本文選題：熒光定量多聚酶鏈反應(yīng)　切入點(diǎn)：腸道菌群　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分健康嬰兒腸道菌群檢測(cè)及與分娩和喂養(yǎng)方式的關(guān)系 目的了解健康嬰兒腸道菌群的變化,分析分娩方式和喂養(yǎng)方式對(duì)腸道菌群的影響。 方法收集37例健康嬰兒糞便(其中陰道分娩21例,剖宮產(chǎn)16例；母乳喂養(yǎng)15例,人工喂養(yǎng)22例),提取糞便中細(xì)菌DNA并測(cè)量A260值；應(yīng)用SYBR Green I Real-time FQ-PCR測(cè)定糞便中雙歧桿菌、乳酸桿菌及大腸桿菌3種代表菌的數(shù)量。 結(jié)果陰道分娩與剖宮產(chǎn)嬰兒相比較,母乳喂養(yǎng)與人工喂養(yǎng)嬰兒相比較,糞便中細(xì)菌DNA-A260值和3種代表菌數(shù)量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。健康對(duì)照組糞便中3種細(xì)菌數(shù)(拷貝數(shù)/g濕便)的對(duì)數(shù)值分別為雙歧桿菌9.49±0.59；乳酸桿菌8.58±0.32；大腸桿菌6.87±0.67。 結(jié)論健康嬰兒糞便中雙歧桿菌及乳酸桿菌數(shù)量占優(yōu)勢(shì),大腸桿菌的數(shù)量明顯較其少；不同的分娩方式、喂養(yǎng)方式對(duì)嬰兒期腸道菌群無影響。 第二部分膽汁淤積性肝病患兒腸道菌群改變及與相關(guān)細(xì)胞因子的關(guān)系 目的研究膽汁淤積性肝病患兒腸道菌群改變；采用益生菌制劑進(jìn)行干預(yù)治療,了解其對(duì)該病治療效果的影響及其相關(guān)細(xì)胞因子的變化。 方法(1)采用SYBR Green I Real-time FQ-PCR法檢測(cè)膽汁淤積性肝病患兒腸道細(xì)菌,比較其與健康對(duì)照組腸道3種代表細(xì)菌的數(shù)量；比較益生菌干預(yù)和非干預(yù)組腸道3種代表細(xì)菌的數(shù)量在治療前后變化。(2)檢測(cè)病例組治療前后肝功能、血氨水平、膽固醇等肝臟功能指標(biāo)；同時(shí)采用ELISA法測(cè)定病例組血清TGF-β1、TNF-α和IL-6三種細(xì)胞因子水平。 結(jié)果(1)與健康對(duì)照組比較,膽汁淤積性肝病患兒糞便中雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量顯著下降,大腸桿菌數(shù)量明顯上升；(2)益生菌干預(yù)組糞便中雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量顯著上升,大腸桿菌數(shù)量減少；(3)治療后肝功能指標(biāo)有所下降,TNF-α及IL-6水平只在治療后的干預(yù)組中有下降,且血氨水平在治療后的干預(yù)組中下降更明顯；相關(guān)分析表明腸道菌群B/E值與IL-6水平呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論膽汁淤積性肝病患兒存在明顯的菌群紊亂,腸道菌群紊亂可能影響血清細(xì)胞因子的表達(dá)；微生態(tài)制劑干預(yù)治療對(duì)膽汁淤積性肝病組腸道菌群恢復(fù)和平衡免疫功能有一定的作用。
[Abstract]:The relationship between intestinal microflora and delivery and feeding methods in healthy infants. Objective to investigate the changes of intestinal flora in healthy infants and to analyze the effect of delivery and feeding on intestinal flora. Methods the feces of 37 healthy infants (including 21 cases of vaginal delivery, 16 cases of cesarean section), 15 cases of breast-feeding and 22 cases of artificial feeding were collected to extract bacterial DNA from feces and measure A260 value. SYBR Green I Real-time FQ-PCR was used to measure bifidobacterium in feces. The number of Lactobacillus and Escherichia coli. Results the vaginal delivery was compared with the cesarean section, and the breast-feeding was compared with the artificial feeding. The logarithmic values of the three bacteria (copy number / g wet stool) were 9.49 鹵0.59 for Bifidobacterium, 8.58 鹵0.32 for Lactobacillus and 6.87 鹵0.67 for Escherichia coli, respectively. Conclusion Bifidobacterium and Lactobacillus are dominant in feces of healthy infants, and the number of Escherichia coli is less than that of E. coli, but different delivery and feeding methods have no effect on intestinal flora in infancy. The change of intestinal flora and its relationship with cytokines in children with cholestatic liver disease. Objective to study the changes of intestinal flora in children with cholestatic liver disease, and to investigate the effect of probiotics on the therapeutic effect of cholestatic liver disease and the changes of related cytokines. Methods SYBR Green I Real-time FQ-PCR was used to detect intestinal bacteria in children with cholestatic liver disease. The liver function, blood ammonia level, cholesterol and so on were measured before and after treatment by comparing the number of three representative bacteria in the intestinal tract of probiotic intervention group and non-intervention group before and after treatment. Serum levels of TGF- 尾 1 TNF- 偽 and IL-6 were measured by ELISA method. Results 1) compared with the control group, the number of Bifidobacterium and Lactobacillus in the feces of children with cholestatic liver disease decreased significantly, the number of Escherichia coli increased significantly.) in the probiotics intervention group, the number of bifidobacterium and Lactobacillus increased significantly in the feces of children with cholestatic liver disease. After treatment, the levels of TNF- 偽 and IL-6 decreased only in the intervention group, and the blood ammonia level decreased more obviously in the intervention group after treatment. Correlation analysis showed that there was a significant negative correlation between the B / E value of intestinal flora and the level of IL-6. Conclusion Children with cholestatic liver disease have obvious microflora disorder, and intestinal microflora disorder may affect the expression of serum cytokines. The intervention of microecological preparation has certain effect on the recovery of intestinal flora and the balance of immune function in patients with cholestatic liver disease.
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R725.7

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