發(fā)布時間：2018-05-12 02:04

  本文選題：幽門螺桿菌 + 消化性潰瘍　； 參考：《蘇州大學》2012年碩士論文

【摘要】：目的：比較幽門螺桿菌(Hp)感染(有／無消化性潰瘍)及對照組患兒外周血單個核細胞(PBMC)及胃竇黏膜細胞B7-1、B7-2和CD28的表達水平,探討幽門螺桿菌感染在消化性潰瘍中的作用機理。 方法：選擇有消化道癥狀的患兒共60例,均做胃鏡檢查并予胃竇部位活檢,同時取血標本。共分三組,潰瘍組(A組)：有消化道癥狀,胃鏡檢查有消化性潰瘍,Hp(+),20例；無潰瘍組(B組)：有消化道癥狀,胃鏡檢查無消化性潰瘍,Hp(+),20例;對照組(C組)：有消化道癥狀,胃鏡檢查基本正常,Hp(-),20例。用半定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)和免疫組化分別測定PBMC、胃竇黏膜細胞B7-1、B7-2和CD28mRNA及胃竇黏膜細胞B7-1、B7-2和CD28蛋白的表達水平,比較不同組之間上述指標有無差異。最后采用線性回歸分析法對B7-1、B7-2和CD28mRNA及相應蛋白表達之間進行相關性分析。 結果：1、免疫組化染色顯示B7-1、B7-2主要表達于胃竇黏膜上皮細胞及固有層單個核細胞,CD28主要表達于固有層單個核細胞。HP感染患兒(A組及B組)胃竇黏膜固有層中單個核細胞數(shù)量較C組增加。從表達強度看,A組及B組患兒胃竇粘膜B7-1、CD28蛋白較C組增加(P0.05),但在A組及B組之間比較無差異(P0.05);而三組患兒之間胃竇粘膜B7-2蛋白染色均無差異(P0.05)。 2、RT-PCR法顯示,A組及B組患兒胃竇黏膜細胞中B7-1mRNA和CD28mRNA的表達均高于C組(P0.05),但在A組及B組之間上述兩分子的表達比較無差異(P0.05)；A組、B組及C組之間胃竇黏膜細胞B7-2mRNA表達均無差異。 3、RT-PCR法顯示,A組、B組及C組之間PBMC中B7-1、B7-2和CD28mRNA表達均無差異(P0.05)。 4、相關性分析顯示,胃竇黏膜局部三種協(xié)同刺激分子在轉錄水平(RT-PCR)與對應的蛋白表達水平(免疫組化)上均存在著一定的正相關關系。 結論：1、免疫組化顯示,Hp感染后患兒胃竇黏膜中存在著B7-1、B7-2及CD28三種蛋白的表達,說明機體免疫系統(tǒng)有針對Hp產(chǎn)生特異性的免疫應答。 2、兒童Hp感染后在轉錄及蛋白水平均存在胃竇黏膜局部B7-1及CD28上調(diào),而B7-2無明顯變化,提示局部細胞免疫可能參與了感染后黏膜的損傷過程。 3、兒童Hp感染后PBMC中并未發(fā)現(xiàn)B7-1mRNA、B7-2mRNA及CD28mRNA的明顯變化,說明至少在兒童期,免疫反應主要在胃竇黏膜局部,而對全身的影響相對不大。
[Abstract]:Objective: to compare the expression levels of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and gastric antral mucosal cells (B7-1TB7-2 and CD28) in patients with Helicobacter pylori (HP) infection (with or without peptic ulcer) and to explore the mechanism of Helicobacter pylori infection in peptic ulcer. Methods: 60 children with digestive tract symptoms were examined by gastroscopy, biopsy of gastric antrum and blood samples were taken. The ulcer group was divided into three groups: group A, with digestive tract symptoms and gastroscopy with peptic ulcer HP (n = 20); group B, without ulceration, with digestive tract symptoms and gastroscopy with no peptic ulcer; group C, control group, with digestive tract symptoms. The gastroscopy was normal in 20 cases. Semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunohistochemistry were used to detect the expression levels of B7-1B7-2 and CD28mRNA in gastric antral mucosal cells, and the expression levels of B7-1OB7-2 and CD28 in gastric antral mucosal cells. Finally, linear regression analysis was used to analyze the correlation between B7-1, B7-2, CD28mRNA and the corresponding protein expression. Results the immunohistochemical staining showed that B7-1mB7-2 was mainly expressed in gastric antral mucosal epithelial cells and lamina propria mononuclear cells. CD28 was mainly expressed in lamina propria mononuclear cells (group A and group B). The number of cells in group C was higher than that in group C. Compared with group C, the expression intensity of B7-1 + CD28 protein in gastric antral mucosa of group A and group B was higher than that of group C, but there was no difference between group A and group B, but there was no difference in the staining of B7-2 protein between group A and group B. there was no difference in B7-2 protein staining between group A and group B (P 0.05). 2RT-PCR showed that the expression of B7-1mRNA and CD28mRNA in gastric antral mucosa was higher in group A and B than that in group C, but there was no difference between group A and group B in the expression of B7-2mRNA in gastric antral mucosa. There was no difference between group A and group B in the expression of B7-2mRNA in gastric antral mucosa. 3RT-PCR showed that there was no difference in the expression of B7-1, B7-B7-2 and CD28mRNA in PBMC between group A, group B and group C, and there was no difference between group A and group C in the expression of B7-1B7-2 and CD28mRNA. 4. The correlation analysis showed that there was a positive correlation between the transcription level of RT-PCR and the corresponding protein expression level (immunohistochemistry) of three kinds of co-stimulatory molecules in gastric antrum mucosa. Conclusion the expression of B7-1, B7-B7-2 and CD28 in antral mucosa of children with HP infection was detected by immunohistochemistry, indicating that the immune system has a specific immune response to HP. 2. B7-1 and CD28 were up-regulated in gastric antral mucosa after HP infection, but B7-2 had no obvious change, suggesting that local cellular immunity might be involved in the process of mucosal injury after infection. 3. No significant changes of B7-1mRNA-B7-2 mRNA and CD28mRNA were found in PBMC after HP infection in children, indicating that the immune response was mainly localized in gastric antral mucosa at least in childhood, but had little effect on the whole body.
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R725.1

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本文編號：1876618