本文關(guān)鍵詞：無鎂誘導(dǎo)神經(jīng)元驚厥樣放電后Lingo-1對軸突的影響　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分:無鎂誘導(dǎo)神經(jīng)元驚厥樣放電后對神經(jīng)元軸突及Lingo-1表達(dá)的影響目的:研究無鎂誘導(dǎo)神經(jīng)元放電后,神經(jīng)元軸突的形態(tài)變化及Lingo-1的表達(dá)情況。方法:以培養(yǎng)10d的皮層神經(jīng)元為研究對象,根據(jù)是否經(jīng)正常細(xì)胞外液或無鎂細(xì)胞外液處理3h,分為正常組和無鎂組。應(yīng)用膜片鉗全細(xì)胞模式記錄兩組神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢话l(fā)放情況;免疫熒光技術(shù)標(biāo)記神經(jīng)元特異性神經(jīng)絲蛋白200(Neurofilament protein,NF200)檢測培養(yǎng)神經(jīng)元的純度及兩組神經(jīng)元軸突變化;以上兩種不同處理后6h、12h、24h、48h及72h五個(gè)時(shí)間點(diǎn)提取RNA及全蛋白,采用Q-PCR及Western-blot檢測兩組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)元中Lingo-1表達(dá)情況。結(jié)果:(1)無鎂組神經(jīng)元放電形式是強(qiáng)直性放電,動(dòng)作電位發(fā)放頻率明顯高于正常組(P0.05)。(2)正常組神經(jīng)元軸突粗壯、軸突間網(wǎng)絡(luò)連接較致密,NF200只在突起表達(dá);無鎂組神經(jīng)元軸突纖細(xì)、軸突間網(wǎng)絡(luò)連接稀疏,NF200在胞體內(nèi)高表達(dá)。(3)各觀察時(shí)間點(diǎn)上,無鎂組Lingo-1的表達(dá)量均高于正常組(P0.05)。結(jié)論:無鎂處理后可成功建立驚厥樣細(xì)胞模型,無鎂處理后有神經(jīng)元軸突損傷及Lingo-1表達(dá)升高。第二部分:無鎂誘導(dǎo)神經(jīng)元驚厥樣放電后Lingo-1表達(dá)升高與軸突損傷的關(guān)系目的:研究驚厥樣神經(jīng)元放電后Lingo-1表達(dá)升高與軸突損傷的關(guān)系。方法:(1)設(shè)計(jì)sh RNA慢病毒抑制神經(jīng)元Lingo-1表達(dá),并以不針對任何基因的sh RNA序列作為對照,分為正常組、對照sh RNA組和Lingo-1 sh RNA組,采用Western-blot檢測三組Lingo-1表達(dá)量。(2)設(shè)計(jì)sh RNA慢病毒抑制Lingo-1表達(dá),并以不針對任何基因的sh RNA序列作為對照,分為正常組、無鎂組、無鎂+對照sh RNA組、無鎂+Lingo-1 sh RNA組4組,用免疫熒光技術(shù)檢測神經(jīng)元軸突長度。結(jié)果:(1)神經(jīng)元中Lingo-1表達(dá)量:正常組與對照sh RNA組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,Lingo-1 sh RNA組明顯低于對照sh RNA組。(2)軸突長度:無鎂組小于正常組(P=0.000),無鎂+對照sh RNA組與無鎂組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,無鎂+Lingo-1 sh RNA組大于無鎂+對照sh RNA組(P=0.000)。結(jié)論:慢病毒介導(dǎo)的Lingo-1 sh RNA可成功抑制Lingo-1的表達(dá),降低Lingo-1表達(dá)后神經(jīng)元軸突損傷減輕,說明Lingo-1可能參與神經(jīng)元放電后神經(jīng)元軸突損傷。
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【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R720.597

【參考文獻(xiàn)】

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1 張永杰;左國平;唐敏峰;顧振;;抗LINGO-1抗體可促進(jìn)小鼠脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)纖維再生及抑制感覺纖維萎縮[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年12期

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3 曹海燕,姜玉武,吳希如;無鎂誘導(dǎo)培養(yǎng)的大鼠皮層神經(jīng)元癲癇樣放電[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年03期

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本文編號：1353846