發(fā)布時(shí)間：2018-10-30 13:38

【摘要】：背景 隨著產(chǎn)科技術(shù)的不斷提高及新生兒重癥監(jiān)護(hù)的廣泛推廣,越來(lái)越多的早產(chǎn)兒得以存活,然而,早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)病率也隨之提高。腦組織發(fā)育的不成熟性及易損性是早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)生的根本原因,腦室周圍白質(zhì)軟化(periventricular leukomalacia, PVL)是早產(chǎn)兒腦損傷的重要表現(xiàn)形式之一,并可導(dǎo)致腦性癱瘓、癲癇、精神發(fā)育遲緩、認(rèn)知障礙等嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺型。早產(chǎn)兒腦損傷不僅嚴(yán)重地影響患兒的生命質(zhì)量,而且使患兒家庭備受精神和經(jīng)濟(jì)的雙重折磨。因此,提高早產(chǎn)兒腦損傷的早期診斷,并采取行之有效的早期干預(yù)措施極其重要。如何通過(guò)早期干預(yù)來(lái)減少早產(chǎn)兒腦損傷后遺癥的發(fā)生率已成為眾多臨床醫(yī)生及科研人員的探索焦點(diǎn)。 目的 頭皮位點(diǎn)藥物注射(Scalp Sites of Medicine Injection)是治療腦損傷的有效方式之一,但其在早產(chǎn)兒腦損傷中的療效有待進(jìn)一步研究,其作用機(jī)制目前亦不明確。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)成功建立宮內(nèi)感染早產(chǎn)鼠的動(dòng)物模型,并檢測(cè)干預(yù)前后腦組織中髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)的表達(dá),及評(píng)價(jià)對(duì)神經(jīng)行為學(xué)的影響,來(lái)探討頭皮位點(diǎn)藥物注射對(duì)宮內(nèi)感染早產(chǎn)鼠的腦保護(hù)作用及相關(guān)的作用機(jī)制,為頭皮位點(diǎn)藥物注射治療早產(chǎn)兒腦損傷提供相關(guān)的理論依據(jù)。 材料與方法 清潔級(jí)Wistar大鼠,雌性(約90日齡,體重250±20g)50只,雄性(約90日齡,體重280±20g)25只,于17：00按雌雄比2：1合籠,次日晨8：00取陰道分泌物涂片鏡檢,以檢測(cè)到精子為受孕第0天。隨機(jī)選取37只孕鼠于孕16d、17d腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS),劑量為350μg.Kg-1,制備宮內(nèi)感染模型,5只對(duì)照組孕鼠腹腔注射同等容積的9g.L-1鹽水。其中,孕22d前分娩的仔鼠為早產(chǎn)鼠。 將LPS組早產(chǎn)鼠隨機(jī)分為三組：A組：于生后第7d始給予頭皮位點(diǎn)藥物注射(VitB1、VitB12)進(jìn)行干預(yù)治療；B組：于生后第7d始給予豐富的環(huán)境干預(yù)；C組：不予任何干預(yù)。各組仔鼠于生后第7d,25d分別通過(guò)免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)腦組織MBP、NSE、GFAP蛋白的陽(yáng)性表達(dá),并于生后第25d進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)檢測(cè)。 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果以χ±S表示,各組數(shù)據(jù)分別采用t檢驗(yàn),單因素方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn),以a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果 1HE染色結(jié)果 LPS組共有14只孕鼠孕22d前分娩,為早產(chǎn)鼠,取其胎盤(pán)組織進(jìn)行HE染色,可見(jiàn)胎盤(pán)組織明顯充血水腫,并有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；9g.L-1鹽水組5只母鼠所產(chǎn)仔鼠均為足月鼠,胎盤(pán)組織HE染色未見(jiàn)血管充血及炎癥反應(yīng)。 2免疫組化結(jié)果 7日齡LPS組早產(chǎn)仔鼠腦組織中MBP蛋白的表達(dá)低于對(duì)照組(P0.01),NSE蛋白的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P0.05),海馬齒狀回及大腦皮質(zhì)GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目均高于對(duì)照組(P0.05；P0.05)；25日齡仔鼠中,腦組織MBP表達(dá)A組高于C組(P0.01),B組高于C組(P0.01),NSE表達(dá)A組高于C組(P0.01),B組高于C組(P0.01),GFAP陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目海馬齒狀回B組C組(P0.05),大腦皮質(zhì)A組C組(P0.05),B組C組(P0.01),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果 懸吊試驗(yàn)得分：A組高于C組(P0.01),B組高于C組(P0.01);曠野試驗(yàn)得分：A組及B組均高于C組(P0.01；P0.01),斜坡實(shí)驗(yàn)中B組實(shí)驗(yàn)時(shí)間最短,A組所用時(shí)間明顯短于C組(P0.01),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 1.宮內(nèi)感染脂多糖可成功誘發(fā)孕鼠早產(chǎn)。 2.頭皮位點(diǎn)藥物注射對(duì)宮內(nèi)感染早產(chǎn)鼠具有腦保護(hù)作用。 3.頭皮位點(diǎn)藥物注射腦保護(hù)作用機(jī)制為通過(guò)增加腦組織中MBP、NSE蛋白的表達(dá)及抑制GFAP的過(guò)度表達(dá)發(fā)揮腦保護(hù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R722.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2300153