本文選題：維甲酸 + 神經(jīng)管畸形　； 參考：《中南大學》2012年碩士論文

【摘要】：目的： 通過孕期一次性投入大劑量維生素A類物——全反式維甲酸,建立SD大鼠胎鼠的神經(jīng)管畸形模型,觀察E20天實驗組及對照組胎鼠發(fā)生先天畸形的種類,幾率,記錄其身長、體重進行比較,并進行病理組織切片,比較觀察其組織結構的改變和缺損,說明全反式維甲酸對胚胎發(fā)育的限制性和毒性作用以及其致畸性；取實驗組及對照組E12, E13, E14, E15, E16天胚胎的神經(jīng)管,檢測RARamRNA及Hoxd4mRNA的表達,了解神經(jīng)管畸形形成過程中RARa及Hoxd4的異常表達,探討神經(jīng)管畸形發(fā)生的可能機制,為神經(jīng)管畸形的預防提供一定的理論依據(jù)。 方法： 1.胎鼠神經(jīng)管畸形模型的建立：正常懷孕的SD大鼠隨機分為兩組：實驗組于大鼠孕10天時,一次性給予濃度為20mg/ml,劑量為120mg/kg的atRA,所用溶劑為食用橄欖油；對照組于大鼠孕10天時給予同樣體積的橄欖油。于孕20天剖宮取胎,觀察胚胎的先天畸形情況,記錄其身長、體重及數(shù)量。 2.病理切片：取實驗組有明顯脊柱裂的胎鼠的腰骶部及其以下組織及對照組正常胎鼠的腰骶部及其以下組織,常規(guī)石蠟包埋、HE染色。觀察其病理形態(tài)的變化。 3. RARα及Hoxd4mRNA的檢測：取實驗組及對照組12,13,14,15,16天胚胎的神經(jīng)管組織,利用RT-PCR測定RARamRNA及Hoxd4mRNA的表達,了解其在胚胎發(fā)育過程中的表達。 結果： 1.神經(jīng)管畸形動物模型及其伴發(fā)畸形：E20天實驗組10只孕鼠胎鼠接受統(tǒng)計,胚胎總數(shù)109只,其中死胎5只(4.59%),吸收胎6只(5.50%),神經(jīng)管畸形胎鼠65只(66.33%),類型均為脊柱裂,未發(fā)現(xiàn)腦膨出、無腦兒等其他類型的神經(jīng)管畸形,有神經(jīng)管畸形的胎鼠均伴有無尾無肛門畸形。對照組10只孕鼠,共獲得胎鼠125只,無死胎及吸收胎,胎鼠外觀均未出現(xiàn)上訴畸形。實驗組與對照組在妊娠第20天時身長及體重各數(shù)據(jù)經(jīng)t檢驗分析,差異有統(tǒng)計學意義(P0.001)。實驗組均較對照組發(fā)育差,身長、體重均低于對照組。切片形態(tài)學觀察：對照組骶、尾椎發(fā)育良好,脊髓形態(tài)正常,灰白質(zhì)分布清楚,灰質(zhì)呈蝶形分布,被覆皮膚連續(xù)；實驗組胚胎中則可見腰骶部脊柱裂,脊髓脊膜膨出、脊髓形態(tài)改變,灰白質(zhì)分布紊亂,灰質(zhì)蝶形區(qū)消失,多見炎癥細胞侵潤,被覆皮膚不連續(xù)。 2.維甲酸誘導大鼠神經(jīng)管畸形胚胎中RARamNR及Hoxd4mNRA表達的研究：對照組RARamRNA在E12天開始測得表達,到E14天時處于表達高峰,E15天開始下降,E16天時降至E13天水平；實驗組中RARamRNA在E12天時就處于表達高峰,之后表達量逐漸下降,E12,E13,E14天表達量均高于對照組同一時段表達量(P=0.0000.05),E15天表達量稍低于對照組同一時段表達水平(P=0.0010.05),至E16天時表達量降至對照組E16天水平(P=0.3110.05)。對照組Hoxd4mRNA在E12天開始測得表達,之后表達量逐漸增高,到E15天時處于表達高峰,之后表達下降,E16天時降至E13天水平；實驗組Hoxd4mRNA在E12天就處于表達高峰,E12,E13,E14天表達量均高于對照組同一時段的表達量(P=0.0000.05),到E15、E16天時,表達量稍低于對照組同一時段水平(P=0.0000.05)。 結論： 1.孕期特定時間一次性投入大劑量的全反式維甲酸可限制胚胎的生長發(fā)育,并造成神經(jīng)管畸形在內(nèi)的多種畸形。 2. RARa及Hoxd4基因的異常高表達可能是導致SD大鼠胎鼠神經(jīng)管畸形發(fā)生的原因之一。
[Abstract]:Objective:
A model of neural tube malformation in SD rats was established through a one-time infusion of a large dose of vitamin A, all trans retinoic acid. The types of congenital malformation of fetal rats in E20 days and control groups were observed, the chances were recorded, the body weight was recorded and the body weight was compared, and the changes of the tissue structure were observed and compared. The limitation and toxicity of all trans retinoic acid on embryonic development and its teratogenicity; the neural tube of E12, E13, E14, E15, E16 days embryos of experimental and control groups was taken to detect the expression of RARamRNA and Hoxd4mRNA, to understand the abnormal expression of RARa and Hoxd4 during the formation of neural tube malformation, and to explore the possibility of the occurrence of neural tube malformation. The mechanism provides a theoretical basis for the prevention of neural tube defects.
Method錛，

本文編號：1932856