本文關鍵詞： 急性肺損傷 新生鼠 脂多糖 微小 RNA　出處：《安徽醫(yī)科大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:構建新生SD大鼠急性肺損傷模型;動態(tài)檢測急性肺損傷新生SD大鼠肺組織和支氣管肺泡灌洗液中micro RNA-155和127的表達水平。方法:1、80只新生SD大鼠按隨機數(shù)字表法分為LPS組(LPS 1mg組、2mg組、3mg組)和對照組,每組20只,分別給予腹腔注射1、2、3mg/kg LPS(用生理鹽水稀釋至0.2ml)和生理鹽水0.2ml。于24h內觀察各組新生SD大鼠一般情況后處死并取材。觀測肺組織大體病理情況、病理評分、肺組織濕重/干重比值和放射狀肺泡數(shù)的變化;ELISA法檢測支氣管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的水平;蛋白免疫印跡法檢測肺組織中TNF-α和IL-6蛋白的表達。2、80只新生SD大鼠分組及給藥方法同1,分別在1h、6h、12h和24h四個時間點取材。RT-PCR法檢測肺組織和支氣管肺泡灌洗液中miR-155和127的表達水平。結果:1、(1)新生大鼠一般情況:LPS組新生大鼠均出現(xiàn)活動減少、反應遲鈍、嗜睡、呼吸頻率增快和呼吸困難等表現(xiàn)。(2)肺大體觀察:LPS組新生大鼠出現(xiàn)肺水腫、出血等病變,隨著LPS劑量增加,病變程度越發(fā)嚴重。(3)肺組織病理評分:LPS組分別為1.91±0.11,2.78±0.16和5.19±0.49,與對照組相比,具有統(tǒng)計學意義(F=160.94,P0.05);LPS組間比較,也具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(4)肺組織中濕重/干重比值:LPS組分別為1.76±0.07,2.69±0.11和4.41±0.13,與對照組相比,具有統(tǒng)計學意義(F=292.54,P0.05);LPS組間比較,也具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(5)RAC計數(shù):LPS組分別為10.88±0.32,6.00±0.46和2.81±0.24,與對照組相比,有統(tǒng)計學意義(F=201.73,P0.05);LPS組間比較,也具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(6)支氣管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6水平:LPS組TNF-α水平分別為99.41±34.12,135.70±15.73和190.50±11.12,與對照組相比,有統(tǒng)計學意義(F=4.64,P0.05);LPS組間比較,也具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。LPS組IL-6水平分別為2164.55±60.73,2287.36±187.22和2395.36±227.53,與對照組相比,LPS 3mg組具有統(tǒng)計學意義(P0.05);LPS組間比較,也具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(7)肺組織TNF-α和IL-6蛋白水平:LPS組TNF-α和IL-6蛋白表達均升高,隨著劑量增加蛋白表達水平逐漸增加。2、(1)肺組織miR-155的表達:LPS 1mg組:miR-155在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.95±0.02,0.95±0.04,0.98±0.07和1.03±0.01;LPS 2mg組:miR-155在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.96±0.05,1.05±0.06,1.07±0.02和1.11±0.09;LPS 3mg組:miR-155在1h、6h、12h和24h的表達量分別為1.00±0.05,1.12±0.09,1.10±0.04和1.19±0.12。以上結果提示隨著時間的延長miR-155表達逐漸增加。LPS組與對照組比較,有顯著性差異(P0.05);LPS組間比較,亦有顯著性差異(P0.05)。(2)肺組織miR-127的表達:LPS 1mg組:miR-127在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.82±0.02,0.80±0.02,0.77±0.04和0.73±0.02;LPS 2mg組:miR-127在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.74±0.03,0.70±0.04,0.67±0.01和0.60±0.05;LPS 3 mg組:miR-127在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.58±0.03,0.58±0.04,0.51±0.03和0.47±0.04。以上結果提示隨著時間的延長miR-127表達逐漸降低。LPS組與對照組比較,有顯著性差異(P0.05);LPS組間比較,亦有顯著性差異(P0.05)。(3)支氣管肺泡灌洗液中miR-155的表達:LPS 1mg組:miR-155在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.90±0.03,0.95±0.04,0.99±0.03和1.06±0.04;LPS 2 mg組:miR-155在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.94±0.04,0.96±0.02,1.03±0.03和1.11±0.04;LPS 3 mg組:miR-155在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.90±0.02,1.07±0.09,1.01±0.02和1.33±0.08。以上結果提示隨著時間的延長miR-155表達逐漸增加。LPS組與對照組比較,有顯著性差異(P0.05);LPS組間比較,亦有顯著性差異(P0.05)。(4)支氣管肺泡灌洗液中miR-127的表達:LPS 1mg組:miR-127在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.81±0.02,0.78±0.04,0.67±0.01和0.66±0.02;LPS 2mg組:miR-127在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.83±0.04,0.74±0.03,0.64±0.03和0.65±0.01;LPS 3 mg組:miR-127在1h、6h、12h和24h的表達量分別為0.82±0.05,0.82±0.06,0.67±0.01和0.64±0.01。以上結果提示隨著時間的延長miR-127表達逐漸降低。LPS組與對照組比較,有顯著性差異(P0.05);LPS組間比較,亦有顯著性差異(P0.05)。結論:1、腹腔注射LPS可以制備新生大鼠ALI模型。2、miR-155和127可以作為潛在的輔助早期診斷新生兒ALI的標志物。
[Abstract]:Objective : To study the expression level of micro RNA - 155 and 127 in lung tissue and bronchoalveolar lavage fluid of neonatal SD rats . The expression levels of TNF - 偽 and IL - 6 in lung tissues were measured by ELISA . The expression of miR - 155 in LPS group was 0 . 96 鹵 0 . 02 , 0 . 95 鹵 0 . 04 , 0 . 98 鹵 0 . 02 and 0 . 73 鹵 0 . 05 respectively . ( 3 ) The expression of miR - 155 in the bronchial alveolar lavage fluid was 0 . 90 鹵 0 . 03 , 0 . 95 鹵 0 . 04 , 0 . 99 鹵 0 . 03 and 0 . 64 鹵 0 . 01 , respectively , and the expression of miR - 127 was 0 . 83 鹵 0 . 02 , 0 . 74 鹵 0 . 03 , 0 . 67 鹵 0 . 03 and 0 . 64 鹵 0 . 01 respectively .

【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R722.1;R-332

【參考文獻】

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本文編號：1501004