-specific enolase,NSE), B cell lymphoma / leukemia-2) was observed by immunohistochemical staining. To evaluate the clinical value of Bcl-2 in the diagnosis of HD. Method 1. From January 2008 to October 2014, we collected 495 cases of HD diagnosed by hematoxylin eosin (hematoxylin-eosin,HE) staining, including barium enema (contrast enema,CE), (anorectal manometry, ARM), of rectal anus manometry. The results of transrectal mucosal aspiration biopsy (rectal suction biopsy,RSB) were used to compare the positive rate of the above examinations in the diagnosis of HD, and to analyze the causes of CR negative results. 2. From June 2011 to November 2013, 16 cases of Hirschsprung's disease diagnosed as HD by HE staining were collected, including the lesion segment of HD and the proximal incisal margin (that is, the normal intestinal segment). The sections of the pathological segment and the normal segment of the intestine were sections of CR. respectively. NSE,Bcl-2 immunohistochemical staining and computer imaging system were used to determine the percentage of positive staining area in HD lesion segment and normal intestinal segment by image analysis software (Image-Pro Plus). Results among the 1.495 cases of HD, 435 cases of preoperative CE,265 were examined by ARM,254 before operation CR, including RSB112 before operation and 142 cases after operation. The positive rates of CE,ARM and CR were 81.1% and 90.6%, 99.6%, respectively. The positive rate of CR was 98.2% before operation. The positive rate of 100%.2.CR was positive in submucous and myenteric plexus of normal intestinal wall after operation. The expression of NSE, was negative in submucous and myenteric plexus of HD lesions. The expression of Bcl-2 was positive in submucous and myenteric plexus of normal intestinal wall, negative in ganglion cells of HD lesion, and positive in some nerve fibers. Quantitative analysis: there was statistical difference in the percentage of positive staining area between the lesion segment of HID and the normal segment of intestine by CR staining, but there was no significant difference in the percentage of positive staining area between the lesion segment of HD and the normal segment of intestine by NSE, Bcl-2 staining. Conclusion 1. The diagnosis of HD depends on the history, typical clinical manifestation and auxiliary examination. The positive rate of CR in special auxiliary examination is 98.2 before operation. The 100%.2.CR immunohistochemical staining after operation can show the normal ganglion cell structure and positive expression. CR can be used as an important neural marker in the diagnosis of HD, and 3.CR can be widely used in clinical practice as the "gold standard" for the diagnosis of HD before operation.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R726.5

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本文編號：2302365