本文選題：Lowe綜合征 + OCRL��； 參考：《大連醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：第一部分Lowe綜合征八例臨床及基因分析目的分析和總結我院就診的8例符合Lowe綜合征臨床診斷的患兒的臨床表現(xiàn)及基因型特征,旨在提高對該疾病的認識。方法選擇我院2011年11月至2016年6月份收治的臨床診斷為Lowe綜合征的8例患兒,回顧性總結、分析這些患兒的臨床表現(xiàn)、實驗室檢查結果以及基因檢測結果。結果該8例患兒均為男孩,均以先天性白內障為首發(fā)癥狀,但至發(fā)現(xiàn)尿檢異常及確診為Lowe綜合征的時間間隔較長,為1~44月,平均(16.5±17.1)月。8例患兒除了眼部病變外,均合并有肌張力減退、運動發(fā)育遲緩、小分子蛋白尿和高鈣尿的表現(xiàn),都伴有生長發(fā)育落后的癥狀;除了上述這些表現(xiàn)外,2/8(2例)的患兒合并嚴重的先天性青光眼,7/8(7例)合并智力下降,2/8(2例)合并行為障礙表現(xiàn),2/8(2例)合并驚厥表現(xiàn),6/8(6例)頭顱MRI結果顯示異常,6/8(6例)合并氨基酸尿,2/8(2例)合并腎小管酸中毒表現(xiàn),1/8(1例)合并低鉀血癥,2/8(2例)合并佝僂病表現(xiàn),5/8(5例)合并骨質缺乏,2/8(2例)合并面部畸形。其中7例通過外顯子捕獲-第二代測序法行基因測序,檢測結果發(fā)現(xiàn)6例患兒存在OCRL基因突變,分別為R361G、L423W、Q388P、N373I、R695X及I366N,包括5個錯義突變及1個無義突變;1例患兒未檢出OCRL基因突變,但卻發(fā)現(xiàn)存在SLC4A1基因c.16-15GA位點的雜合突變;除R695X外,均為之前未報到過的新突變。結論1.Lowe綜合征患兒表現(xiàn)為以眼睛、神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟異常為主的多系統(tǒng)的病變。2.患兒多以先天性白內障等眼部病變?yōu)槭装l(fā)表現(xiàn),但至發(fā)現(xiàn)尿檢異常并確診Lowe綜合征的間隔時間較長,因而提早確診時間對患兒的診治方面可能有重要的意義。3.部分臨床表現(xiàn)為Lowe綜合征的患兒未檢出合并OCRL基因突變,故推測OCRL可能不是導致Lowe綜合征的唯一致病基因。第二部分CLCN5突變基因轉染293細胞實驗目的我院近年來收治了多例Dent病患兒,掌握了Dent病的診治方法,現(xiàn)已知該病為一種伴X隱性遺傳病,多數(shù)患兒由CLCN5基因突變致病,但目前發(fā)病機制仍不十分明確。在診治過程中我們也發(fā)現(xiàn)2例CLCN5基因突變的Dent病患兒的表型及基因突變各不相同,1例尿蛋白水平相對不高,另1例則表現(xiàn)為大量蛋白尿,基因檢測結果分別為CLCN5基因的IVS3-2AG及L594fsX595突變。為進一步研究Dent病的發(fā)病機制,我們設計了一個實驗來探索這兩個突變基因所導致的突變效應,并在前期工作中合成了含這兩個突變基因的質粒。方法利用SYBR染料法將含有2個CLCN5突變基因IVS3-2AG和L594fsX595及CLCN5野生型基因的質粒轉染至293細胞中,取這些細胞中目的基因Megalin、Cubilin、NHE3、V-H+-ATPase的mRNA,反轉錄為DNA,通過QPCR技術擴增并檢測這4個目的基因的相對表達量。將含有2個突變基因的293細胞中上述4個目的基因的相對表達量分別與含CLCN5野生型基因的293細胞中的作對比,從而初步推斷基因的突變效應。結果含有野生型CLCN5基因及IVS3-2AG、L594fsX595突變基因的質粒成功轉染至293細胞中。含IVS3-2AG突變基因的293細胞中Megalin、Cubilin、NHE3、V-H+-ATPase基因的相對表達量與野生型相比無明顯差別,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);而含L594fsX595突變基因的293細胞中Megalin和V-H+-ATPase基因的相對表達量減少,與野生型對比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),而Cubilin和V-H+-ATPase基因的相對表達量與野生型相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論1.野生型CLCN5及IVS3-2AG、L594fsX595突變CLCN5基因成功轉染至293細胞中。2.L594fsX595突變導致Megalin、V-H+-ATPase的表達量減少,可能為引起小分子蛋白尿的原因之一。
[Abstract]:The first part of Lowe syndrome: analysis of eight cases clinical analysis and gene and summarize our hospital 8 patients with clinical diagnosis of Lowe syndrome with clinical manifestations and genotype characteristics, aims to enhance the understanding of the disease. Methods select 8 patients of clinical diagnosis in our hospital from November 2011 to 2016 June were treated for Lowe syndrome the retrospective analysis of clinical manifestations, these children, laboratory results and gene detection results. Results the 8 cases were boys, with congenital cataract is the first symptom, but to find abnormal urine and diagnosed as Lowe syndrome in a longer time interval, for 1~44 months, average (16.5. 17.1).8 cases in addition to eye disease, are associated with hypotonia, motor retardation, small molecule protein and urinary calcium, are associated with growth retardation symptoms; in addition to these tables 鐜板,2/8(2渚，

本文編號：1750021