本文選題：分節(jié)絲狀菌　切入點(diǎn)：16SrDNA　出處：《浙江大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景：分節(jié)絲狀菌(Segmented Filamentous Bacterium, SFB)一種革蘭氏陽(yáng)性、產(chǎn)芽孢厭氧菌,廣泛存在于多種脊椎動(dòng)物及無(wú)脊椎動(dòng)物腸道內(nèi)的一類(lèi)形態(tài)結(jié)構(gòu)特異的“原著”細(xì)菌。這種細(xì)菌與宿主的免疫成熟息息相關(guān),它能促進(jìn)宿主分泌型免疫球蛋(sIgA)的分泌、調(diào)控T細(xì)胞的分化和平衡、誘導(dǎo)Th17細(xì)胞的分化、抵抗外來(lái)致病菌的感染。由于SFB難以在體外培養(yǎng),所以其研究結(jié)果多通過(guò)單一定植的動(dòng)物模型,如大鼠、小鼠、雞等獲得。通過(guò)單一定植SFB的動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)SFB能明顯促進(jìn)腸腔sIgA分泌、誘導(dǎo)Th17細(xì)胞的分化,兩者均是局部腸道黏膜免疫屏障重要功能分子。sIgA能抑制腸道內(nèi)的細(xì)菌黏附腸道黏膜表面,中和腸道內(nèi)的毒素、酶和病毒,對(duì)一些抗原物質(zhì)具有封閉作用,同時(shí)具有對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒作用和ADCC作用(抗體依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用)；Th17細(xì)胞在適當(dāng)濃度下能阻止黏膜表面免受細(xì)菌及真菌的感染。同時(shí)SFB的定植能通過(guò)調(diào)控Treg細(xì)胞的分化,防止Th17細(xì)胞過(guò)度分化引起的自身免疫性反應(yīng)。多項(xiàng)研究表明SFB在動(dòng)物(如小鼠、大鼠和雞)腸道中定植存在年齡依賴(lài)關(guān)系,但SFB在人類(lèi)腸道中的定植、分布及對(duì)宿主免疫系統(tǒng)影響的研究非常少。目的：比較各年齡段兒童腸道SFB分布特征；通過(guò)腸液中sⅠgA測(cè)定及回腸末端黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞及Th細(xì)胞分化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的免疫組化檢測(cè),初步分析人腸道SFB定植與腸道黏膜免疫關(guān)系。方法：1.兒童腸道SFB年齡分布特征：2013年11月—2014年1月期間在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院住院的非胃腸道疾病、非感染性疾病的外科疾病患兒作為研究對(duì)象,排除抗生素及微生態(tài)制劑的應(yīng)用。共收集177例患兒的新鮮糞便,通過(guò)提取糞便DNA,從GenBank中獲取SFB序列,根據(jù)細(xì)菌的16SrRNA/DNA特異性基因序列,設(shè)計(jì)其特異性引物,進(jìn)一步通過(guò)real-time PCR定量分析確定是否存在SFB,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2.SFB與腸黏膜免疫關(guān)系初步研究：2012年10月—2014年6月期間在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院行腸鏡檢查未發(fā)現(xiàn)異常的患兒作為研究對(duì)象。收集回盲部新鮮腸液,測(cè)定腸液中sⅠgA濃度,并行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；對(duì)腸鏡檢查時(shí)能取得回腸末端黏膜標(biāo)本的患兒,通過(guò)免疫組化方法,測(cè)定回腸末端黏膜IL-17A細(xì)胞、上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量,及與Thl細(xì)胞、Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞等細(xì)胞分化相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá),初步分析SFB與腸黏膜免疫功能的關(guān)系。結(jié)果：1.人腸道SFB年齡分布特征：177例患兒糞便中檢測(cè)到SFB 34例,陽(yáng)性率為19.2%；不同年齡者SFB陽(yáng)性率不同,0-1歲、1-2歲、2-3歲、3-4歲、4-5歲、5-6歲、6-7歲、7-15歲依次為40.0%、47.4%、31.6%、15.0%、11.8%、13.3%、15.4%、3.7%,根據(jù)Spearman相關(guān)性檢測(cè),近似值T=-5.095,P0.001,顯示SFB主要定植于3歲以?xún)?nèi)的嬰幼兒腸道。2.人腸道SFB與sIgA關(guān)系：SFB陽(yáng)性組24例和SFB陰性組23例,結(jié)果顯示SFB陽(yáng)性患兒的腸液sIgA濃度明顯高于SFB陰性患兒,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.人腸道SFB與腸黏膜免疫細(xì)胞及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的關(guān)系：SFB陽(yáng)性組12例和SFB陰性組11例,結(jié)果顯示SFB陽(yáng)性組回腸末端黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量與SFB陰性組的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而SFB陽(yáng)性組回腸末端黏膜IL-17A細(xì)胞數(shù)量明顯低于SFB陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；與Th1細(xì)胞分化相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子T-bet的表達(dá)、與Treg細(xì)胞的分化有關(guān)轉(zhuǎn)錄因子FOXP3的表達(dá)、及與Thl7細(xì)胞分化有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子ROR-yt的表達(dá)在SFB陽(yáng)性組與SFB陰性組的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：人SFB主要在3歲以?xún)?nèi)嬰兒腸道定植；人SFB可促使腸道分泌sIgA;人SFB腸道定植對(duì)兒童免疫功能的影響可能與動(dòng)物SFB有區(qū)別。
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【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R725.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 戴娟;張光波;高楠;奚沁華;李月芹;龐智;趙毅;趙堅(jiān)敏;聶錦山;陳衛(wèi)昌;;炎癥性腸病患者外周血輔助性T細(xì)胞1和輔助性T細(xì)胞17水平及其臨床意義[J];中華內(nèi)科雜志;2013年05期

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本文編號(hào)：1595959